男性肺癌患者外周血性激素水平及其与肺癌组织中芳香化酶表达的相关性研究

背景与目的:雄激素转化为雌激素是由芳香化酶催化的,目前已知芳香化酶是该反应的最后一步限速酶。已有研究提示肺癌患者有性激素的失衡和紊乱,但其原因尚未清楚。因此,本文旨在探讨男性肺癌患者外周血性激素水平及其与肺癌组织中芳香化酶表达的相关性。方法:采用磁性微粒分离的免疫酶联分析测定方法检测25例男性肺癌患者和30例正常男性外周血血清中雌二醇(estradiol,E2)和睾酮(testosterone,T)水平,同时应用免疫组织化学方法检测25例肺癌组织及其癌旁组织和11例肺良性病变组织中芳香化酶蛋白的表达。结果:25例男性肺癌患者外周血血清中E2水平较正常男性明显增高(P<0.01),T明显降低(P<0.01);肺癌组织中芳香化酶的蛋白表达阳性率为52%,而癌旁组织及肺良性病变组织均为阴性;外周血血清中E2水平与肺癌组织中芳香化酶的蛋白表达水平呈正相关(r=0.9308,P<0.001)。结论:肺癌组织中表达的芳香化酶催化雄激素转化为雌激素并释放入血,可能是导致男性肺癌患者外周血中雌激素升高、雄激素降低的主要原因。

男性肺癌患者癌组织中雌激素受体的表达与外周血性激素水平的关系

目的 探讨男性肺癌患者癌组织中雌激素受体的表达与外周血性激素水平的关系。方法 采用磁性微粒分离的免疫酶联分析测定方法检测 2 5例男性肺癌患者和 30例正常男性外周血血清中雌二醇(estradiol,E2 )、睾酮 (testosterone ,T)、卵泡刺激素 (folliclestimulatinghormone ,FSH )和黄体生成素 (lutenisinghormone ,LH )水平 ,同时应用免疫组织化学S P法检测 2 5例肺癌组织、癌旁组织及 11例肺良性病变中雌激素受体的表达。结果 2 5例男性肺癌患者外周血血清中E2 水平较正常男性明显增高 (P <0 .0 1) ,T明显下降 (P <0 .0 1) ,E2 /T明显增高 (P <0 .0 1) ;2 5例肺癌组织中雌激素受体蛋白表达阳性率为 6 0 .0 % ( 15 / 2 5 ) ,阳性表达主要定位于细胞核内 ,而癌旁组织和肺良性病变组织中未见阳性表达 ;男性肺癌患者术前外周血雌激素水平与手术切除的肺癌组织雌激素受体表达水平呈显著正相关 (r =0 .916 7,P <0 .0 0 1)。结论 男性肺癌患者存在性激素水平的失衡和紊乱 ,且与雌激素受体表达密切相关 ;

应用小鼠体外全胚胎培养方法研究多氯联苯同系物PCB_(153)对胚胎发育的影响

目的 探讨多氯联苯同系物PCB1 53 对胚胎生长发育的影响及其作用机制。方法 于体外将孕 8.5d小鼠胚胎置入不同浓度PCB1 53 ,应用植入后全胚胎培养技术研究PCB1 53 对胚胎生长发育的影响 ;透射电镜观察PCB1 53 对卵黄囊的损害。结果 PCB1 53 对胚胎发育具有明显影响且呈剂量 效应关系。 0 .1 0ng/ml组除卵黄囊循环稍差外 ,其余指标与对照组一致或差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;1 .0 0ng/ml组明显影响卵黄囊循环、头长、颅臀长、体节数、中脑、后脑、翻转、鳃弓和上下颌突等指标 ,与对照组比较P <0 .0 5 ;1 0 .0 0ng/ml组 ,各指标进一步降低 (P <0 .0 1 ) ,胚胎致畸率升高并出现死亡 ;电镜发现 ,PCB1 53 处理的各实验组卵黄囊超微结构遭到不同程度破坏。结论 PCB1 53 使胚胎发育迟缓、具有发育毒性和致畸性 ,作用的敏感部位主要是卵黄囊、头长、颅臀长、中脑和鳃弓 ;卵黄囊的超微结构损害与PCB1 53 致胚胎发育异常有关。

