男性肺癌患者外周血性激素水平及其与肺癌组织中芳香化酶表达的相关性研究

背景与目的:雄激素转化为雌激素是由芳香化酶催化的,目前已知芳香化酶是该反应的最后一步限速酶。已有研究提示肺癌患者有性激素的失衡和紊乱,但其原因尚未清楚。因此,本文旨在探讨男性肺癌患者外周血性激素水平及其与肺癌组织中芳香化酶表达的相关性。方法:采用磁性微粒分离的免疫酶联分析测定方法检测25例男性肺癌患者和30例正常男性外周血血清中雌二醇(estradiol,E2)和睾酮(testosterone,T)水平,同时应用免疫组织化学方法检测25例肺癌组织及其癌旁组织和11例肺良性病变组织中芳香化酶蛋白的表达。结果:25例男性肺癌患者外周血血清中E2水平较正常男性明显增高(P<0.01),T明显降低(P<0.01);肺癌组织中芳香化酶的蛋白表达阳性率为52%,而癌旁组织及肺良性病变组织均为阴性;外周血血清中E2水平与肺癌组织中芳香化酶的蛋白表达水平呈正相关(r=0.9308,P<0.001)。结论:肺癌组织中表达的芳香化酶催化雄激素转化为雌激素并释放入血,可能是导致男性肺癌患者外周血中雌激素升高、雄激素降低的主要原因。

血管活性肽在人胚胎脐血管内皮细胞中的发育

为说明人脐血管内皮细胞（ＥＣ）在胚胎发育过程中就可能合成和分泌多种血管活性物质。用免疫组织化学技术对不同发育时期人胚胎脐血管内皮细胞生长抑素（ＳＳ）、内皮素（ＥＴ）、神经肽Ｙ（ＮＰＹ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）进行定性定位研究。结果显示：ＳＳ出现于胚胎第８周；５－ＨＴ出现于胚胎第１２周；ＮＰＹ出现于胚胎第１６周；ＥＴ出现于胚胎第２０周。提示人胚胎脐血管内皮细胞中各种血管活性肽出现的时间不一致，舒血管活性肽的出现早于缩血管活性肽，这适应于胚胎发育的需要和正常妊娠生理活动的维持，即妊娠早期舒血管活性肽使血管扩张有利于胚胎的发育，而后期缩血管活性肽的出现则有利于分娩和胎儿－胎盘血循环的关闭。

男性肺癌患者癌组织中雌激素受体的表达与外周血性激素水平的关系

目的 探讨男性肺癌患者癌组织中雌激素受体的表达与外周血性激素水平的关系。方法 采用磁性微粒分离的免疫酶联分析测定方法检测 2 5例男性肺癌患者和 30例正常男性外周血血清中雌二醇(estradiol,E2 )、睾酮 (testosterone ,T)、卵泡刺激素 (folliclestimulatinghormone ,FSH )和黄体生成素 (lutenisinghormone ,LH )水平 ,同时应用免疫组织化学S P法检测 2 5例肺癌组织、癌旁组织及 11例肺良性病变中雌激素受体的表达。结果 2 5例男性肺癌患者外周血血清中E2 水平较正常男性明显增高 (P <0 .0 1) ,T明显下降 (P <0 .0 1) ,E2 /T明显增高 (P <0 .0 1) ;2 5例肺癌组织中雌激素受体蛋白表达阳性率为 6 0 .0 % ( 15 / 2 5 ) ,阳性表达主要定位于细胞核内 ,而癌旁组织和肺良性病变组织中未见阳性表达 ;男性肺癌患者术前外周血雌激素水平与手术切除的肺癌组织雌激素受体表达水平呈显著正相关 (r =0 .916 7,P <0 .0 0 1)。结论 男性肺癌患者存在性激素水平的失衡和紊乱 ,且与雌激素受体表达密切相关 ;

人胚胎大脑皮层神经干细胞的分离培养

目的 为人神经干细胞的基础研究及临床应用提供细胞模型。 方法 采用无血清培养技术 ,分离培养了 10～ 14周人胚大脑皮层细胞 ,并用神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)免疫组化鉴定培养细胞 ;5 %胎牛血清诱导其分化 ,神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化鉴定分化细胞。 结果 获得了大量未分化、呈簇状悬浮生长的神经干细胞团 ,且能被诱导分化成神经元和神经胶质细胞。经传 12代后仍具干细胞特性。 结论 本实验成功地分离培养了人胚胎大脑皮层神经干细胞 ,为神经干细胞的基础研究和临床应用奠定了基础。

