对新时期临床微生物学课程建设的思考

当人类基因组计划正以出人预料的高速度走向最后的胜利,后基因组时代也正呼之欲出的日子里,在该计划中作为'模式生物'发挥了巨大作用的微生物学也得到了巨大的发展。目前,根据 Genbank 公布的数据,已完成基因组测序工作的细菌就有近五十种,而已完成尚未公布和正在研究之中的也已超过了百种,微生物基因组学研究正以惊人的速度在向前飞跃。可以说。

在检验医学专业开设《诊断分子生物学》课程

二十一世纪将是生命科学的世纪。随着人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的实施和完成,人们对生命的认识将从感性认识进入到一个全新的理性认识阶段。近二十年来,生命科学取得了惊人的进展,分子生物学已成为生命科学的带头学科,并迅速渗透到医学的各个领域。医学检验与诊断学也不例外,分子生物学技术在医学检验诊断中的广泛应用,逐步形成诊断分子生物学(Diagnosis Molecular Biology)这一学科分支。

坚固专业思想,深化检验医学教学改革

随着人类医学的飞速发展,如何培养高素质的检验医学复合型人才成为新课题。为了适应新时期医学发展及教学改革的需要,探索医学院校检验专业教学新模式,在对医学检验专业本科学员专业思想以及专业授课情况调查分析的基础上,探索课堂教学的基本规律,大力开展教学改革,提高实验课质量、加强专业理论课与临床实际的联系,不断提高教学质量。

慢性腹泻患者肠道需氧优势菌群检验及药敏性分析

目的：建立肠道需氧优势菌群检验方法，明确慢性腹泻与肠道需氧优势菌群的关系。方法：取病人和健康人新鲜粪便分别接种于 Ｓ Ｓ．， Ｍａｃ Ｃｏｎｋｅｙ 及血液琼脂平板上，３５℃２４～４８ ｈ 后从均匀分布的单个菌落取１～３ 种优势生长的菌落数个进行鉴定，对非大肠埃希氏菌优势菌做药敏试验。结果：慢性腹泻患者中以非大肠埃希氏菌为优势菌者占６７．０％ （７３／１０９），分离出共２２ 种７６ 株细菌、３ 株真菌，其中 Ｇ－ 杆菌１７ 种５５ 株，以奇异变形杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、液化沙雷氏菌、肺炎克雷伯氏菌为主，占５８．０％ （３２／５５）； Ｇ＋ 球、杆菌５ 种２１ 株，以屎链球菌、枯草芽胞杆菌为主，占７１．４％ （１５／２１）。３０ 例健康人中未发现一例非大肠埃希氏菌优势生长者（ Ｐ ＜ ０．００１）。优势菌对丁氨卡那霉素、氟哌酸等敏感性较好，而对青霉素、痢特灵、磺胺等过去常用抗生素的敏感率较低。结论：肠道优势菌群检验方法对于慢性腹泻患者进行肠道需氧优势菌群检验具有重要意义。

聚乳酸及聚乙二醇改性聚乳酸体外降解研究

目的 研究聚乳酸与聚乙二醇改性聚乳酸的体外降解特性。方法 采用奥氏粘度计或凝胶层析法 (GPC)测定分子量 ,并考察其重量与形态的变化。结果 聚乙二醇改性聚乳酸开始降解的时间早于聚乳酸 ,而在相同时间内 ,前者的重量和分子量下降也较后者明显。结论 聚乙二醇改性聚乳酸亲水性优于聚乳酸 ,是较理想的亲水性药物载体材料。

PELA幽门螺杆菌口服疫苗微球黏膜免疫研究

目的 应用复乳挥发法制备PELA泛影葡胺显影微球与幽门螺杆菌超声上清口服疫苗微球 ,并进行靶向与黏膜免疫研究。方法 采用CT技术 ,研究显影微球的靶向 ;PELA幽门螺杆菌超声上清口服疫苗微球口服免疫小鼠后 ,运用ELISA法检测血清、唾液、肠粘液的抗体改变情况 ,ELISPOT法分析派伊尔氏结 (PP结 )抗原特异性抗体形成细胞 (ASC)的数量增减。结果 口服粒径在 10 μm以下的微球 ,首先粘附在胃肠黏膜表面 ,后投递于PP结 ;H .pylori疫苗微球免疫后可诱导较高的唾液sIgA水平和肠道sIgA反应 ,PP结抗原特异性抗体形成细胞 (ASC)数量与肠道sIgA水平密切相关。