八肽胆囊收缩素在猪、大鼠和豚鼠肠道的免疫组织化学定位和分布

实验采用ＡＢＣ免疫组织化学方法研究了八肽胆囊收缩素样免疫反应（ＣＣＫ－８－ＩＲ）物质在猪、大鼠和豚鼠肠道的定位与分布，并用相邻切片免疫双标记法观察了它与５－羟色胺（５－ＨＴ）的关系。结果表明，ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞主要位于肠腺的底部，少数位于绒毛上皮。节段性分布上，在猪可见于从十二指肠到结肠全长的粘膜，大鼠和豚鼠ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞则见于从十二指肠至回肠的粘膜，但均以十二指肠密度最高；免疫双标记法证实，在三种动物肠道中均有ＣＣＫ－８与５－ＨＴ共存的现象。

脑缺血时脑组织内啡肽和单胺类介质动态变化的实验研究

建立了大白鼠全脑缺血动物模型，用ＲＩＡ法及荧光分光光度计检测了缺血脑组织匀浆的ＬＥＫ、β─ＥＰ、ＤｙｎＡ１─１３及５─ＨＴ和５─ＨＩ─ＡＡ的含量。ＬＥＫ在脑组织缺血６０ｍｉｎ内含量略下降，但无统计学意义；β─ＥＰ在脑组织缺血３０ｍｉｎ时显著下降（Ｐ＜０．０５），缺血６０ｍｉｎ时明显上升，而５─ＨＴ含量则显著下降。上述结果提示内啡肽和单胺类介质均参与了缺血性脑损伤的病理过程。

人胚胎肠道肽能神经发育的定量研究

采用免疫细胞化学 PAP 技术,对不同胚胎龄(8～40周)的53例人胚胎小肠的亮氨酸—脑啡肽(L-ENK)、降钙素基因相关系肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)、P 物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)等五种肽能神经的发生发育过程进行了观察,并应用形态计量方法和显微分光光度计对阳性神经元及神经纤维进行了定量测定,发现肽能神经元属“小神经元”,肽能神经发育的峰值在胚胎期四～六月。

芳香化酶mRNA在肺癌组织中表达的初步研究

目的 探讨芳香化酶P45 0mRNA在肺癌组织中的表达及其定位分布情况。方法 以芳香化酶cRNA作探针 ,采用原位杂交检测 2 3例肺癌及其相对应的癌旁组织和 7例肺良性疾病及其相应正常肺组织中芳香化酶mRNA的表达。结果 11例肺鳞癌、6例腺癌和 2例腺鳞癌芳香化酶mRNA表达均为阳性 ,而 3例小细胞肺癌和 1例肺泡细胞癌均为弱阳性。阳性信号主要位于癌细胞的胞浆和胞核内 ,肿瘤的间质细胞和血管内皮细胞也有少量表达。而癌旁组织、肺良性疾病及其相应的正常肺组织中芳香化酶mRNA表达均为阴性。结论 芳香化酶mRNA在肺癌组织中的表达较广泛 ,它可能在肺癌的发生发展中起着重要的作用。

维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞系定向分化神经细胞的最佳条件(英文)

