PBL教学法在药学专业实习学员创新性科研能力培养中的应用

目的为实现本科生培养目标以及学员创新性科研能力的培养,将PBL教学法应用于药学专业本科学员实习带教中。方法将PBL教学法贯穿于科研选题、文献检索、实验设计及结果分析、论文撰写等全过程中。结果学员思考问题、解决问题的能力得到培养,顺利通过毕业答辩。结论 PBL教学法可有效提高学生创新意识和独立科研工作能力。

药剂学虚拟多媒体仿真实验室构建刍议

计算机作为现代科技最重要的技术手段，已经渗透到每一个学科。如何最大限度地应用计算机和信息技术，使学生能够更加有效地学习和掌握知识，是我们需要认真研究的课题。

执业医师药剂知识培训的探索与实践

合理使用药物是执业医师的基本职责和必备素质要求,与医疗机构的医疗质量密切相关。我国高校医疗专业课程体系中缺乏药剂学相关课程,导致执业医师普遍缺乏制剂基础知识,严重影响临床药物治疗水平。本文针对在执业医师中开展药剂知识培训的必要性、基本方法、培训内容等进行了探讨。

在临床医生中开展药剂学继续教育

临床医生素质水平的高低直接决定着医院医疗质量和医疗水平。由于教育体制的原因,临床医生普遍缺乏对药剂学知识的了解,已成为影响临床药物治疗水平进一步提高的重要因素。在临床医生继续教育中开展药剂学教学必要性、方法、内容、效果等方面进行了探讨。

炎症反应对兔腹主动脉粥样硬化形成的影响及其超声检查的评价

目的探讨超声观察兔腹主动脉粥样硬化斑块的形成过程,以及炎症对其的影响。方法将18只日本大耳兔随机分成对照组、高脂组、炎症组;对照组喂饲普通饲料,高脂组及炎症组均喂饲高脂饲料建立动脉粥样硬化模型,炎症组同时腹腔注射酵母多糖A,喂养12周。于实验开始第0周及第12周末分别对3组家兔进行超声检查,观察腹主动脉内中膜厚度(IMT)改变及斑块形成情况。12周后处死各组家兔取其腹主动脉行病理学检查。采用RT-PCR法检测腹主动脉壁中CRP mRNA的表达情况。结果与高脂组比较,炎症组腹主动脉CRP mRNA表达显著增高,IMT显著增厚。超声检查结果与病理学检查结果吻合一致。结论炎症反应能加速动脉粥样硬化形成的进程。超声检查为评价动脉粥样硬化提供一种简便、可靠、经济、实用的检测方法。

载Fe_3O_4液态氟碳纳米粒增强磁共振成像的实验研究

目的制备载Fe3O4液态氟碳(Fe3O4-PFOB)纳米粒,并探讨其增强磁共振成像效果。方法采用薄膜-超声法制备Fe3O4-PFOB纳米粒,并检测其理化性质。将24只健康SD大鼠随机分为3组:Fe3O4-PFOB纳米粒组(静脉注射Fe3O4-PFOB纳米粒)、PFOB纳米粒组(静脉注射PFOB纳米粒)及生理盐水组(静脉注射生理盐水)。对各组大鼠于处理后24 h行肝脏MR扫描。扫描完成后取出大鼠肝脏组织,进行HE及普鲁士蓝染色观察。结果所得样品为膜壳装载Fe3O4、中心包裹液态氟碳的纳米粒,呈球形,粒径(272.9±19.5)nm。注射Fe3O4-PFOB纳米粒24 h后,大鼠肝实质信号显著降低,肝脏-肌肉信号比明显减少,与其余两组比较差异均有统计学意义。普鲁士蓝染色可见Fe3O4-PFOB纳米粒组大鼠肝实质内有较多蓝色颗粒分布,其余两组染色阴性。HE染色各组大鼠肝脏均未见明显的形态学改变。结论 Fe3O4-PFOB纳米粒能有效增强磁共振成像效果,可以用作MRI阴性对比剂。

