青蒿琥酯对小鼠巨噬细胞RAW264.7中TLR4介导的炎症通路的抑制作用

目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠RAW264.7细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)介导炎症通路活化的影响,以探讨AS的抗炎作用机制。方法采用免疫荧光观察胞内TLR4表达和分布;免疫印迹检测TLR4及下游炎症通路关键分子的表达和活化;酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-6浓度。结果 AS对LPS诱导的TLR4表达及其在细胞中的聚集均有抑制作用;AS同时抑制TLR4衔接蛋白髓分化因子88和含TIR结构域干扰素诱导衔接蛋白表达,也抑制依赖于二者活化的肿瘤坏死因子受体相关因子6表达;对下游MAPK通路,AS抑制p38表达和磷酸化、JNK磷酸化,但对ERK1/2无显著影响;对下游NF-κB通路,AS下调抑制性-κBα(inhibitory-κBα,IκBα)的磷酸化,进而减少NF-κB亚基p50和p65活化入核的数量;最后,AS能够抑制LPS诱导的TNF-α和IL-6释放。结论 AS通过抑制LPS诱导的TLR4通路活化,减少致炎细胞因子的释放,从而发挥其抗炎作用。

异甘草酸镁对小鼠放射性肺纤维化的改善作用及其机制的初步探讨

目的探讨异甘草酸镁(Mg IG)对放射性肺纤维化的作用及其抗纤维化的机制。方法将SPF级雌性C57小鼠随机分为正常对照组、辐照模型组、异甘草酸镁对照组、异甘草酸镁治疗组和地塞米松治疗组,每组10只。除正常对照组和异甘草酸镁对照组,其余各组小鼠均给予单次15 Gy60Coγ射线全肺照射,照射后12周处死小鼠取左肺下叶组织,免疫组化法观察肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及转化生长因子-β(1TGF-β1)信号通路蛋白表达变化。结果各组小鼠肺组织均有Ⅰ型、Ⅲ型胶原及TGF-β1,Psmad2,Psmad3不同程度的表达,模型组明显高于正常对照组,异甘草酸镁治疗组与地塞米松治疗组相较于模型组各蛋白表达均有下降。结论异甘草酸镁可通过抑制小鼠肺组织TGF-β1信号通路改善放射性肺纤维。

贞蓉丹合剂对小鼠更年期综合征的影响

目的:采用雌性老龄KM小鼠作为更年期综合征(menopausal syndrome,MP)动物模型,探讨贞蓉丹合剂(ZRD)对更年期综合征的治疗作用。方法:选取经阴道涂片法鉴定为更年期的KM小鼠作为MP小鼠,考察ZRD对MP小鼠自主活动、握力、戊巴比妥钠诱导睡眠及阈下剂量催眠、毛果芸香碱发汗实验、脏器指数的影响。结果:MP小鼠与青年小鼠相比,自主活动次数、握力时间、睡眠时间、胸腺系数与脾系数均显著减少,汗点数与脂肪系数显著升高;ZRD中、高剂量(5.2、15.6 g/kg)能显著减少MP小鼠的自主活动次数以及毛果芸香碱所致的发汗情况;高剂量(15.6 g/kg)能显著延长MP小鼠握力时间以及戊巴比妥钠诱导MP小鼠的睡眠时间,并显著增加阈下剂量戊巴比妥钠催眠MP小鼠入睡数量,降低MP小鼠的脂肪系数并升高MP小鼠的胸腺系数和脾系数。结论:ZRD能显著改善MP小鼠某些症状。

虾青素对博来霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

目的探讨虾青素对博莱霉素所致SD大鼠肺纤维化的干预作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组、虾青素组、博来霉素组、虾青素+博来霉素组。经气道注入博莱霉素(5 mg·kg-1)或生理盐水后,每天灌服虾青素(2 mg·kg-1)或植物油连续14 d,最后一次给药24 h后取材。计算肺系数,进行HE染色及Masson染色,显微镜下观察大鼠肺部炎症及纤维化程度;酶联免疫夹心法检测血清中TGF-β1水平;免疫组化观察肺间质α-SMA蛋白表达变化;碱水解法检测羟脯氨酸含量;Western蛋白印迹法法检测ERK1/2及Smad2/3蛋白磷酸化水平。结果与假手术组相比,博来霉素组肺损伤严重,有明显的肺纤维化病灶形成;与模型组比较,药物治疗组肺损伤明显减轻,胶原蛋白沉积减少,羟脯氨酸含量也明显降低(P<0.01),α-SMA蛋白表达减少,TGF-β1水平明显降低(P<0.05),同时ERK1/2蛋白及Smad2/3蛋白磷酸化水平明显下降。结论虾青素能明显改善肺纤维化,其作用机制可能与降低TGF-β1水平,抑制ERK1/2蛋白及Smad2/3蛋白磷酸化有关。