一种改良幽门螺杆菌液体培养方法

目的：探索一种简便的液体培养方法培养幽门螺杆菌（Ｈｐ）。方法：采用组织培养瓶，装少量含有１０％小牛血清、０．５％淀粉、１０ｍｇ／Ｌ万古霉素和２５００Ｕ／Ｌ多粘菌素Ｂ的脑心浸液肉汤，在厌氧罐中通过抽气换气建立微需氧环境，３７℃振荡培养，平板菌落计数法检测生长情况。结果：培养２４～４８ｈ，液体中活菌水平超过１０８ＣＦＵ／ｍｌ，涂片染色细菌形态典型。结论：此Ｈｐ液体培养方法简便可行，细菌生长良好，能满足对Ｈｐ的毒力因子。

新型隐球菌脑膜炎一例及菌株鉴定

新型隐球菌脑膜炎一例及菌株鉴定Ａｃａｓｅｏｆｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓｏｆｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｒａｉｎ解晓珍，田洪明（重庆第三军医大学附属新桥医院检验科）重庆，６３００３７潘绍武（重庆...

幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性研究

目的对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性进行研究,探讨Hp感染与胃内菌群的关系。方法建立Hp感染的蒙古沙鼠模型,空白对照组、阴性对照组、直接感染组和预处理感染组各15例,4周后采集胃黏膜样本,同时检测HP定植率,并提取细菌基因组DNA,采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)对黏膜局部菌群进行指纹图谱分析,并对特异性条带进行测序鉴定分析。结果预处理感染组感染率(93.3%)与直接感染组感染率(26.7%)有明显差异(P<0.05);各实验组PCR-DGGE指纹图谱分析显示条带数量,空白对照组(21.6±2.5)、阴性对照组(3.3±1.1)、直接感染组(14.6±2.4)和预处理感染组(7.2±2.2),经统计学分析,各组间均有明显差异(P<0.05),提示蒙古沙鼠各组间菌群多样性存在显著的差异性。结论 Hp感染与胃黏膜菌群结构的变化密切相关。

从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位

目的 建立一种有效的从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位HspA的方法。方法 重组基因工程大肠杆菌发酵后 ,表达的Hp的HspA包涵体经洗涤、变性、复性 ,采用QSepharoseHighPerformance阴离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化。使用SDS PAGE和HPLC检测纯度 ,选用ELISA和动物实验对纯化蛋白的免疫学活性和生物学活性进行鉴定。结果 Hp的HspA包涵体经洗涤和溶解后 ,Hp的HspA的纯度 >60 %。包涵体溶解液经阴离子交换层析和凝胶过滤层析后纯度超过 95 %。Hp的HspA纯品经检测具有良好的免疫学活性和生物学活性。结论 本研究建立的分离纯化方法可从包涵体中获得高纯度的重组HspA蛋白 。

抗HIV病毒药物结构设计的进展

抗ＨＩＶ病毒药物结构设计的进展邹全明１李华２鲁东水１李文健１综述朱锡华２审阅治疗人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染药物的研究进展较快，自病毒发现以来的１２年内，四种抗病毒药物已经注册，其中三种是在过去两年内完成注册的。然而，尽管做了这些大量的努力，对于获...

细菌拉丝试验的应用探讨

细菌拉丝试验的应用探讨Ａｓｔｕｄｙｏｆａｄａｐｔｉｏｎｏｆｔｈｅ“Ｓｔｒｉｎｇ”ｔｅｓｔｆｏｒｂａｃｔｅｒｉａ￥／／解晓珍，田洪明，舒亦平（第三军医大学新桥医院检验科）６３００３７潘绍武（第三军医大学检验系临床微生物学教研室）６３００３８关键词细菌；...