背景:神经轴突再生是治疗中枢神经系统损伤必须克服的困难之一,包括移植神经干细胞、胚胎干细胞和许旺细胞等在内的细胞移植疗法已取得显著疗效,然而供体细胞不足的瓶颈限制了其发展。目的:观察维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化过程,找到其最佳分化为神经细胞的条件。设计:非随机对照实验。单位:解放军第三军医大学组织胚胎学教研室。材料:实验于2000-01/05在解放军第三军医大学基础部组织胚胎学教研室完成。发情期昆明种小鼠18只,雌12只,雄6只,2∶1同笼交配,阴栓检出日记为受孕1d。MESPU35胚胎干细胞株。方法:孕13～16d的小鼠胚胎,去头,胸腹腔脏器及四肢后,制备饲养层细胞。①采用饲养层贴壁培养增殖MESPU35胚胎干细胞,经典4-/4+法(即拟胚体自然生长4d,不加维甲酸,随后4d添加维甲酸诱导形成高比例神经拟胚体的方法)诱导其神经定向分化,不同浓度血清培养拟胚体,相差显微镜观察不同血清浓度下神经样拟胚体并计数。②免疫细胞化学技术观察各个分化时相点(5,9,14d)和不同维甲酸浓度下分化细胞形态学特征,流式细胞仪计数分化神经细胞比例。主要观察指标:①维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化后神经拟胚体形成中突起和细胞体长度估计测量。②免疫细胞化学染色分化细胞形态观察及流式细胞仪测量分化细胞比例。结果:①相差显微镜观察发现不同血清浓度对拟胚体形成后神经定向分化有一定影响,血清浓度过高和过低降低了拟胚体神经分化比例,5%血清浓度分化比例高。②免疫细胞化学观察维甲酸诱导MESPU35胚胎干细胞分化形成的NF200阳性细胞和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的比例随分化时相点和维甲酸浓度升高而升高,NF200阳性细胞形态由无突起变为多极细胞,胶质纤维酸性蛋白阳性细胞突起由短变长,最后联结成网状。③流式细胞仪检测分化产生的胶质纤维酸性蛋白、NF200阳性细胞比例变化类似免疫细胞化学。结论:维甲酸配合合适的血清浓度、分化时相点等条件能够诱导MESPU35胚胎干细胞高比例神经分化,其分化调节以浓度依赖模式和时间依赖模式进行。

胚胎干细胞与羊水干细胞

目前干细胞的再生潜能得到生物医学领域诸多学者的关注,胚胎干细胞再生潜能高但获取有悖于伦理,科学家转而研究其他成体干细胞,以利用其再生特性进行器官修复等。该文就羊水干细胞与胚胎干细胞的特性、比较及应用予以介绍。

豚鼠、家鸽及蟾蜍肝细胞内溶酶体酸性磷酸酶和芳香基硫酯酶电镜组织化学观察

本文对豚鼠、家鸽和蟾蜍这三种脊椎动物肝细胞中溶酶体系统进行了酸性磷酸酶(AcP)和芬香基硫酸酯酶(ArSase)活性的电镜酶细胞化学观察.结果表明ArSase在三种脊椎动物肝细胞中的分布与AcP稍有差异,显示ArSase阳性反应的结构较少于AcP.ArSase在三种动物肝细胞的致密体中有四种分布形式,并且三种动物肝细胞中ArSase的定位表现出不同特点.本文对上述现象进行了讨论.

银杏内酯B对神经干细胞分化的影响及其机制研究

目的观察银杏内酯B对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法用含不同浓度银杏内酯B(20mg/L、40mg/L、60mg/L)的分化培养基培养NSCs3d和7d,测量细胞突起长度和胞体面积,用免疫荧光检测神经丝蛋白-200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞特异性蛋白(CC-1)、细胞因子信号抑制因子2(SOCS2)、DNA结合抑制因子2(Id2)的表达。结果银杏内酯B组细胞突起增长,胞体增大;NF阳性神经元样细胞百分率增加,GFAP阳性星形胶质样细胞百分率随银杏内酯B浓度增加而增加;SOCS2阳性细胞百分率(35.46%)较对照组(22.17%)明显增加(P<0.01),银杏内酯B组Id2阳性细胞百分率(51.52%)较对照组(66.24%)明显减少(P<0.01)。结论银杏内酯B可促进分化细胞成熟,促进NSCs向神经元分化;星形胶质细胞百分率的增高与银杏内酯B呈剂量依赖关系。

