临床检验实验室应该和临床医生共同注重向患者解释临床检验指标的含义

长期以来,医生在医疗过程中都缺乏对患者进行临床检验指标的含义解释这一重要环节,这不仅有碍于医患沟通,更可能引发不必要的医患矛盾导致严重医疗事故。因此,临床检验实验室和临床医生应树立向患者解释检验指标的含义这一医疗理念,从而提高医疗质量。

TLR2、miR-155及SOCS1基因检测在肺结核诊断中的意义

目的探讨TLR2、mi R-155及SOCS1基因表达在肺结核诊断中的价值。方法采用病例-对照研究设计,纳入研究对象60例,根据肺结核感染状态分为3组:结核阴性对照(Control,n=20)、活动型结核(ATB,n=20)及潜伏型结核(LTB,n=20)。从人全血中分离外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR检测TLR2、BIC、mi R-155、SOCS1及相关细胞因子等基因表达情况。结果 Q-PCR结果表明TLR2、SOCS1及mi R-155在各组别中差异表达,进一步统计分析发现,活动型结核组中mi R-155/SOCS1比值显著低于正常组(P<0.05)及潜伏型结核组(P<0.001),而潜伏型结核组中mi R-155/SOCS1比值显著高于正常组(P<0.001)。结论人外周血单个核细胞TLR2、mi R-155及SOCS1的差异表达及mi R-155/SOCS1比值对潜伏性肺结核及活动性肺结核的鉴别诊断具有重要的参考价值。

慢性肾脏病3~5期患者骨代谢相关指标分析

目的探讨慢性肾脏病（CKD）3~5期患者血清骨代谢相关指标水平的变化情况,为继发性骨代谢疾病的早期诊断与预防提供依据。方法回顾性分析本院收治的确诊为CKD 3~5期的261例患者血清中甲状旁腺激素（iPTH）、钙（Ca）、磷（P）、骨钙素（BGP）、降钙素（CT）、骨特异性碱性磷酸酶（OST）、25-羟基维生素D[25（OH）D]等指标水平的变化,并与反映肾脏功能的血清尿素（Urea）、尿酸（UA）、血肌酐（SCr）等指标进行相关性分析。结果在CKD 3~5期,血清iPTH和P水平进行性升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;BGP和CT在CKD5期明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。Spearman相关分析显示,iPTH、P与Urea、UA、SCr均呈正相关（P〈0.05）。结论 CKD 3~5期iPTH、P、BGP等指标有差异,并与Urea、UA和SCr等指标呈正相关,可辅助诊断骨代谢疾病。

血清MIF及BCMA表达水平与SLE活动性的相关性研究

目的观察SLE患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)水平的变化,探讨其与SLE疾病活动性的关系,分析两蛋白质分子间的相关性。方法用ELISA测定32例活动期和20例非活动期SLE患者血清MIF、BCMA浓度,并以30例健康人作对照,观察SLE患者血清MIF、BCMA水平的改变,分析MIF、BCMA水平与疾病活动性及相互之间相关性。结果 SLE患者血清MIF、BCMA水平较对照组显著升高,且与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈显著正相关(r分别为0.76和0.78,P值均<0.01)。SLE患者血清中BCMA浓度与抗dsDNA抗体、抗核抗体浓度显著相关(r分别为0.75和0.64),MIF浓度与抗dsDNA抗体显著相关(r=0.65),与抗核抗体浓度无显著相关性(r=0.15)。MIF与BCMA间无相关性。结论血清BCMA、MIF水平可作为反映SLE活动性的重要指标之一。T、B淋巴细胞活化均参与SLE发病机制,B淋巴细胞活化程度与SLE活动性有关。

实验诊断学教学见习课程设置改革的几点思考

目前实验诊断学教学普遍存在着教学目标不明确、课程设置滞后、学时少、内容繁琐等弊端。对此我们拟在其中的见习课程设置环节上进行相应的改革，通过大纲修改、见习课程设置的调整，在有限的学时中，使教学内容更新、水平更高、教学效果更好，教学形式更灵活，提高学生学习兴趣。目标是提高学生临床综合分析能力，既了解实验意义，又熟悉临床，并将两者紧密结合，使实验技术更好地为临床服务，提高医学生的综合素质和整体水平。

