miR-199a-5p在血管紧张素Ⅱ致心肌肥大细胞中的表达变化

目的研究miR．199a-Sp在血管紧张素Ⅱ（AngII）导致肥大心肌细胞中的表达变化。方法雄性sD大鼠30只，采用完全随机方法将其分为假手术组、模型组、氯沙坦组[10mg／（kg·d）]，每组10只。制备腹主动脉缩窄致心肌肥大模型，在术后第28天，检测心脏质量指数和左心室质量指数，HE染色观察左心室心肌细胞肥大情况，qRT—PCR方法测定左心室miR-199a-Sp表达。取10只1-3dSD乳鼠，消化获得心肌细胞，分为对照组、模型组（1×10^-7mol／LAngII）和氯沙坦组（1×10^-7mol／LAngⅡ＋1×10“mol／L氯沙坦钾），qRT．PCR方法测定心肌细胞miR-199a-Sp表达；分别转染miR-199a-Sp模拟物或者抑制物，观察[^3H]-亮氨酸的掺人情况。结果腹主动脉缩窄大鼠左心室心肌细胞明显肥大，左心室miR-199a-5p表达显著升高（P〈0．05），AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦可显著逆转上述变化。体外实验发现氯沙坦可显著降低AngII刺激致乳鼠心肌细胞所致的miR-199a-5p显著升高（P〈0．05），采用转染miR-199a-Sp抑制物的方法抑制miR-199a-Sp表达可显著抑制AngII刺激所致的心肌细胞[^3H]-亮氨酸掺入（P〈0．01）；且转染miR-199a-Sp模拟物增加miR-199a-Sp表达可显著增加[^3H]．亮氨酸掺入（P〈0．01）。结论miR-199a-Sp是介导AngⅡ致心肌细胞肥大的重要调节分子，可能在该信号通路中发挥重要作用。

孕期炎症刺激对子代大鼠血脂水平的影响

目的研究孕期炎症刺激对子代大鼠血脂水平的影响。方法 8只SD孕鼠随机分为对照组和脂多糖刺激组,分别在孕第8、10、12天腹腔注射生理盐水或脂多糖(0.79 mg/kg)。子代出生1天及每周测体重;检测8周龄雄性仔鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;组织切片观察子代肝脏病理形态学变化;透射电镜观察肝、胸主动脉超微结构;免疫荧光检测仔鼠肝脏8-OHd G表达情况;TMRE染色检测线粒体膜电位。结果与对照组子代相比,脂多糖刺激组子代1天、1周龄体重下降(P<0.01),而后体重显著增加(P<0.01)。脂多糖刺激组子代8周龄外周血TG、TC、LDL及AST水平与对照组子代相比显著升高(P<0.05或P<0.01);肝脏病理改变明显,线粒体结构显著损伤,8-OHd G表达增多,肝脏线粒体膜电位较对照组子代明显降低(P<0.01);胸主动脉表现出内皮脱落、平滑肌细胞迁移为特征的损伤。结论孕期炎症刺激导致子代线粒体损伤,可能与脂质代谢障碍并最终导致动脉粥样硬化发生相关。

孕期炎症刺激对子代大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨孕期炎症刺激对子代大鼠心肌纤维化的影响。方法 8只SD孕鼠采用随机数字表法完全随机分为:对照组(Con)和脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激组,每组4只。分别在孕第8、10、12天腹腔注射0.5 m L生理盐水或LPS(0.79 mg/kg)。仔鼠6、8、10、12、16周龄测尾动脉血压;组织切片Masson染色观察心肌组织纤维化;透射电镜观察心肌显微结构;实时荧光定量PCR检测心肌组织缝隙连接蛋白(Connexin,Cx)43、微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1light chain 3B,LC3B)、DNA甲基转移酶-1(DNA methyltransferase 1,DNMT-1)mRNA表达水平;Western blot检测Cx43、LC3B、DNMT-1蛋白表达。结果与Con组子代相比,LPS组子代大鼠6、8、10、12、16周龄时血压均明显升高(P<0.01);心肌组织胶原沉积增多,细胞间缝隙连接减少,自噬小体数量增加;Cx43和DNMT-1 mRNA表达水平显著增加(P<0.05),而LC3B的mRNA表达水平显著下降(P<0.05);Cx43蛋白表达水平较Con组子代明显降低(P<0.05),LC3BⅡ/LC3BⅠ和DNMT-1的蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)。结论孕期炎症刺激可导致子代大鼠心肌纤维化。这可能与孕期炎症刺激子代大鼠心肌组织自噬活化及Cx43蛋白表达降低相关。