胃食管反流病患者胆汁反流与食管内pH的关系

目的探讨胃食管反流病（GERD）患者胆汁反流和食管内pH值的关系。方法收集具有典型GERD反流症状患者60例，包括非糜烂性反流病（NERD）22例，轻中度反流性食管炎（MRE）20例，重度食管炎（SRE）10例和Barrett食管（BE）8例，采用24hpH监测仪及胆红素监测仪监测其胆汁反流开始和过程中食管内胃酸反流情况；并分析：（1）胆汁反流开始时和反流过程中pH值；（2）胆汁反流开始过程中pH分布；（3）各种胃食管反流病胆汁反流过程中PH值的差别。结果SRE与BE组胆汁反流发生率显著高于MRE和NERD组（P〈0．05）；GERD患者反流开始时，87．4％的食管内pH〉4，反流过程中食管内pH在3～4（26％）最多，其次4～5（20％）；SRE和BE组胆汁反流过程中pH值均显著低于NERD和MRE组（P〈0．05）。结论GERD患者胆汁反流和胃酸反流不一定同时发生。重度反流性食管炎和Barrett食管患者胆汁反流多伴有明显胃酸反流，而NERD和轻中度反流性食管炎胆汁反流过程中与胃酸反流并不完全同步。

幽门螺杆菌cagA长度多态性及其临床意义

目的探讨我国幽门螺杆菌(Hp)分离株细胞毒素相关蛋白A(cagA)基因的分布和多态性情况与Hp感染相关胃十二指肠疾病的关系。方法设计针对cagA基因中一段297bp保守序列以及cagA基因3′端可变区两侧保守序列PCR引物,通过PCR检测82株我国Hp菌株的cagA基因分布情况,及其中77株HpcagA基因3′端可变区长度多态性。结果82株Hp中,77株(93.9%)297bpcagA基因片段扩增阳性;包括297bp片段扩增阴性的2株在内,71(92.2%)株可扩增出cagA基因3′端可变区,其中主要为PCR产物长度约825bp的Ⅰ型。结论我国Hp菌株cagA阳性率极高,其3′端可变区主要为较短的Ⅰ型。

5-Aza-CdR增强TRAIL对胃癌细胞的抗瘤活性与caspase-8表达的关系

目的 探讨 5 Aza CdR对凋亡诱导分子TRAIL抗胃癌细胞活性的影响。方法 采用MTT方法检测TRAIL蛋白的抗癌活性 ;采用RT PCR方法检测caspase 8mRNA的表达。结果 TRAIL 2 0 0ng/ml作用 72h对SGc 790 1、Kato 3和AGS胃癌细胞的生长抑制率分别为 9 83 %、11 94%和 4 0 4% ;经 5 Aza CdR处理后 ,对 3株胃癌细胞的抑制率分别提高到3 8 98%、5 2 42 %和 3 0 72 % ;用 5 Aza CdR处理后 3株胃癌细胞caspase 8mRNA表达明显增加。结论 5 Aza CdR能增强胃癌细胞对TRAIL的敏感性 ,其机制可能与caspase 8的表达上调有关。

hTERT干扰真核表达载体的构建及鉴定

目的构建和鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰真核表达载体。方法人工合成hTERT干扰序列并定向克隆到siRNA(small interfereace RNA)真核表达载体pSilencer3.1_H1neo;采用PCR、酶切和测序鉴定。结果成功构建了hTERT干扰真核表达载体。结论hTERT干扰真核表达载体的构建为进一步研究端粒、端粒酶在肿瘤细胞中的生物学作用奠定了基础。

应重视早期胃癌的内镜诊断

0引言 胃癌居我国恶性肿瘤之首位,而早期胃癌目前的发现率不高,应引起高度重视,努力提高,以挽救更多的患者.回顾一下内镜的发展史和早期胃癌临床研究进展情况,就不难了解为什么至今内镜检查仍然是早期胃癌(EGC)诊断的主要方法.1868年Kussmal首创硬管胃镜后的90a内,EGC的研究几乎没有什么发展,日本1950年代初查出EGC只占全部胃癌的3.6%.自从1958年Hirschwit设计光学纤维胃镜后,几经改革,镜身越来越细,接物镜视野越来越大,角度可上下弯曲达300度以上,观察病变方便,易为患者所接受.因此,随着纤维胃镜的发展革新,日本EGC已占全部胃癌的52-79%.充分说明了胃镜检查在胃癌早期诊断中的重要地位.