慢性阻塞性肺病并发呼吸道感染痰细菌结果分析

本文对第三军医大学附属三院呼吸科1979—1989年冬季(11月—2月)慢性阻塞性肺病并发急性呼吸道感染患者的痰细菌培养,药敏试验进行了分析。

几种测定血浆水浓度方法的比较

对干燥法测定血浆水浓度和公式计算血浆水浓度进行了评价。干燥法批内、批间精密度均很好，批内CV=0．79％（n=20），批间CV=1．08％（n=20），回收率在99％～102％之间。样本密封贮存在4℃3w和－20°C2mo对测定结果无明显影响。干燥法是最可靠、最实际的方法。禁食过夜的正常人参考水平为49．5～52．9mol／L（n=40）。对各种病人的标本进行测定，大多数是在参考范围之内。血浆水浓度降低见于1例超滤血液透析病人和1例II型糖尿病人。血浆水浓度升高见于1例肝癌，1例肝硬化，3例透析前和1例透析后病人。公式计算血浆水浓度不可靠，它使高值降低，使低值升高。

52Hz小分子团水对大鼠尿液成分的影响及意义

目的通过乙二醇诱导大鼠肾结石模型观察52Hz小分子团水对尿液成分及尿液过饱和的影响,以探讨其预防结石形成的机制。方法选取60只雌性SD大鼠随机分为4组,即普通水+乙二醇喂养组(A组)、小分子团水+乙二醇喂养组(B组)、普通水喂养组(C组)、小分子团水喂养组(D组),每组15只。4组大鼠饲养条件相同,均可自由饮水饮食。喂养40d后测定各组大鼠血、尿生化指标,通过尿生化结果计算尿液离子活度积指数,同时观察结石形成情况。结果 A组大鼠24h尿量为(6.70±1.47)mL,均高于B,C,D组,差异无统计学意义。A组大鼠尿钙水平为(4.31±0.34)mmol/L,均高于B,C,D组,且差异有统计学意义(P<0.05)。A组大鼠尿草酸水平为(1.24±0.31)mmol/L,均高于B,C,D组,且差异有统计学意义(P<0.05)。A组大鼠尿柠檬酸水平为(7.76±1.15)mmol/L,B组大鼠尿柠檬酸水平为(8.52±1.34)mmol/L;其中A组与C,D组比较差异有统计学意义(P<0.05);B组与C,D组比较差异无统计学意义。A组大鼠尿镁浓度最低,为(6.58±0.78)mmol/L,与B,C,D组比较差异均有统计学意义(P<0.05);B组大鼠尿镁浓度为(7.52±1.18)mmol/L,与C,D组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4组大鼠血钙、血镁、尿素、血磷水平差异无统计学意义。A组大鼠肌酐、尿素氮水平明显高于B,C,D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论52Hz小分子团可提高尿液中离子溶解度,在降低结石形成离子浓度的同时可增加抑制结石形成离子的浓度,进而抑制结石的形成。

量子点高效偶联DNA用于铜绿假单胞菌检测

目的建立量子点高效标记铜绿假单胞菌16srDNA的方法,为实现铜绿假单胞菌的快速、准确检测奠定基础。方法采用巯基法固定铜绿假单胞菌的16SrDNA P1探针于石英晶体金膜上,加入检测样本进行首次杂交,清洗后加入量子点标记的P2探针进行第2次杂交;最终通过荧光强度判断铜绿假单胞菌的浓度。结果不同的DNA∶QD比例可以产生不同的QD-DNA复合体,该复合体的荧光强度对最终检测结果具有极大影响;随着DNA∶QD的比例增加,其偶联效率也随之增加,当DNA∶QD的比例为100∶1时,其偶联基本实现饱和,偶联效率不再升高。结论该实验建立了一种新型的基于量子点检测铜绿假单胞菌16SrDNA的方法,为临床微生物的快速检测提供了一种新的技术方案。

