版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的形态及生物力学研究

本研究观察了版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的解剖学、组织学形态 ,并对其腰椎进行轴向载荷压缩试验。小型猪椎骨及肋骨在解剖学、组织学方面与人近似 ,其腰椎能承受人类正常生理载荷。因此 ,版纳小型猪椎骨、肋骨可以作为异种骨移植的材料。

版纳小型猪脱细胞骨基质的抗原检测及力学性状

制备版纳小型猪脱细胞骨基质,进行组织学和生物力学观察,并进行了异种抗原-αga l表达的检测,结果表明经脱细胞处理后,去除了骨组织的细胞成分,同时消除了抗原性,力学性质上与正常对照无明显差异,可以作为一种合适的骨组织工程支架材料。

血流切应力影响动脉内皮形态重建的在体研究

目的 探讨动脉血流受阻后壁切应力 (WSS)变化对内皮细胞形态适应性重建的影响。 方法 6 0只实验兔建立颈总动脉血流减小模型 ,在术后 0～ 30d 8个不同时相点 ,制作血流减小后的颈总动脉铺片 ,应用银染及荧光素标记的鬼笔环肽特染方法 ,显微镜及共聚焦激光扫描显微镜下观察动脉内皮细胞 (AEC)的形状及骨架纤维肌动蛋白 (F actin)的变化 ,计量AEC结构参数。 结果 WSS减小后 12h即导致AEC张力纤维的减少或消失 ,形状由棱形变为椭圆形 ,计量显示 ,AEC形状指数、长宽比分别较正常对照显著增大、减小 (P <0 0 1)。术后 7d改变最为显著 ,外周带微丝增粗 ,中央张力纤维完全消失 ,细胞排列无明显定向。随着WSS的递增 ,部分细胞可见张力纤维 ,AEC形状指数在逐渐减小 ,长宽比增大。 结论 AEC的形态随WSS的动态变化而改变 ,提示WSS是导致AEC形态结构重建的主要因素。

锌指蛋白A20基因对内皮细胞缺氧损伤的保护作用

目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对缺氧诱导内皮细胞凋亡的影响。方法:①培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;②采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,经G418筛选,免疫荧光检测A20基因的表达;③TUNEL原位末端标记法检测转染前后缺氧诱导内皮细胞凋亡情况。结果:A20基因在内皮细胞中得到有效表达,正常对照组及转染A20基因组人脐静脉内皮细胞凋亡为(4±1)%,缺氧培养24h后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(18±1)%、(8±1)%,两者相差有显著性意义(P<0.05)。结论:A20基因能够显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡,可能在缺氧所致内皮细胞损伤中具有保护作用。

绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及成骨诱导

目的 分离培养绿色荧光蛋白 (GFP)小鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)并成骨诱导分化。 方法 密度梯度离心法分离GFP小鼠MSCs,体外传代扩增 ,条件培养基成骨方向诱导 ,利用荧光显微镜、HE染色、细胞化学和免疫组织化学方法进行观察。 结果 MSCs在传代和诱导分化过程中稳定表达GFP ,经成骨方向诱导 10d后 ,出现大量碱性磷酸酶和骨钙素染色阳性细胞。 结论 成功分离了GFP小鼠MSCs,并体外向成骨方向诱导分化。

Osf2/Cbfa1对间充质干细胞的促成骨效应

目的:观察重组腺病毒介导Osf2/Cbfa1对间充质干细胞(MSCs)的促成骨效应。方法:分离培养兔MSCs,用重组Osf2/Cbfa1腺病毒感染MSCs,蛋白印迹检测目的基因表达,对硝基苯磷酸二钠法和放免法分别检测成骨细胞标志基因碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素表达。结果:感染后MSCs检测到Osf2/Cbfa1表达,从第4天开始,ATP活性和骨钙素含量较单纯诱导组和对照组显著增高。结论:Osf2/Cbfa1可明显促进MSCs向成骨细胞定向分化。

在体种植后骨髓基质干细胞(BMSCs)的定位及成骨效应研究

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)与支架材料复合,并种植到动物体内后的定位及成骨情况。方法分离培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠BMSCs,体外扩增后与猪脱细胞骨基质材料复合,植入裸鼠背部作为实验组,并以单纯材料植入作为对照组,8周后进行大体观察、常规组织学检查及荧光检测。结果实验组移植物周围部成骨明显,GFP阳性细胞较多;中央部材料降解吸收,GFP阳性细胞少见。对照组成骨较少。结论BMSCs作为种子细胞参与了骨重建,同时GFP示踪是观测BMSCs的一种较好方法。

异种移植免疫排斥反应中天然抗体的研究

随着移植免疫研究和移植外科技术的发展,器官移植广泛应用于临床。然而,世界上都存在供体器官远远不能满足受者(患者)需要的问题。虽然异种移植有可能解决器官供应不足的问题,但从1905年法国医生Princeteau进行了世界上第一例临床异种移植手术开始,至今的所有异种移植实验或手术研究都因移植后的供体器官遭受严重的免疫排斥反应而失活。

血流切应力调控内皮型一氧化氮合酶的分子机制

血流切应力（flowshear stress，rss）是生理或病理条件下调节血管内皮细胞产生一氧化氮的最重要的刺激因素。FSS对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）的调控包括基因转录的调节、转录后的调节和翻译后的调节。eNOS基因转录以及转录后mRNA的稳定性能被FSS诱导加强。FSS通过游离钙离子浓度、磷酸化、eNOS相关蛋白以及细胞内易位等途径调节eNOS的催化活性。此外，FSS还能调控eNOS催化反应的辅助因子。

MAPK信号转导在成骨细胞分化中的作用

MAPK信号转导途径是细胞外信号引起细胞核内反应的通道之一 ,通过三级酶促级联反应 ,最终磷酸化靶蛋白 ,激活转录因子 ,调节特定的基因表达。近年研究表明 ERK、P38和 JNK通路参与了成骨细胞分化增殖的信号转导过程。本文介绍了这三种 MAPK通路的基本概况 。