自动分析仪教学在医学检验本科实习教育中的应用

充分发挥实习医院对医学检验表科生在实习中的指导作用,紧跟时代脉搏,适应科技的发展。本文从五个方面阐述怎样的医学检验本科实习中加强自动分析仪教学工作:充分调动学员积极性;广泛开展自动分析仪理论及技术专题讲座;重视全自动生化分析仪的带教工作;提高质控意识,加强质控培训;全面提高教师素质。

医学检验本科实习生科研素质培养探讨

检验医学也称实验室医学(LaboratoryMedicine),是现代实验室技术结合临床医学发展起来的一个医学重要分支。它已成为一门独立的学科专业,在我国国家教委制定颁布的专业目录中现已经作为二级学科命名为临床检验诊断学。由于历史的原因,我国的检验医学教育起步较晚,直到二十世纪八十年代才开始培养检验本科以上的专业人才。由于检验实习教育任务繁重。

人肠道α-防御素5促进辐照诱导小鼠肠道损伤的修复

目的观察辐照对C57小鼠肠道的损伤作用及人α-防御素5(humanα-defensin 5,HD5)在其中的保护效应及功能。方法基于C57小鼠构建肠道α-防御素敲除小鼠(MMP7^(-/-)小鼠)模型,随后将HD5基因转入MMP7^(-/-)小鼠,构建HD5转基因小鼠(HD5tg小鼠)模型。将实验分为野生型C57小鼠组(WT组)、MMP7^(-/-)小鼠组和HD5tg小鼠组。利用5 Gy X射线(1.26 Gy/min)辐照各组小鼠后,统计分析30 d内小鼠生存状况,同时在0、2、10 d收取小鼠回肠组织。利用HE染色观察小鼠回肠病理损伤;TUNEL评估小鼠肠黏膜组织细胞凋亡;免疫荧光和PAS染色分析回肠肠道干细胞增殖、分化状态;Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB等蛋白表达;RT-qPCR检测肠黏膜IL-1、IL-6及IL-10等炎症因子转录水平。结果成功构建并繁育MMP7^(-/-)和HD5tg小鼠,WT组、MMP7^(-/-)组、HD5tg组辐照后30 d小鼠生存率分别为50%(10/20)、35%(7/20)和55%(11/20),WT组和HD5tg组小鼠生存率显著高于MMP7^(-/-)组(P<0.05),WT组和HD5tg组小鼠组间生存率无统计学差异。与MMP7^(-/-)组相比,HD5转入后显著改善小鼠辐照后小肠绒毛和隐窝结构病理损伤;抑制肠黏膜细胞发生凋亡;促进肠道干细胞增殖、分化;抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路活性,进而降低IL-1β、IL-6炎性因子表达水平(P<0.05)。结论HD5通过改善辐照诱导的小鼠肠道上皮屏障功能障碍,促进肠黏膜细胞更新和组织修复,抑制炎性损伤,进而增强C57小鼠抗辐照能力。

LAMP结合示差脉冲伏安法快速检测肺炎克雷伯菌的方法建立及临床应用

目的利用环介导恒温扩增(LAMP)技术结合示差脉冲伏安(DPV)法,建立快速检测肺炎克雷伯菌的方法,并将其应用于小儿腹泻病原菌分析。方法通过基因比对与引物设计,建立针对肺炎克雷伯菌的LAMP检测方法。采用LAMP技术对肺炎克雷伯菌和其他8种干扰菌以及对不同浓度肺炎克雷伯菌进行扩增,结合DPV法评价其特异性及灵敏度。将200份腹泻患儿的粪便标本同时采用LAMP方法与培养法进行检验,对比2种方法检测肺炎克雷伯菌的阳性率。统计近2年该院门诊及住院小儿腹泻病例,初步分析其常见腹泻致病菌种类及比例。结果设计出针对肺炎克雷伯菌的LAMP检测方法,该法只针对肺炎克雷伯菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性,LAMP法最低检测限为10CFU/mL,显示出较高的灵敏度。200份腹泻患儿粪便标本,采用LAMP法与培养鉴定法检测的肺炎克雷伯菌阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。近2年内该院小儿腹泻粪便标本中共检出致病菌709株,主要病原菌分别为志贺菌(34.23%)、大肠杆菌(15.40%)、铜绿假单胞菌(12.96%)、弗劳地枸橼酸杆菌(7.82%)、沙门菌(6.36%)、白色念珠菌(6.11%)、肺炎克雷伯菌(4.40%)、产气荚膜梭菌(3.67%)、变形杆菌(3.42%)、其他菌(5.63%)。结论设计出了针对肺炎克雷伯菌的LAMP检测方法,该法具有良好的特异性和较高的灵敏度,能够用于肺炎克雷伯菌的快速检验。