核酸探针长度对量子点微生物传感器的影响

目的探讨并明确量子点核酸传感器检测微生物核酸样本时探针长度对杂交效率和检测结果的影响。方法首先合成金黄色葡萄球菌16S rDNA探针,然后在其5′端添加不同长度的重复碱基序列,分别合成5条长度不同的以胸腺嘧啶结尾的探针;采用巯基法固定金黄色葡萄球菌16S rDNA探针于石英晶体微阵列上,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品频率漂移量以判断不同核酸长度时的杂交效率,并用荧光显微镜观察形成不同双链复合物的荧光强度和荧光效率,以此判断不同碱基序列长度探针对荧光效率和杂交效率的影响,并运用SPSS软件对数据进行统计分析。结果对于普通的短链核酸杂交反应,随着探针长度增加,杂交效率呈现依次递增的趋势,当离子强度为40mmol/L时,杂交效率和荧光强度增加最快,其后再增加探针长度,杂交效率增加速度变缓。结论探针长度是影响杂交效率的主要原因之一,通过增加探针长度可以提高杂交效率和荧光强度,但同时也会增加二聚体产生概率,故应根据实际需要设计长度适合的探针。

漏声表面波生物传感器直接快速检测病原体DNA的实验研究

目的应用漏声表面波生物传感器直接检测从临床标本中提取的HPV基因组DNA。方法选取36例临床确诊为宫颈癌的患者,提取其生殖器分泌物的基因组DNA,并经荧光定量PCR检测为HPV阳性的标本,以14例健康志愿者为阴性对照;利用漏声表面波生物传感器检测临床样本,并与荧光定量PCR法进行方法学比较。结果传感器法检测35例标本为阳性,阳性率为97.22%,而荧光定量PCR法检测36例均为阳性;14例阴性对照标本中,两种方法的检测结果均为阴性;传感器法的检测限为1.21pg/L。结论传感器法与荧光定量PCR法差异无统计学意义,一致性较好,且漏声表面波生物传感器实现了对临床标本中HPV基因组DNA的直接快速检测。

纳米银颗粒体外杀灭铜绿假单胞菌效应研究

目的研究不同粒径纳米银颗粒对其杀灭铜绿假单胞菌的效果差异,为实现铜绿假单胞菌的杀灭奠定基础。方法合成不同粒径的纳米银颗粒,分别将这些纳米银颗粒与处于指数生长前期的细菌相混合,经过不同处理时间后取100μl加入LB培养基中培养18h后,运用CAM/EthD-1荧光染料进行细菌细胞死活分析。结果不同粒径大小的纳米银颗粒的杀菌效果不一致:颗粒越小,其杀菌和灭菌的效果越好,经10nm的纳米银颗粒作用5min可杀灭80.0%的铜绿假单胞菌。结论不同粒径纳米银颗粒及浓度对其杀灭铜绿假单胞菌的效果不同,颗粒越小,其杀菌和灭菌的效果越好,从而为临床微生物的杀灭提供了一种新的技术方案。

量子点微生物传感器核酸检测中离子强度的优化

目的探讨并建立量子点核酸传感器检测微生物样本时缓冲液中最佳阳离子价态及最优离子强度。方法采用巯基法固定金黄色葡萄球菌16S rDNA探针于石英晶体微阵列上,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品频率漂移量以确定最佳离子强度,并用荧光显微镜观察不同反应体系中杂交完成后的荧光强度和荧光效率,以此判断单价和二价阳离子对荧光效率和杂交效率的影响,并运用SPSS软件对数据进行统计分析。结果该量子点传感器检测平台具有良好的性噪比;对于普通的短链核酸杂交反应,随着离子强度增加,杂交效率呈现先增后减的趋势,当离子强度为20mmol/L时,杂交效率达到峰值,荧光强度约为0.95AU;对于MgCl2缓冲液,当离子强度为15mmol/L时,杂交效率达到最大,约为0.82AU;对于CuCl2缓冲液,离子强度为15mmol/L时,杂交效率达到峰值,约为0.72AU。结论单价阳离子NaCl缓冲液是基于荧光检测的微生物传感器的首选,其最佳离子强度为20mmol/L,缓冲液体系中应尽量避免添加二价阳离子。