人胚胎中枢神经系统NOV mRNA神经元的发育——原位杂交研究

目的研究人胚胎中枢神经系统ＮＯＶｍＲＮＡ神经元的发育。方法地高辛标记的ｃＲＮＡ探针原位杂交技术。结果（１）脊髓：第１６周人胚胎脊髓腹侧出现ＮＯＶｍＲＮＡ神经元，为大型神经元，至第２８周扩展到后角中间神经元，第３８周中央灰质中阳性神经元明显。（２）延髓：第１６周延髓观察到下橄榄核、舌下神经核、迷走神经背核均有阳性神经元分布，至第２８周，三叉神经脊束核和楔束副核检测到阳性神经元；（３）脑桥、中脑和间脑：第３２周脑桥展神经核、中脑红核和黑质、丘脑腹外侧核和背内侧核均有阳性神经元分布。（４）大脑：第３２周纹状体有较多标记神经元，第３８周大脑皮质顶叶阳性神经元明显。以上结果表明ＮＯＶｍＲＮＡ神经元在人胚胎中枢神经系统中，首先在低级中枢出现，在高级中枢中逐渐发育；各胎龄标本中所观察到的阳性神经元多位于支配躯体运动的神经核团；随着胚胎中枢神经系统的发育，ＮＯＶｍＲＮＡ神经元逐渐增多，这与其他原癌基因在胚胎发育的早期表达高，而后降低不同。结论在人胚胎发育过程中ＮＯＶ基因对神经系统的分化和进一步的功能活动可能起重要调节作用，且这种作用逐渐增强。

脑缺血时脑组织内啡肽和单胺类介质动态变化的实验研究

建立了大白鼠全脑缺血动物模型，用ＲＩＡ法及荧光分光光度计检测了缺血脑组织匀浆的ＬＥＫ、β─ＥＰ、ＤｙｎＡ１─１３及５─ＨＴ和５─ＨＩ─ＡＡ的含量。ＬＥＫ在脑组织缺血６０ｍｉｎ内含量略下降，但无统计学意义；β─ＥＰ在脑组织缺血３０ｍｉｎ时显著下降（Ｐ＜０．０５），缺血６０ｍｉｎ时明显上升，而５─ＨＴ含量则显著下降。上述结果提示内啡肽和单胺类介质均参与了缺血性脑损伤的病理过程。

八肽胆囊收缩素在猪、大鼠和豚鼠肠道的免疫组织化学定位和分布

实验采用ＡＢＣ免疫组织化学方法研究了八肽胆囊收缩素样免疫反应（ＣＣＫ－８－ＩＲ）物质在猪、大鼠和豚鼠肠道的定位与分布，并用相邻切片免疫双标记法观察了它与５－羟色胺（５－ＨＴ）的关系。结果表明，ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞主要位于肠腺的底部，少数位于绒毛上皮。节段性分布上，在猪可见于从十二指肠到结肠全长的粘膜，大鼠和豚鼠ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞则见于从十二指肠至回肠的粘膜，但均以十二指肠密度最高；免疫双标记法证实，在三种动物肠道中均有ＣＣＫ－８与５－ＨＴ共存的现象。

人胚胎肠道肽能神经发育的定量研究

采用免疫细胞化学 PAP 技术,对不同胚胎龄(8～40周)的53例人胚胎小肠的亮氨酸—脑啡肽(L-ENK)、降钙素基因相关系肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)、P 物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)等五种肽能神经的发生发育过程进行了观察,并应用形态计量方法和显微分光光度计对阳性神经元及神经纤维进行了定量测定,发现肽能神经元属“小神经元”,肽能神经发育的峰值在胚胎期四～六月。

芳香化酶mRNA在肺癌组织中表达的初步研究

目的 探讨芳香化酶P45 0mRNA在肺癌组织中的表达及其定位分布情况。方法 以芳香化酶cRNA作探针 ,采用原位杂交检测 2 3例肺癌及其相对应的癌旁组织和 7例肺良性疾病及其相应正常肺组织中芳香化酶mRNA的表达。结果 11例肺鳞癌、6例腺癌和 2例腺鳞癌芳香化酶mRNA表达均为阳性 ,而 3例小细胞肺癌和 1例肺泡细胞癌均为弱阳性。阳性信号主要位于癌细胞的胞浆和胞核内 ,肿瘤的间质细胞和血管内皮细胞也有少量表达。而癌旁组织、肺良性疾病及其相应的正常肺组织中芳香化酶mRNA表达均为阴性。结论 芳香化酶mRNA在肺癌组织中的表达较广泛 ,它可能在肺癌的发生发展中起着重要的作用。

