皮下注射大剂量卵白蛋白诱导小鼠哮喘免疫耐受模型的建立及机制初步研究

目的腹部皮下注射大剂量卵白蛋白（ovalbumin,OVA）建立小鼠哮喘免疫耐受模型并对机制进行初步研究。方法选择BALB/c小鼠18只为建模对象,按随机数字表法分为3组：哮喘免疫耐受模型组、哮喘对照组、正常对照组,每组6只。哮喘免疫耐受模型组予10μg OVA于0、7 d腹腔注射致敏,21~25 d持续5 d予1 mg OVA腹部皮下注射诱导免疫耐受,35、36、37 d予1%OVA雾化激发;哮喘对照组除了省去21~25 d OVA皮下注射诱导免疫耐受外,其余同哮喘免疫耐受模型组;正常对照组使用等量生理盐水致敏及激发。末次激发24 h内检测气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）计数细胞总数及细胞分类计数,ELISA法检测血清OVA特异性Ig E、BALF中IL-4、IFN-γ、IL-10的表达,HE染色观察肺组织病理改变,流式细胞仪检测各组小鼠外周血Treg细胞占CD4＋T淋巴细胞百分率情况。结果哮喘免疫耐受模型组气道反应性、BALF中嗜酸性粒细胞计数、IL-4水平及血清OVA特异性Ig E水平明显低于哮喘对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;BALF中IL-10明显高于哮喘对照组（P〈0.05）;而BALF中IFN-γ水平与哮喘对照组差异无统计学意义;同时HE染色发现哮喘免疫耐受模型组肺组织炎症较哮喘对照组明显减轻;流式细胞技术检测发现外周血Treg细胞百分比明显高于哮喘对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论予致敏小鼠腹部皮下注射大剂量OVA可成功诱导小鼠哮喘免疫耐受形成,Treg及免疫抑制因子IL-10参与了免疫耐受的形成。