IL-17与Hcy、Cys-C联合检测在2型糖尿病肾病肾损伤中的诊断价值

目的研究白细胞介素-17(IL-17)与同型半胱氨酸(Hcy)和胱抑素C(Cys-C)联合检测在2型糖尿病肾病肾损伤中的诊断价值。方法将107例糖尿病肾病患者随机分为无清蛋白尿组,微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组,对照组选取同期门诊的健康体检者40例,比较其中Hcy,Cys-C和IL-17的水平变化。结果糖尿病肾病组患者Hcy,Cys-C和IL-17水平明显升高,与对照组差异有统计学意义(P<0.05),且随着蛋白尿排泄量的增加,IL-17,Hcy和Cys-C水平不断升高;IL-17与Hcy、Cys-C水平呈正相关(分别为r=0.75、r=0.59,P<0.05);对照组IL-17与Hcy、Cys-C的综合阳性检出率为5.0%,而微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组的联合检测阳性率分别为88.6%和91.9%,联合检测的阳性率明显高于对照组(P<0.05),表明3项联合检测可显著提升2型糖尿病的检出率。结论 IL-17与Hcy和Cys-C检测对糖尿病肾功能损伤较为敏感,联合检测阳性检出率高于各单项检出率,在预防、延缓糖尿病肾病中有较重要的临床价值。

地表水中耐热大肠菌群对10种常用抗生素的耐药性研究

目的探讨抗生素滥用造成的水环境中耐热大肠菌群的抗生素耐药现象及其负面效应。探讨不同水体中耐热大肠菌群抗生素耐药谱的区别。方法采用滤膜法分离、API微生物分析系统鉴定受医院污水污染的地表水和农业流域地表水中耐热大肠菌群,Kirby-Bauer法分析其对人畜常用10种抗生素的耐药性。结果分离所得62株菌中61株(98.4%)为耐热大肠菌,1株为畜禽病原菌亚利桑那沙门氏菌(S.arizonae);100%具多重耐药性,对5种及5种以上抗生素耐药的占92%;对10种抗生素耐药性依次为:青霉素100%,红霉素98%,链霉素95%,氧氟沙星82%,庆大霉素79%,诺氟沙星77%,环丙沙星68%,氨苄青霉素47%,头孢他啶45%,丁胺卡那霉素40%。医院污水污染地表水样分离株对氨苄青霉素、链霉素的耐药率(59%和100%)显著高于农业流域水样分离株(26%和87%,P<0.05)。结论从两类地表水中分离的耐热性大肠菌群均有不同程度的耐药性。受医院污水污染地表水中耐热性大肠菌群的耐药率显著高于农业流域地表水。

xMag^(TM)异硫氰酸根磁微粒偶联GOD和HRP测定葡萄糖的研究

目的建立以xMagTM异硫氰酸根磁微粒为载体的葡萄糖检测体系。方法以xMagTM异硫氰酸根磁微粒作为葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根过氧化物酶(HRP)的载体,将葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶经偶联法固化于经预处理的磁微粒,从而检测葡萄糖的浓度。结果用xMagTM异硫氰酸根磁微粒检测葡萄糖浓度与临床结果相符。结论 xMagTM异硫氰酸根磁微粒可作为GOD和HRP的理想载体,作为检测葡萄糖的浓度工具。

Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站的检测性能及临床应用价值

目的验证Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站的检测性能,评价其临床应用价值。方法采用电子天平测定Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站加样通道的加样容量和洗板机的洗板残留量,测温仪测定各控温温育模块温度,标准滤光片测定酶标分析仪性能,计算携带污染率,评价各指标是否满足Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站的技术要求,并与Tecan Freedom Evolyzer全自动酶免疫分析系统比较,评价Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站的临床应用价值。结果 Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站各加样通道的加样容量、洗板残留量、各控温温育模块温度、酶标分析仪性能、携带污染率均符合技术指标的要求。与Tecan Freedom Evolyzer全自动酶免疫分析系统检测结果的符合率为100%,二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Addcare Elisa800全自动酶免疫工作站能够提供较高质量的酶免疫试验结果,可以为临床的诊治工作提供良好的、科学的数据支持。

Addcare Elisa 800全自动酶免工作站临床应用经验总结

酶联免疫吸附试验（ELISA）由于测定灵敏度高、特异度高、操作简便、酶标记试剂比较稳定、无放射性污染、易于自动化,且易与其他相关技术偶联,使其成为目前应用最广泛而且发展最快的一种免疫测定技术[1]。Addcare Elisa 800全自动酶免工作站以操作简单、快速检测、结果准确等优点,实现了ELISA分析的自动化、标准化、快速化、网络化逐渐在全国各大医院使用[2-3]。

高敏C-反应蛋白作为冠心病危险因子的临床应用价值

有关高敏C-反应蛋白(hs-CRP)作为冠心病危险因子的相关报道不断增多。研究显示,hs-CRP可作为亚健康人群发生冠心病危险的一个重要预报因子,也是冠心病患者病情恶化的预报因子。现对近年来hs-CRP作为冠心病危险因子的临床研究现状作一综述。

利用环介导恒温扩增法快速检测空肠弯曲菌

目的利用环介导恒温扩增技术,以空肠弯曲菌的VS1基因设计引物,建立快速检测空肠弯曲菌的方法,以期能应用于急性腹泻和肠炎等疾病的快速检验。方法①通过基因比对与引物设计,设计针对空肠弯曲菌的环介导恒温扩增检测(LAMP)方法;②用钙黄绿素、亚甲基蓝、结晶紫、溴化乙锭4种DNA染料对扩增产物进行染色,评价各染料染色效果;③检测该LAMP方法对空肠弯曲菌及其他干扰菌的扩增情况,评价其特异性;④将该LAMP方法与培养法比较,进行统计学分析。结果①设计出针对空肠弯曲菌的LAMP检测方法;②钙黄绿素与扩增产物结合后颜色变化明显,是该LAMP方法中较好的DNA染料物质;③本LAMP检测方法只针对空肠弯曲菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性;④试验共检测了60株临床和标准菌株,对于菌株的培养物,LAMP检测结果与培养鉴定法比较差异无统计学意义(χ2=0.3333,P>0.05)。结论本试验设计出了针对空肠弯曲菌LAMP检测方法,该LAMP法较好的DNA染料物质是钙黄绿素,该方法具有良好的特异性,与培养鉴定法比较具有较高的阳性、阴性及总体符合率,能够用于空肠弯曲菌的快速检验。

脂肪酸结合蛋白测定及临床应用研究进展

脂肪酸结合蛋白 (FABP)是一组低分子量胞液蛋白 ,具有组织特异性 ,各型FABP可作为一些组织特异性损害的敏感性和特异性生化诊断指标。本文对FABP的分布、性质、测定方法及其在急性心肌梗塞、小肠缺血性损害。