神经特异性转录因子DAT1 mRNA在大鼠中枢神经系统的定位

目的 观察神经特异性转录因子 (DAT1)在大鼠中枢神经系统中的定位。 方法 原位杂交组织化学染色。 结果 在大鼠中枢神经系统中 ,DAT1mRNA阳性反应产物主要位于胞质和突起内 ,DAT1mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓。强阳性信号主要出现于嗅球、梨状皮质、纹状皮质、内嗅皮质、海马CA1区、齿状回、丘脑后外侧核、红核、被盖背侧核、延髓中央网状核、三叉神经运动核、舌下神经核、迷走神经核、楔束外核、疑核等部位 ;中等强度着色主要分布于大脑皮质Ⅱ～Ⅵ层、海马CA2区和CA3区、杏仁核、苍白球、内侧膝状体、外侧膝状体、视上核、未定带、弓状核、室旁核、黑质、中脑网状核、脑桥网状核、巨细胞网状核、外侧网状核、斜方体内侧核、前庭神经核、蜗神经背核、楔束核、中缝背核 ;在隔核、乳头体前核、上丘浅灰质层、下丘中央核、下丘外侧核、中央灰质、三叉神经中脑核、三叉脊束核、孤束核、下橄榄核、中央上核、小脑顶核、小脑间置核、小脑外侧核、脊髓灰质及丘脑的大部分核团可见弱的阳性细胞。 结论 DAT1广泛分布于大鼠中枢神经系统内 ,其分布与多巴胺能神经分布密切相关 ,提示该基因对大鼠中枢神经系统活动 ,尤其是多巴胺能神经递质活动具有重要的调节功能。

肌萎灵注射液对人骨髓基质细胞增殖和向神经细胞分化的影响

目的:观察肌萎灵注射液对人骨髓基质细胞增殖及向神经细胞分化的影响,为中医药与干细胞移植联合治疗运动神经元病提供实验依据。方法:应用密度梯度离心方法,体外分离培养人骨髓基质细胞,实验组施加不同浓度的肌萎灵注射液(0.1%、0.2%、0.5%、1%、2%JWL),对照组加等量培养基。应用液体闪烁法检测细胞增殖,免疫组织化学方法和流式细胞仪检测骨髓基质细胞分化后神经元特异中间丝蛋白(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况。结果:肌萎灵注射液各浓度组人骨髓基质细胞生长较好,细胞增殖迅速,3H-TdR掺入法CPM显著提高,与对照组均有显著性差异(P<0.01)。人骨髓基质细胞在加入含血清培养基的情况下,对照组自然分化成神经元和胶质细胞数目很少,分别仅占5.85%±1.03%和8.90%±1.44%。肌萎灵注射液各剂量组NF-200和GFAP阳性细胞数均明显增多,与对照组有显著性差异(P<0.01)。结论:肌萎灵注射液明显促进人骨髓基质细胞的增殖和向神经细胞的分化。

转化生长因子β抑制胶原酶表达及其在增生性瘢痕形成中的作用

目的:观察转化生长因子(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)、透明质酸和4-硫酸软骨质(chondroitin-4-sulfate,Ch-4-S)对增生性瘢痕(hypertrophicscar,HTS)成纤维细胞胶原酶和金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitorofmetalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨它们在HTS形成中的作用。方法:应用组织块培养法培养成纤维细胞,用原位杂交检测胶原酶和TIMP-1的表达。结果:TGF-β抑制胶原酶表达,其阳性细胞百分率为36%,明显低于对照组(t=4.52,P<0.05)。TGF-β促进TIMP-1的表达,其阳性细胞百分率为69.25%,明显高于对照组(t=3.62,P<0.05)。透明质酸上调胶原酶的表达,阳性细胞百分率为72.75%,显著高于对照(t=5.86,P<0.01)。结论:TGF-β抑制胶原酶表达,阻止胶原降解可能是增生性瘢痕形成的重要原因。透明质酸促进胶原酶表达,减轻瘢痕形成。

