对复合伤教学中加强科学素质教育的思考

介绍了第三军医大学复合伤研究所在复合伤教学中密切结合学科优势，将研究成果及时的应用于教学，对学生进行科学素质教育的情况。

视黄酸对pRARE4-IFNα表达载体转染细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨视黄酸 (RA)及其诱导的外源性α 干扰素 (IFNα)抗肿瘤的协同效应及其可能分子机制。方法 通过构建的含视黄酸反应元件 (RARE)的IFNα表达载体 (pRARE4 IFNα) ,转染肿瘤细胞后 ,使外源性IFNα基因的表达受RA的诱导。运用MTT比色法、流式细胞仪分析和RT PCR等技术方法 ,观察RA对pRARE4 IFNα转染和未转染的HL 6 0和MCF 7细胞的体外增殖能力、细胞周期分布和细胞凋亡的影响 ,以及IRF 1、STAT1和Fas抗原表达的改变。结果 pRARE4 IFNα转染和未转染的HL 6 0和MCF 7细胞经RA处理后 ,生长减慢 ,细胞周期被阻滞在G1/G0 期 ,细胞凋亡率增加 ,DNA片段化百分率升高 ,IRF 1和STAT1mRNA水平明显增高 ,其中 ,以pRARE4 IFNα转染细胞经RA处理后变化更明显。结论 RA及其诱导的外源性IFNα具有协同抗肿瘤作用 ,上调节IRF

^(60)Coγ射线照射对培养小鼠骨髓基质细胞IL-6表达的影响及机制研究

观察了60 Coγ射线照射对培养小鼠骨髓基质细胞 (BMSCs)的白细胞介素 - 6 (IL - 6 )mRNA及蛋白表达的影响。采用Dexter方法体外培养小鼠BMSCs,8.0Gy60 Coγ射线照射后用放射免疫法测定培养上清液中IL - 6的浓度 ,应用逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)的方法检测IL - 6的mRNA表达 ,同时与NF -кB抑制剂PDTC或地塞米松预处理的BMSCs相比较。结果表明 ,培养小鼠BMSCs在正常情况下低表达IL - 6 ,辐射后 2h时其mRNA水平表达升高 ,4h时达峰值 ,之后开始下降 ;其蛋白表达在 2h时开始升高 ,8- 12h时达峰值 ,2 4h时基本恢复至正常水平 ;而BMSCs在受照射前 2h用PDTC或地塞米松预处理后 ,辐射并不引起IL - 6mRNA表达的改变。结果显示 ,60 Coγ射线照射能够激活培养小鼠BMSCs细胞IL - 6基因的转录 ,使细胞分泌IL- 6增多 ,其机制可能与照射引起的NF -кB活化有关。

E838对放射损伤小鼠活存及造血功能的影响

动物照射前后不同时间给予新型抗放药E838腹腔注射 ,观察其死亡率和死亡动物活存时间 ,并在用药后不同时间检测其外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、骨髓粒系祖细胞集落形成单位CFU -GM和造血干细胞CFU -S数 ,研究了E838对放射损伤小鼠存活及造血功能的影响。结果表明 ,E838预防用药能够明显提高损伤动物的 30d存活率及平均活存时间 ,对造血功能的研究结果也表明 ,E838预防用药能够减少损伤后外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、骨髓粒 -单系祖细胞数及造血干细胞CFU -S数的下降幅度。显示出E838对放射损伤具有确切的预防效果 。

RARE介导的视黄酸可调控的IFN-α表达载体的构建与鉴定

目的构建一个含视黄酸反应元件 ( RARE)的 IFN- α表达载体 ,使其在真核细胞内的表达受视黄酸 ( RA)的诱导。方法运用 DNA重组技术构建含有 4个 RARE重复序列的 IFN- α真核表达载体 ( p RARE4 - IFN- α) ,经酶切、PCR鉴定和测序确认后 ,用脂质体转染法使其转染 HL- 60细胞 (人早幼粒白血病细胞系 )、Bcap- 3 7和 MCF- 7细胞 (人乳腺癌细胞系 ) ,RA处理后 ,RT- PCR分析 IFN- α m RNA水平 ,EL ISA检测培养细胞上清中 IFN- α含量。结果 p RARE4 - IFN- α转染的 HL- 60、Bcap- 3 7和 MCF- 7细胞 ,IFN- α分泌量为 16～ 2 4 ng/ ( m L· 10 6 )细胞 ,而经 RA处理 2 4 h,IFN- α表达水平可增加 8～ 13倍 ,但经 RA处理 2 4 h的细胞 ,换无 RA的新鲜培养基继续培养 2 4 h后 ,IFN- α表达水平又下降到 2 5～ 3 4 ng/ ( m L· 10 6 )细胞。结论带有 RARE的 IFN- α表达载体转染细胞后 ,外源性 IFN- α基因的表达受 RA的诱导。

Caspases在视黄酸诱导pRARE4-IFNα转染肿瘤细胞凋亡中的作用

目的探讨视黄酸(RA)及其诱导的外源性α-干扰素(IFNα)抗肿瘤作用与半胱氨酸蛋白酶(caspase)的关系。方法含视黄酸反应元件(RARE)的IFNα表达载体(pRARE4-IFNα),转染肿瘤细胞并证实外源性IFNα基因的表达受RA的诱导后,分析了细胞增殖功能、细胞DNA梯形带,caspase-1、3基因表达,caspase-3活性以及caspase-3特异性抑制剂(DEVD-CHO)对RA和/或IFNα诱导细胞凋亡的抑制作用。结果对RA敏感的HL-60细胞和caspase-3基因缺失的MCF-7细胞经RA处理后,增殖能力减弱,出现明显的DNA梯形带,caspase-1基因表达上调节,HL-60细胞caspase-3基因表达上调节,活性升高,DEVD-CHO可拮抗RA引起的HL-60细胞caspase-3活性升高,并部分削弱RA引起的细胞增殖抑制和凋亡。结论Caspase-3在RA诱导的细胞凋亡中有重要作用,同时,RA可能通过其它途径诱导caspase-3基因缺失细胞的凋亡。