人端粒酶逆转录酶干扰对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰对肝癌．HepG2、SMMC-7221细胞生物学形为的影响和对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡的影响。方法将HepG2细胞和SMMC-7721细胞分为转染组 (转染重组质粒真核表达载体)、对照组(转染空载体质粒)和未转染组。采用聚合酶链反应方法检测hTERT干扰序列, 逆转录聚合酶链反应方法检测hTERT表达,HE染色、生长曲线和流式细胞术方法分别检测细胞形态、增殖情况和细胞周期,β-半乳糖苷酶染色方法检测细胞状态,Armexin V／PI染色流式细胞术检测细胞凋亡。结果转染组细胞内均存在hTERT干扰序列,HepG2和SMMC 7221细胞hTERT干扰率分别为100％和43．3％;与未转染组细胞相比, 转染细胞核质比明显缩小,增殖率下降差异有统计学意义(P<0．05),老化细胞和G2-M期细胞明显增加(P<0．05)。细胞老化率分别由未转染组的0增加到转染组的20．4％,由3．60%,增加到10．O％;G2-M期分别由未转染组的7．1％、6．9％增加到转染组的10．6％、7．9％。hTERT干扰显著增加肝癌细胞凋亡和TRAIL诱导凋亡敏感性(P<0．05)。两株肝癌细胞凋亡率分别由未转染组的3．5％、4．8％增至转染组的5．2%、7．9％;100 ng／ml TRAIL作用24 h后两株肝癌细胞凋亡率分别由未转染组的5．3％、13．9％增加到转染组的10．4％、77．2％,而对照组细胞各指标均无显著变化。结论 hTERT干扰明显影响肝癌细胞的生物学行为,显著增加细胞凋亡和TRAIL诱导凋亡的敏感性。

凋亡相关蛋白在胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的 研究核转录因子 (NF) κB、生存素 (survivin)、Bcl 2和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的胃癌细胞凋亡中的作用。方法 应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法 ,观察胃癌细胞SGC 790 1、MKN2 8、AGS、MKN45经TRAIL作用后的细胞凋亡率 ,Westernblot方法分析 4种胃癌细胞中NF κB、生存素、Bcl 2和Caspase3的表达。结果 TRAIL 50ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 2 4.0 5% ,7.83 % ,8.0 5%和3 .17%。TRAIL 3 0 0ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 3 6.0 5% ,2 0 .2 7% ,16.50 %和 11.80 %。Westernblot结果显示 ,SGC 790 1细胞NF κB、生存素的表达高于MKN2 8细胞 (P <0 .0 5) ,与Bcl 2的表达无明显差异。MKN2 8细胞Caspase3的表达高于SGC 790 1细胞 (P <0 .0 5)。结论 TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性 ,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象可能与凋亡抑制因子生存素和NF κB的表达增强以及Caspase3

端粒酶逆转录酶RNA干扰增加肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体活性

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNFα-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）为肿瘤坏死因子家族成员,与TNFα和Fas配体不同的是它仅诱导病毒感染细胞、转化细胞和肿瘤细胞凋亡,不引起炎症反应而杀伤正常细胞.TRAIL诱导大多数肿瘤细胞凋亡,但也有部分肿瘤细胞不敏感,且TRAIL对不敏感的肿瘤细胞有促增殖作用。

Barrett食管粘蛋白表达及意义

目的检测 Barrett 食管中粘蛋白的表达,探讨粘蛋白表达的意义。方法采用免疫组化方法检测 Barrett 食管上皮中 MUC1、MUC2、MUC3、MUC5AC 及 MUC6粘蛋白的表达,分析粘蛋白表达与 Barrett 食管组织病理学分型及放大内镜下小凹分型问的关系。结果 Barrett 食管胃型化生上皮以及肠化上皮均可见 MUC1的弱阳性表达;肠化上皮中见 MUC2的强阳性表达,阳性表达主要位于杯状细胞胞浆中;MUC3不仅在 Barrett 食管肠化上皮表层的柱状细胞及杯状细胞浆表达,而且在肠化上皮的无肠化区的柱状细胞内也可见阳性表达;MUC5AC 不仅在 Barrett 食管胃、肠上皮化生的表层柱状上皮胞浆内强阳性表达,而且在杯状细胞亦见阳性表达;在 Barrett 食管胃、肠两型上皮化生的深层腺体均可见 MUC6的阳性表达,抗原定位于细胞浆内,杯状和柱状细胞均有阳性反应物质;在不同分型小凹中,绒毛状及不规则型小凹上皮 MUC2、MUC3的阳性表达显著高于点状和棒状(P<0.01);MUC2、MUC3仅在肠化上皮中表达,在胃底及交界型上皮中无表达;MUC1、MUC5AC 及 MUC6在胃型及肠型化生上皮中均呈阳性表达,阳性表达率在各组织病理分型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Barrett 食管肠化生上皮中特异表达 MUC2与 MUC3;MUC3的表达可能是肠化形成的早期事件;绒毛状及不规则型小凹中 MUC2与 MUC3高表达提示两型小凹的肠型分化特点,检测其表达有助于 Barrett 食管特殊肠上皮化生的识别。