男性避孕纳米粒的制备与体外实验研究

目的构建聚乳酸-羟乙酸共聚物(polylactic acid-glycolic acid,PLGA)包载促卵泡生成素受体表位肽(FSHR32-44)的纳米粒,探讨PLGA材料作为避孕疫苗载体的可行性。方法使用PLGA为载体,制备出包载促卵泡生成素受体的B细胞表位(FSHR32-44)的纳米粒,透射电镜(TEM)观察表观形态,粒径仪检测粒径分布范围和Zeta电位,体外释放试验检测其理化特性。激光共聚焦显微镜观察小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)吞噬FSHR可溶性多肽和FSHR/PLGA NP的能力,流式细胞仪检测FSHR、PLGA NP和FSHR/PLGA NP促骨髓来源DCs成熟能力。结果单乳-溶剂挥发法制备的FSHR/PLGA NP大小粒径分布均匀、表面规整,粒径(296.3±3.5)nm,Zeta电位(-16.1±0.4)m V,FSHR包封率(62.71±2.83)%,并具有缓慢释放抗原的能力;体外细胞水平实验结果显示FSHR表位肽纳米粒易于被DCs摄取,有剂量和时间依赖性,能显著上调DCs表面CD40、CD86、CD83和MHC-Ⅱ功能分子的表达。结论 PLGA包载FSHR多肽有良好的包封率,易被DCs吞噬,并有强的促进DCs成熟作用,可以作为FSHR32-44避孕疫苗的载体。

孕期脂多糖刺激诱导子代大鼠高血压的机制研究

目的探讨孕期脂多糖刺激诱导子代大鼠（简称子鼠）高血压的机制研究。方法将SD孕鼠6只随机分为两组。对照组3只：腹腔注射无菌生理盐水0.5 mL;脂多糖组3只：腹腔注射脂多糖,剂量为0.79 mg/kg。分别在孕期第8、10、12天08∶00~09∶00进行腹腔注射。子鼠出生后,观察7~25周龄子鼠血压的变化和肾组织肾素mRNA表达、血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1-R）的蛋白表达以及肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）阳性细胞表达。结果与对照组相比,脂多糖组子鼠血压逐渐升高,至24周龄时达到高血压水平。血浆肾素活性和AngⅡ浓度无变化。7、16、25周龄子鼠肾内肾素mRNA表达和AngⅡ阳性细胞数与对照组相比明显增高,并与血压呈正相关;AT1-R的蛋白表达与对照组相比降低,与肾素mRNA表达呈负相关。结论孕期暴露于脂多糖引起子代成年大鼠肾组织肾素-血管紧张素系统活性增高,这可能是血压升高的一个机制。

Gq蛋白竟争性抑制肽GCIP-27质粒载体的构建及表达

目的化学合成寡核苷酸片段克隆入pIVEX2.3质粒中,构建GCIP-27的原核表达载体并进行原核表达。方法化学合成GCIP-27的全基因序列,定向克隆到pIVEX2.3质粒中构建含有T7启动子的pIVEX2.3-GCIP27原核表达载体并酶切及测序鉴定;pIVEX2.3-GCIP27质粒转染E coli BL21(DE3)pLysE细菌,用IPTG诱导GCIP-27多肽的表达。结果成功构建了pIVEX2.3-GCIP27表达质粒,经测序鉴定结果与设计的完全相符;成功用BL21细菌表达了GCIP-27多肽,GCIP-27占细菌总蛋白的4.96%。结论本实验构建并表达了GCIP-27的重组质粒,为GCIP-27的大量原核表达奠定了基础。

孕期母体炎症刺激对子代大鼠血压及学习记忆能力的影响

目的探讨孕期母鼠的炎症免疫刺激对子代大鼠老年期的血压及学习记忆的影响。方法24只孕鼠分别在孕期接受不同的处理,分为生理盐水对照组、内毒素(LPS)注射组、酵母多糖(Zym)注射组。子代大鼠出生后60周时,每组按随机数字表法选取8只,采用TNF-αELISA试剂盒检测子鼠血清中炎症因子TNF-α的水平,用鼠尾动脉无创血压测定仪测量子鼠血压,通过Morris水迷宫实验检测其行为学变化,HE染色观察海马结构的病理改变。结果孕鼠在孕期接受炎症免疫刺激后所生的子代大鼠在60周时,血清中TNF-α的水平、动脉血压值均明显升高,学习记忆能力下降,海马CA1区局部神经元排列紊乱、数量减少。结论孕鼠孕期接受免疫炎症刺激可能是导致子代大鼠发生高血压和学习记忆能力降低的重要原因之一。

纳米医学在动脉粥样硬化防治中的进展

过去的半个多世纪，尽管公共卫生、临床心脏病学的发展和新的治疗药物的发现使得心血管疾病的死亡率逐渐下降，全球范围内依然有30％的死亡南心血管疾病导致，超过包括癌症在内的其他所有疾病。