人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达

目的 在大肠杆菌中实现人IL 18成熟蛋白 (mhIL 18)的高效表达。方法 采用RT PCR由人肝脏Kupffer细胞中扩增mhIL 18基因 ,构建非融合型原核表达质粒petTT mhIL 18,转化至大肠杆菌DH5α ,用IPTG诱导重组蛋白表达 ,超声裂解细胞提取包涵体 ,采用SDS PAGE及Westernblot分析重组蛋白的表达 ,包涵体蛋白经 8mol L尿素溶解 ,透析复性 ,ELISA检测重组蛋白诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结果 所扩增的mhIL 18基因与GenBank公布的序列一到。经IPTG诱导 ,mhIL 18在大肠杆菌中的表达量占菌体蛋白的 40 %以上 ,在细胞中以包涵体形式存在 ,复性的重组蛋白具有诱生IFN γ的能力。结论 mhIL

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析

目的分段表达幽门螺杆菌(HP)尿素酶B亚单位(UreB),并对其进行免疫学性质分析,为精确定位其保护性表位奠定基础。方法用生物信息学软件分析UreB全长基因,选择分段点,PCR分别扩增其5个片段,构建于pET-11c(+)原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,ELISA及Western blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果成功克隆了UreB的5个基因片段,基因测序结果与Genbank公布的序列一致.经SDS-PAGE分析,5个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符,在大肠杆菌中实现了表达。ELISA和Western blot分析显示,表达的5个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。结论 UreB的分段表达为进一步研究UreB保护性表位及HP疫苗鉴定奠定了新的基础。

抗肝纤维化药物研究现状

抗肝纤维化药物的研究十分活跃 ,药物种类很多 ,分别作用于肝纤维化发生的各个环节。目前研究较多的抗肝纤维化药物有干扰素、影响胶原合成及代谢的药物、细胞因子拮抗剂、针对整合素的药物、抗氧化剂和中草药等。但至今为止 ,尚未找到一种十分有效的可供临床使用的抗肝纤维化药物 ,在寻找安全有效的抗肝纤维化药物方面仍有许多工作要做。

医学教育中师资培训的几点体会

医学教育的核心是培养高质素的医学人才 ,教师是教学的施行者 ,要把教学开展好 ,师资是关键 ,在医学教育中对教师作好培训尤为重要。就医学教育中师资培训问题谈几点认识和体会。

小鼠口服重组LTB和HpUreB免疫活性的研究

目的 观察重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 (rLTB)的粘膜佐剂活性以及重组Hp尿素酶B亚单位 (rUreB)的免疫学活性 ,为制备安全有效的Hp疫苗奠定基础。方法 ELISA检测rLTB的GM1(神经节苷脂 )结合活性 ,利用本室基因工程重组表达的rLTB和rUreB口服免疫BALB/c小鼠后 ,在第 4和 /或 5周ELISA方法检测血清IgG ,以及唾液、粪便抽提物、肠粘液sIgA水平。采用3 H掺入实验 ,检测小鼠脾脏淋巴细胞对特异性抗原的增殖反应。结果 ①rLTB具有GM1结合活性。②与不加佐剂的对照比较 ,加rLTB的实验组 ,能够有效地诱发唾液及肠道sIgA的产生。③口服HprUreB抗原能够刺激小鼠产生特异性的IgG和sIgA。④3 HT dR掺入实验提示加佐剂组较不加佐剂组 ,脾脏淋巴细胞对特异性抗原的增殖反应更强。⑤不加佐剂组血清IgG ,免疫第 5周较第 4周高 ;加佐剂则是第 4周比第 5周高。结论 重组LTB具有良好的粘膜佐剂功能 ;HprUreB具备良好的免疫原性 ;小鼠口服rLTB和rUreB后可以产生保护性sIgA ;

婴儿宋氏痢疾菌败血症的诊断

婴儿宋氏痢疾菌败血症的诊断ＤｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＳｈｉｇｅｌｌａｓｏｎｎｅｉｓｅｐｔｉｃａｅｍｉａｉｎｉｎｆａｎｔ潘绍武（第三军医大学检验系临床微生物学教研室）６３００３８田洪明，解晓珍，冯连荣（第三军医大学新桥医院检验科）６３００３７病例摘要：患者...