利用环介导恒温扩增法快速检测溶组织梭菌

目的利用环介导恒温扩增技术,设计快速检测溶组织梭菌的方法,研究其反应特性,以期能应用于气性坏疽临床现场检验。方法通过基因比对与引物设计,设计针对溶组织梭菌的环介导恒温扩增检测(LAMP)方法。检测该LAMP方法对溶组织梭菌及其他干扰菌的扩增情况,对其特异性进行评价。(3)检测该LAMP方法对不同浓度溶组织梭菌的扩增情况,观察其最低检测限,对其灵敏度进行评价。结果设计出针对溶组织梭菌的LAMP检测方法。该LAMP检测方法只针对溶组织梭菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性。该LAMP检测方法对溶组织梭菌的最低检测限为1×101CFU/mL,显示其灵敏度较高。结论该试验设计出了针对溶组织梭菌的LAMP检测方法,该LAMP检测方法具有良好的特异性较高的灵敏度,能够用于溶组织梭菌的临床现场检验。

微型光谱仪干试剂法检测血清钾离子的研究

目的研究一种基于微型光谱仪和干化学试剂技术快速检测血清钾离子浓度的方法。方法根据酶法制备干粉钾离子试剂,研究其在微型光谱仪上的检测方法,并对试剂及仪器的性能进行评价,进行统计学分析。结果制备的干试剂结构疏松、溶解性好,90d内反应稳定。用630nm波长检测,其线性范围为3～8mmol/L,批内变异系数(CV)<4%,批间CV<5%,回收率为98.5%～106.9%。当血清内胆红素小于290.40μmol/L,三酰甘油小于11.20mmol/L时,无明显干扰。与全自动生化分析仪电极法结果的相关性良好(r=0.978)。结论微型光谱仪及干试剂法测定血清钾离子浓度结果准确可靠,操作简便,仪器携带方便,可适用于现场或床旁的快速检测。

铜绿假单胞菌临床分离株gyrA基因突变与喹诺酮类耐药关系研究

目的 了解铜绿假单胞菌临床分离株 gyrA基因突变与喹诺酮类药物耐药的关系 ,研究其临床意义。 方法 通过PCRHinfⅠ酶切分析、PCR 单链构象多态性分析 (SSCP)等方法检测铜绿假单胞菌ATCC 2 785 3及 36株铜绿假单胞菌临床分离株的 gyrA基因突变情况。 结果 HinfⅠ酶切结果显示 ,所有 13株环丙沙星耐药株 ,3株环丙沙星中介株中的 2株 ,2 0株环丙沙星敏感株中的 1株存在 gyrA基因HinfⅠ酶切位点突变 ;SSCP分析结果显示 ,所有耐药菌株和中介菌株的 gyrA基因带型与标准菌株均不同 ;2 0株敏感菌株中有 5株的带型与标准菌株不同。结论 铜绿假单胞菌喹诺酮类耐药与 gyrA基因HinfⅠ酶切位点突变密切相关 ,但 gyrA基因突变不局限于该位点 ,在常规药敏试验的基础上开展

276株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性分析

目的经分析本院分离的276株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性,为其感染治疗提供病原学调查及实验室依据。方法回顾性总结本院2005年6月1日至2008年6月30日分离培养的铜绿假单胞菌及药物敏感试验结果,以API20NE与细菌微量生化反应管进行菌种鉴定,K-B法进行药敏试验。结果从临床送检呼吸道分泌物、创面分泌物和血液等4620例标本中分离铜绿假单胞菌276株,其对头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、阿米卡星、头孢吡肟与亚胺培南的敏感率较高,其中亚胺培南敏感率达92.0%;对庆大霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢哌酮、左氧氟沙星等多种抗菌药物的敏感率较低,多重耐药菌株较常见。结论铜绿假单胞菌是临床较常见的病原菌,其多重耐药现象较严重,对碳青霉烯类药物(如亚胺培南)敏感性较高。