男性肺癌患者外周血性激素水平的测定及其临床意义

目的 检测男性肺癌患者外周血性激素水平并探讨其对肺癌诊断、治疗的价值。方法 采用磁性微粒分离的免疫酶联分析测定方法测定 70例男性肺癌患者、30例男性慢性阻塞性肺病 (chronicobstructivepulmonarydisease ,COPD)患者和 30例健康男性血清中雌二醇 (estradiol,E2 )、孕酮 (progesterone ,P)、睾酮 (testos terone ,T)、卵泡刺激素 (folliclestimulatinghormone ,FSH)和黄体生成素 (lutenisinghormone ,LH)水平 ,并探讨男性肺癌组患者肿瘤的大小、病理类型、分期与性激素水平的关系。结果 与正常组相比 ,男性肺癌组T水平降低(P <0 .0 5 ) ,E2 水平和E2 /T明显升高 (P <0 .0 0 1) ;与COPD组相比 ,男性肺癌组患者E2 水平、E2 /T明显降低(P <0 .0 0 1) ,而睾酮水平无明显差异 (P >0 .0 5 )。E2 水平、E2 /T比值与肿瘤大小和分期有密切关系 (P <0 .0 1)。与鳞癌组相比 ,腺癌组T水平降低 (P <0 .0 5 ) ,其它性激素水平与肿瘤的类型无明显关系 (P >0 .0 5 )。结论 检测男性肺癌者血清E2 、T水平和E2 /T对男性肺癌的诊断和判断患者病期具有一定的辅助价值。

大鼠学习记忆能力与nov基因表达的关系

采用主动回避法进行大鼠学习记忆训练 ,选出学习成绩好和差的大鼠 ,用原位杂交、免疫细胞化学结合图像分析方法观察nov基因表达的差异。结果显示 ,novmRNA和NOV蛋白阳性神经元主要分布于海马、扣带皮质和联合皮质锥体层、基底神经节和下丘脑等脑区。好成绩组NOV蛋白免疫反应最强 ,阳性细胞最多 ,差成绩组nov基因的表达比假性条件反射组的表达稍强。novmRNA的表达在各组之间无明显的差异。以上结果提示 ,nov基因可能参与学习记忆的调控过程 ,这种调控发生在NOV蛋白翻译水平。

黄芪皂甙诱导小鼠神经干细胞向神经元分化

目的:观察黄芪皂甙对体外培养的小鼠神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响.方法:采用机械分离、无血清传代培养法从胚胎(E14.5)小鼠室管膜前下区获得NSCs,观察不同浓度(20,40,60mg/L)黄芪皂甙在干预后不同时段(3,7d)的分化情况,通过免疫荧光检测神经元(β-Tubulin),星形胶质细胞(GFAP)及少突胶质细胞(CC-1)的比例,并采用银杏内酯B(40mg/L)作为阳性对照,正常组为阴性对照,观察黄芪皂甙对小鼠NSCs分化的影响.结果:加入黄芪皂甙培养3,7d后,黄芪皂甙40mg/L及60mg/L组、银杏内酯B组分化为β-Tubulin(+)神经元比例均显著高于正常对照组,黄芪皂甙两种浓度组间无统计学差异;银杏内酯B组分化为GFAP(+)星形胶质细胞比例显著高于正常对照组,而黄芪皂甙对星形胶质细胞的分化比例无明显影响.结论:黄芪皂甙能促进NSCs定向分化为神经元,而银杏内酯B促进NSCs向神经元和星形胶质细胞分化.

nov基因的表达与脑的种系发育分化平行相关

用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达基因阳性神经元的比较发育。结果显示 ,低等脊椎动物鲢脑仅有少量novmRNA阳性神经元 ,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑阳性神经元除广泛分布于脑干外 ,小脑、丘脑的多数核团、下丘脑的背侧核、腹侧核和后核以及大脑纹状体等多数脑区也有一定分布。哺乳动物牛、犬和猫脑中novmRNA阳性神经元广泛分布 ,在脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。以上结果表明 ,在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中nov基因的表达也从低级中枢向高级中枢扩展 ,提示该基因的表达与脑的种系发育、脑功能的分化平行相关。