量子点荧光双杂交技术检测铜绿假单胞菌的实验研究

目的建立量子点荧光双杂交核酸检测平台,并实现铜绿假单胞菌(PAE)的快速、准确检测。方法采用巯基法固定铜绿假单胞菌的16S rDNA探针于石英晶体金膜上,加入检测样本进行首次杂交,清洗后加入量子点标记的第二探针进行第2次杂交,最终通过荧光强度以判断PAE是否存在。结果该量子点双杂交检测平台具有良好的性噪比,其荧光强度与扩增产物的稀释倍数成线性负相关,当PAE扩增产物的稀释倍数在<10 000倍时具有良好的线性曲线;特异性实验表明,该方法可以将PAE与同源的多种细菌相区分,证明了其高度特异性,方法学比较实验证明,双探针杂交方法的灵敏度和特异性均>90.0%,已能初步满足临床检测需要。结论该量子点荧光双杂交核酸检测平台,可有效将PAE与同源的多种细菌相区分,为临床微生物的快速检测提供了一种新的技术方案。

漏声表面波生物传感器检测系统构建时靶序列浓度的影响

目的探讨新型的漏声表面波(LSAW)传感器检测系统构建时,人乳头状瘤病毒(HPV)靶序列浓度对其杂交效应和反应时间的影响。方法LSAW传感器表面先固定上1.0μmol/L的肽核酸(PNA)探针,观察终浓度为1pg/L～1mg/L的HPV靶序列DNA与探针进行杂交所引起的相位变化及反应所需时间,并对相位下降值与靶序列浓度做线性回归,确定其线性范围。结果随着靶序列浓度从1pg/L增加到1mg/L,杂交反应引起的相位下降值呈先增加后趋于缓和的趋势,以100μg/L为分界线,而杂交平衡时间并没有显现出一定的变化趋势;在1pg/L～100μg/L的HPV靶序列浓度范围内,相位变化与靶序列浓度的线性回归方程为△P=2.3392lgC+14.584,相关系数r2=0.9622。结论随着靶序列浓度的升高,杂交反应引起的相位下降值呈典型饱和曲线趋势,靶序列浓度的线性检测范围为:1pg/L～100μg/L。

基因芯片技术在泌尿系统结核诊断中的应用

目的引入一种新方法对尿液中的结核分枝杆菌进行检测。方法留取患者24h尿液标本,离心,收集沉淀,并从中提取DNA,用晶芯分枝杆菌菌种鉴定试剂盒对样本DNA进行检测。结果 5例尿液中的结核分枝杆菌可以被基因芯片检测出,用以辅助抗痨治疗。结论用基因芯片方法对尿液中的结核分枝杆菌进行快速检测是可行的。

PNA与DNA探针对漏声表面波传感器特异性的影响

目的探讨以PNA作为杂交探针与普通的DNA探针相比,在漏声表面波生物传感器生物杂交反应中的优越性。方法用巯基固定法将PNA、DNA两种探针分别固定在漏声表面波生物传感器的金膜表面,分别与完全匹配、1个及2个碱基错配的靶序列进行杂交反应,观察两种不同的探针与靶序列反应所引起的相位变化及反应平衡时间。结果与DNA探针相比,PNA探针识别碱基错配的能力显著提高,且杂交平衡时间更短。结论 PNA探针可提高漏声表面波生物传感器的检测特异性。

应用生物传感器检测单核苷酸多态性

21世纪是生命科学的时代，随着“人类基因组计划”的完成，人类遗传信息的秘密被揭开。单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）是人类基因组最丰富的遗传变异，SNP的研究应运而生，并且发展迅速。研究表明，SNP与许多疾病直接相关，是决定人类疾病易感性和药物反应差异的主要因素。