维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞系定向分化神经细胞的最佳条件(英文)

背景:神经轴突再生是治疗中枢神经系统损伤必须克服的困难之一,包括移植神经干细胞、胚胎干细胞和许旺细胞等在内的细胞移植疗法已取得显著疗效,然而供体细胞不足的瓶颈限制了其发展。目的:观察维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化过程,找到其最佳分化为神经细胞的条件。设计:非随机对照实验。单位:解放军第三军医大学组织胚胎学教研室。材料:实验于2000-01/05在解放军第三军医大学基础部组织胚胎学教研室完成。发情期昆明种小鼠18只,雌12只,雄6只,2∶1同笼交配,阴栓检出日记为受孕1d。MESPU35胚胎干细胞株。方法:孕13～16d的小鼠胚胎,去头,胸腹腔脏器及四肢后,制备饲养层细胞。①采用饲养层贴壁培养增殖MESPU35胚胎干细胞,经典4-/4+法(即拟胚体自然生长4d,不加维甲酸,随后4d添加维甲酸诱导形成高比例神经拟胚体的方法)诱导其神经定向分化,不同浓度血清培养拟胚体,相差显微镜观察不同血清浓度下神经样拟胚体并计数。②免疫细胞化学技术观察各个分化时相点(5,9,14d)和不同维甲酸浓度下分化细胞形态学特征,流式细胞仪计数分化神经细胞比例。主要观察指标:①维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化后神经拟胚体形成中突起和细胞体长度估计测量。②免疫细胞化学染色分化细胞形态观察及流式细胞仪测量分化细胞比例。结果:①相差显微镜观察发现不同血清浓度对拟胚体形成后神经定向分化有一定影响,血清浓度过高和过低降低了拟胚体神经分化比例,5%血清浓度分化比例高。②免疫细胞化学观察维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化形成的NF200阳性细胞和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的比例随分化时相点和维甲酸浓度升高而升高,NF200阳性细胞形态由无突起变为多极细胞,胶质纤维酸性蛋白阳性细胞突起由短变长,最后联结成网状。③流式细胞仪检测分化产生的胶质纤维酸性蛋白、NF200阳性细胞比例变化类似免疫细胞化学。结论:维甲酸配合合适的血清浓度、分化时相点等条件能够诱导MESPU35胚胎干细胞高比例神经分化,其分化调节以浓度依赖模式和时间依赖模式进行。

胚胎干细胞与羊水干细胞

目前干细胞的再生潜能得到生物医学领域诸多学者的关注,胚胎干细胞再生潜能高但获取有悖于伦理,科学家转而研究其他成体干细胞,以利用其再生特性进行器官修复等。该文就羊水干细胞与胚胎干细胞的特性、比较及应用予以介绍。

豚鼠、家鸽和蟾蜍肝细胞内酸性磷酸酶定量组织化学分析

本文采用Leitz MPV-3型显微分光光度计和Leitz TAS图像分析仪,对豚鼠、家鸽和蟾蜍肝小叶中央区和门管旁区肝细胞酸性磷酸酶的含量,进行了定量组织化学测定。结果表明,肝细胞酸性磷酸酶的含量以豚鼠最高,蟾蜍次之,家鸽最低。肝细胞酸性磷酸酶的平均分布密度,按豚鼠、家鸽和蟾蜍依次减小。本文对肝细胞酸性磷酸酶平均分布密度随着动物进化而增大的意义进行了讨论。

豚鼠、家鸽及蟾蜍肝细胞内溶酶体酸性磷酸酶和芳香基硫酯酶电镜组织化学观察

本文对豚鼠、家鸽和蟾蜍这三种脊椎动物肝细胞中溶酶体系统进行了酸性磷酸酶(AcP)和芬香基硫酸酯酶(ArSase)活性的电镜酶细胞化学观察.结果表明ArSase在三种脊椎动物肝细胞中的分布与AcP稍有差异,显示ArSase阳性反应的结构较少于AcP.ArSase在三种动物肝细胞的致密体中有四种分布形式,并且三种动物肝细胞中ArSase的定位表现出不同特点.本文对上述现象进行了讨论.