应用基因芯片检测系统诊断结核分枝杆菌感染及耐药基因突变的临床研究

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、穿刺脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,并进一步对结核分枝杆菌(MTB)阳性标本进行耐药性分析。同时采用抗酸染色检测标本,比较两种方法检出率。采用MTB感染T细胞IFN-γ释放试验(TB-IGRA)技术对部分患者进行结核感染检测。结果 4 402例患者标本中检出分枝杆菌148例,检出率为3.36%(148/4 402)。其中MTB复合群137例,非结核分枝杆菌(NTM)11例,NTM占分枝杆菌总检出例数的7.4%(11/148)。检出率较高的标本为穿刺脓液、肺泡灌洗液和组织。进一步对137例MTB阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼katG、inhA基因检测,共有22例检测到了突变的耐药基因;基因芯片法检测痰液、脑脊液和胸腹水分枝杆菌检出率明显高于抗酸染色法(P<0.05)。基因芯片检测结核感染的检出率明显低于TB-IGRA(P<0.05)。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,尤其适用于痰液、胸腹水和脑脊液。该方法简便快速,灵敏度较高,特异性好。

阿托伐他汀与瑞舒伐他汀治疗ACI的疗效比较研究

目的比较阿托伐他汀和瑞舒伐他汀对急性脑梗死(ACI)患者血脂、炎性因子、血流动力学及神经功能的影响。方法选择160例ACI患者,随机分入阿托伐他汀组和瑞舒伐他汀组,各80例。在常规治疗的基础上,分别于每晚睡前服用阿托伐他汀钙片(20 mg)或瑞舒伐他汀钙片(10 mg),连续给药6个月。比较两组治疗后在血脂、炎性因子、血流动力学及神经功能方面的差异。结果治疗6个月后,两组在总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高敏C反应蛋白水平,白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子-α水平及大脑中动脉的阻力指数、美国国立卫生院卒中量表评分等指标上均有显著下降(P<0.05),在大脑中动脉的收缩期峰值流速、舒张末期血流速度、血管搏动指数、Barthel指数评分等指标上则有显著升高(P<0.05),且治疗后瑞舒伐他汀组这些指标的改善幅度均大于阿托伐他汀组(P<0.05)。两组不良反应率无显著差异(P>0.05)。结论在安全性相近的情况下,瑞舒伐他汀治疗ACI的降脂、抗炎、改善脑血供及神经功能的效果优于阿托伐他汀。

窒息新生儿早期几项尿及血生化指标的观察

窒息可引起神经、呼吸、消化、血液等各系统的合并症,是早期新生儿死亡的主要原因之一.近年来又注意到缺氧可引起急性肾功能障碍,提示窒息对肾脏的损伤亦是不容忽视的问题。为此我院于1986年9月至12月,对妇产科相继出生的窒息新生儿进行了尿七项生化指标和血清尿素氮的测定。

hsCRP对冠心病患者行瑞舒伐他汀治疗预后的意义

目的观察经瑞舒伐他汀治疗后,高敏C反应蛋白(hs CRP)水平对冠心病(CHD)患者不良预后的评估作用。方法纳入医院确诊的冠心病患者245例,其中急性冠脉综合征(ACS)98例,稳定性心绞痛(SAP)147例。均在常规治疗基础上,给予瑞舒伐他汀10 mg/d治疗6 w后,然后根据hs CRP水平,将患者分成hs CRP正常组和异常组。随访至少12个月,比较两组主要不良心脑血管事件发生率。结果治疗前ACS患者血清hs CRP、LDL-C水平显著高于SAP患者(P<0.05)。经瑞舒伐他汀治疗6 w后,所有患者hs CRP和LDL-C水平均较治疗前均显著下降,其中hs CRP降至正常水平159例,水平异常86例,但hs CRP正常组与异常组LDL-C水平无显著差异(P>0.05)。随访12个月内,hs CRP异常组新发心肌梗死率、新发卒中率、需血运重建率及再次因不稳定型心绞痛和急性心衰事件而住院率均显著高于hs CRP正常组。结论瑞舒伐他汀可显著降低冠心病血清hs CRP,治疗后hs CRP水平能否达标,是预测不良预后的重要因素。