乙醇水溶液表面张力的模型拟合

对乙醇水溶液表面张力的实验数据,分别采用自定义双曲线模型、借用Logistic模型和Gomperty模型进行了回归拟合,均得到较好的拟合效果。

PLGA纳米药物递送系统的建立及其对bFGF生物学活性的维持

目的探索聚(乳酸乙醇酸)[poly(DL-lactide-co-glycolide),PLGA]纳米粒的制备条件,并进一步验证该纳米粒对碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的负载效率和活性维持。方法采用复乳法制备牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的PLGA纳米粒,研究PLGA浓度、PLGA/BSA质量比、水油体积比及内水相溶剂对纳米粒粒径、蛋白包封效率的影响,然后选择优化条件制备负载b FGF的PLGA纳米粒,通过细胞增殖实验验证b FGF的活性。结果采用优化条件制备的纳米粒对蛋白的包封率达到70.0%,粒径(373±12)nm,Zeta电位(27.1±0.6)m V。蛋白得以缓慢释放,突释现象不明显。负载b FGF的PLGA纳米粒有较好的活性,对细胞的促增殖作用优于b FGF溶液组。结论采用复乳法制备的PLGA纳米粒可用于负载生长因子实现缓释,并能较好地维持其生物学活性。

整合素β1对泡沫细胞形成的影响及其机制

目的探讨整合素β1对泡沫细胞形成的影响并初步阐明其作用机制。方法针对整合素β1基因设计并化学合成siRNA。RAW264.7细胞与含0.1 g/L ox-LDL的培养基培养,分为空白对照组、转染siRNA阴性对照组(siRNANC)和siRNA组。应用油红O染色观察泡沫细胞形成,胆固醇氧化酶终点法测定细胞内总胆固醇的含量,原子力显微镜观察细胞膜上小凹结构的变化,Western blot和实时荧光定量PCR检测清道夫受体CD36蛋白和mRNA的表达。结果与空白对照组相比,siRNA组油红O染色阳性细胞数明显减少,细胞内总胆固醇/总蛋白显著降低(P<0.01)。原子力显微镜下,siRNA干扰整合素β1基因后细胞未见明显的小凹结构。Western blot及荧光定量PCR结果显示siRNA组CD36蛋白和mRNA表达均显著减少(P<0.01)。结论沉默整合素β1基因能有效减少RAW264.7细胞对ox-LDL的摄取,抑制泡沫细胞的形成,其机制可能与降低清道夫受体CD36的表达和减少细胞膜表面的小凹相关。

整合素β_1基因对RAW264.7细胞摄脂功能的影响

目的初步探讨整合素β1基因在RAW264.7细胞摄脂过程中的作用。方法针对整合素β1基因的不同靶点设计并化学合成3条具有阳性转染率的siRNA,用脂质体法转染RAW264.7细胞,并根据转染的方式将实验分为空白对照组、转染siRNA阴性对照组、脂质体对照组和转染筛选出的阳性转染率最高的siRNA组。用Cy3标记siRNA荧光显微镜下检测转染效率,Real-time PCR筛选沉默效率最高的siRNA,细胞黏附性实验检测细胞黏附性的改变,脂质油红O化学染色法检测细胞的脂质摄取量的变化,上述检测均重复测定3次。结果成功将siRNA转染入RAW264.7细胞,并成功筛选出沉默效率最高(65%)的siRNA为siRNA1,转染后实验组整合素β1mRNA表达明显低于其他组,细胞的黏附性从其他组的70%以上降低到53%,泡沫细胞转化率由其他组的90%以上显著降低到17%,摄脂能力显著降低,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论整合素β1基因明显影响RAW264.7细胞的摄脂功能,进而影响RAW264.7细胞向泡沫细胞的转化。