在组织胚胎学教学中融入心理素质教育

在组织胚胎学教学过程中融人心理素质教育是非常重要和必要的。教师应先接受专业的心理知识培训，加强自身修养；在充分分析和掌握“90后”医学生学习和心理特点的基础上，作到因材施教；在组织胚胎学实践教学中增加课堂讨论，在胚胎实践教学以及在第二课堂活动中注重心理素质教育实践，达到提高学生心理素质的目的。

成年大鼠纹状体区神经干细胞的分离培养

目的 从成年大鼠纹状体区分离并鉴定神经干细胞。 方法 利用无血清培养和单细胞克隆技术在成年大鼠纹状体区分离具有单细胞克隆能力的细胞群 ,选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆 ,采用免疫荧光细胞化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达。 结果 从纹状体区分离的细胞群具有连续克隆能力 ,表达神经上皮干细胞蛋白 ,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。 结论 分离的细胞具有自我更新能力和多分化潜能 ,表达神经上皮干细胞蛋白 ,有很强的增殖能力。是中枢神经系统的干细胞。

大鼠脑缺血过程中神经细胞死亡的研究

通过凝胶电泳及细胞死亡原位末端标记（ｉｎｓｉｔｕｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＩＳＥＬ）研究了大鼠全脑缺血时细胞凋亡。结果是在轻度缺血时细胞于２４ｈ出现凋亡，重度缺血时１２ｈ出现，高峰时间均在４８～７２ｈ，凝胶电泳变化较ＩＳＥＬ异常出现晚，分别在２４ｈ及４８ｈ。重度缺血急性期以坏死为主，迟发性损害期则以细胞凋亡为主，轻度缺血在坏死表现不显著时，仍可见明显的凋亡细胞。结果表明：细胞凋亡参与脑缺血急性期及迟发性神经元损害，轻度缺血神经细胞损害以细胞凋亡为主。

银杏内酯B对神经干细胞分化的影响及其机制研究

目的观察银杏内酯B对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法用含不同浓度银杏内酯B(20mg/L、40mg/L、60mg/L)的分化培养基培养NSCs3d和7d,测量细胞突起长度和胞体面积,用免疫荧光检测神经丝蛋白-200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞特异性蛋白(CC-1)、细胞因子信号抑制因子2(SOCS2)、DNA结合抑制因子2(Id2)的表达。结果银杏内酯B组细胞突起增长,胞体增大;NF阳性神经元样细胞百分率增加,GFAP阳性星形胶质样细胞百分率随银杏内酯B浓度增加而增加;SOCS2阳性细胞百分率(35.46%)较对照组(22.17%)明显增加(P<0.01),银杏内酯B组Id2阳性细胞百分率(51.52%)较对照组(66.24%)明显减少(P<0.01)。结论银杏内酯B可促进分化细胞成熟,促进NSCs向神经元分化;星形胶质细胞百分率的增高与银杏内酯B呈剂量依赖关系。

神经特异性转录因子DAT1 mRNA在大鼠中枢神经系统的定位

目的 观察神经特异性转录因子 (DAT1)在大鼠中枢神经系统中的定位。 方法 原位杂交组织化学染色。 结果 在大鼠中枢神经系统中 ,DAT1mRNA阳性反应产物主要位于胞质和突起内 ,DAT1mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓。强阳性信号主要出现于嗅球、梨状皮质、纹状皮质、内嗅皮质、海马CA1区、齿状回、丘脑后外侧核、红核、被盖背侧核、延髓中央网状核、三叉神经运动核、舌下神经核、迷走神经核、楔束外核、疑核等部位 ;中等强度着色主要分布于大脑皮质Ⅱ～Ⅵ层、海马CA2区和CA3区、杏仁核、苍白球、内侧膝状体、外侧膝状体、视上核、未定带、弓状核、室旁核、黑质、中脑网状核、脑桥网状核、巨细胞网状核、外侧网状核、斜方体内侧核、前庭神经核、蜗神经背核、楔束核、中缝背核 ;在隔核、乳头体前核、上丘浅灰质层、下丘中央核、下丘外侧核、中央灰质、三叉神经中脑核、三叉脊束核、孤束核、下橄榄核、中央上核、小脑顶核、小脑间置核、小脑外侧核、脊髓灰质及丘脑的大部分核团可见弱的阳性细胞。 结论 DAT1广泛分布于大鼠中枢神经系统内 ,其分布与多巴胺能神经分布密切相关 ,提示该基因对大鼠中枢神经系统活动 ,尤其是多巴胺能神经递质活动具有重要的调节功能。