新型纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的作用

目的研究纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASON)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary arterial smooth muscle cells,RPASMCs)增殖和凋亡作用。方法设计合成5'端标记Cy3的Bcl-xlASON,由纳米载体Ac-αCD携带。实验分3组:纳米载体携带的Bcl-xl ASON组(ASON-NPs组)、单纯纳米载体组(NPs组)和空白对照组,分别使用纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl ASON、纳米载体Ac-αCD和培养液处理RPASMCs 48 h,激光共聚焦显微镜观察RPASMCs对纳米载体携带的Bcl-xl ASON的摄取情况;RT-PCR、Western blot检测Bcl-xl的mRNA和蛋白表达;MTT检测处理后细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果激光共聚焦显微镜下可见ASON-NPs组细胞质内大量呈颗粒状均匀分布的红色荧光物质,空白对照组和NPs组细胞细胞质内未见红色荧光物质;ASON-NPs组处理的RPASMCs的Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著低于空白对照组和NPs组(P<0.05);ASODN-NPs组、NPs组、空白对照组细胞抑制率分别为:(53.61±3.02)%、(6.30±1.90)%、(1.40±0.62)%,凋亡率分别为:(53.04±2.09)%、(10.98±2.03)%、(2.19±0.11)%、ASON-NPs组和NPs组细胞抑制率、凋亡率均显著高于空白对照组(P<0.01),ASON-NPs组均显著高于NPs组(P<0.01)。结论纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸能被RPASMCs有效摄取,从而抑制其增殖,促进凋亡。

孕期炎症暴露致子代大鼠肾脏组织中甲基化转移酶表达异常的研究

目的 探讨肾脏DNA甲基转移酶（DNMTs）在孕期脂多糖（LPS）刺激仔鼠高血压发生的作用。方法 将孕鼠分为4组,分别为对照组（孕期的8~14d注射生理盐水）、LPS组（孕期第8、10、12天注射LPS,在9、11、13、14天注射生理盐水）、核转录因子κB（NF-κB）抑制剂PDTC组（孕期的8~14d每天注射PDTC）、LPS＋PDTC组（LPS在孕期第8、10、12天注射,PDTC注射时间及剂量同PDTC组）。用尾动脉无创血压测定仪测仔鼠血压,电子天平称体质量,RT-PCR检测仔鼠肾皮质白细胞介素-6（IL-6）、Fli-1及DNMTs的表达水平。结果LPS组仔鼠血压明显高于对照组（P〈0.05）,体质量较对照组高,肾皮质IL-6、Fli-1、DNMT1、DNMT3b表达较对照组升高（P〈0.05）。而LPS＋PDTC组仔鼠体质量、血压及IL-6、Fli-1、DNMT1、DNMT3b表达均较LPS组降低。结论 孕期LPS刺激会引起仔鼠肾皮质DNA甲基酶变化,提示一些关键基因的甲基化可能是孕期LPS刺激引起子代高血压的原因之一。

本科生药剂学自主创新设计实验初探

鉴于药剂学是一门实践性很强的学科,实验课在其课程学习中有着重要的地位,如何提高学生对这门课程的兴趣、增加对知识的理解和掌握一定的实验技能是我们进行实验教学改革的方向。本文结合培养大学生创新能力和实践动手能力的需求,分析了目前药剂实验教学中存在的一些问题,在本科生实验教学中开展了自主创新设计实验尝试,增加了实验课程里的"综合性、设计性、自主性"的因素。本次实验由学生自主设计实验,在指导教师的协助下完成了实验方案的讨论及制定,最终采用了"维生素C泡腾片制备"和"阿魏酸漂浮片制备"两个方案。学生在实验实施过程中,通过不断调整处方和制备工艺,解决了粘冲、崩解时间、漂浮时间不达标等问题。达到了预期的实验目的,有效提高了学生的积极性和综合能力,培养了学生的创新意识和创新能力。同时锻炼了教员起到了教学相长的相互促进作用。

多肽药物汇利心康对慢性心衰模型大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用研究

目的:研究多肽药物汇利心康(HLXK)对慢性心衰模型大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:取大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照(灌胃氯沙坦钾6mg·kg-1,每日1次)组和HLXK低、中、高剂量(腹腔注射10、30、90μg·kg-1,每日2次)组,每组8只,后5组腹腔注射盐酸多柔比星(隔天给药,15d)建立慢性心衰模型,同时给予相应药物。10周后用高频彩超测定各组大鼠左心室收缩末期容积(LVESV)和射血分数(EF),免疫组化法检测心肌组织中Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠LVESV明显增加,EF明显减少(P<0·01),表明其心功能明显减退;且Bcl-2蛋白表达明显减弱,Bax蛋白表达明显增强(P<0·01)。与模型组比较,阳性对照组和HLXK中、高剂量组LVESV明显减少,EF明显增加,Bax蛋白表达明显减弱,Bcl-2蛋白表达明显增强(P<0·05或P<0·01);HLXK低剂量组仅Bax蛋白表达明显减弱,Bcl-2蛋白表达明显增强(P<0·05)。结论:HLXK可能通过增强模型大鼠Bcl-2蛋白表达、抑制Bax蛋白表达,从而抑制心肌细胞凋亡。