P物质对大鼠成纤维细胞转化生长因子β-1及其受体基因表达的影响

目的 :探讨P物质 (substanceP ,SP)作用于离体培养的大鼠肉芽组织成纤维细胞后 ,对成纤维细胞转化生长因子 β- 1(TGFβ - 1)及其受体 - 1/ - 2 (TGFR - 1/R - 2 )基因表达的影响。方法 :采用大鼠肉芽组织成纤维细胞培养和逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 (10 -9M～ 10 -5M )及不同孵育时间 (0h ,3h ,6h ,12h ,2 4h)情况下刺激成纤维细胞后 ,成纤维细胞TGFβ - 1/R - 1/R - 2mRNA表达的改变情况。结果 :SP可上调大鼠肉芽组织成纤维细胞TGFβ - 1/R - 1/R - 2mRNA的表达。其剂量 -效应曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 10 -8M。在最大效应浓度 (10 -8M )时 ,SP对大鼠成纤维细胞TGFβ - 1/R - 1/R -2mRNA表达的上调作用分别于刺激细胞后 6h/ 6h/ 12h达高峰。结论 :体外实验结果显示 :SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞TGFβ - 1/R - 1/R - 2基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关。这种影响可能是创伤愈合过程中SP影响成纤维细胞增生、分化和瘢痕组织形成的机制之一。

LPS受体及其信号传导通路

细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)可激活单核细胞、巨噬细胞及内皮细胞 ,引起细胞因子合成和释放 ,导致全身性炎症反应发生。而LPS跨膜信号转导是引起细胞效应的关键。本文主要综述与LPS的跨膜信号转导有关Toll样受体—TLR2 (Toll likereceptor 2 )和 (TLR4Toll likereceptor 4 )的结构特点、配体范围、基因表达调节以及信号转导机制。正是Toll样受体直接将LPS刺激信号传入细胞内 ,激活NF κB信号途径 。

无镁损伤培养海马神经元后ERK1／2核转移的动态变化

目的动态观察培养的大鼠海马神经元经无镁损伤后不同时间细胞外信号调节激酶磷酸化（P—ERK1／2）及其核转移，探讨体外培养海马神经元受致痫性损伤后ERK1／2信号通路的动态变化。方法选24h内新生Wistar大鼠，取双侧海马神经元，用NB培养基加B-27培养9d，换成无镁细胞外液模拟“癫痫微环境”，使得神经元受到致痫性损伤。采用免疫荧光标记，在激光共聚焦显微镜下定位无镁损伤前后P—ERK1／2的表达部位；运用Western blot技术检测无镁损伤不同时间P—ERK1／2表达强度的变化。结果无镁损伤前，P—ERK1／2主要在神经元胞浆和轴浆内表达，胞核表达不明显，而在损伤之后，P—ERK1／2在神经元胞浆、轴浆以及胞核内都有表达，强度接近；在损伤后1h，P—ERK1／2表达就增强，3h达到高峰（P—ERK1：2．2838±0．1186；P—ERK2：4．1273±0．0927），与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论无镁细胞外液损伤可引起培养的神经元P—ERK1／2的大量表达，培养神经元致痫性损伤后ERK1／2信号通路的过度激活可能与其反复癫痫样放电有关。

腹部枪伤瞬间血流动力学变化对脑损伤的作用

目的：从血流动力学方面探讨腹部枪伤时脑部远达效应发生的机制．方法：用５．５６ｍｍＭ１９３枪弹高速致伤狗腹部，用压力传感器分别测试腹主动脉、主动脉弓、颈总动脉起始端和末端的压力变化，并计算各动脉周向应力的变化．结果：枪击瞬间腹主动脉、主动脉弓、颈总动脉起始端和末端压力分别升高６．５６、４．３３、３．２８和２．３４倍，腹主动脉、主动脉弓、颈总动脉起始端周向应力分别增加８．０、５．３和３．６倍．结论：枪击瞬间各动脉内存在强大的压力，这些压力具有变化速度快、幅度大、正负压共存的特点．强大的压力使动脉管壁极度扩张而被致伤．从腹部至颈部动脉间存在着强大的压力差，这就促使大量的血液急速地向脑部冲击，造成脑组织损伤．

P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响

目的 探讨P物质 (SP)对大鼠肉芽组织成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子 (bF GF)及其受体 (FGFR 1)表达的影响。方法 采用成纤维细胞体外培养和逆转录 多聚酶链反应(RT PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 ( 1× 10 - 9～ 1× 10 - 5mol L)及孵育时间 ( 0、3、6、12、2 4h)情况下刺激成纤维细胞后 ,其bFGF、FGFR 1mRNA表达情况。结果 SP可上调大鼠成纤维细胞bF GF、FGFR 1mRNA表达。SP对bFGF的量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 - 7mol L。但SP仅在高浓度 ( 1× 10 - 6 ～ 1× 10 - 5mol L)时促进FGFR 1表达。在最大效应浓度 ( 1× 10 - 7～ 1× 10 - 5mol L)时 ,SP对bFGF、FGFR 1表达的上调作用分别于刺激细胞后 3、12h达高峰。结论 SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、FGFR 1基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关 ,这可能是SP在创伤修复中发挥作用的机制之一。

高速三角破片致猪坐骨神经损伤的特点

目的探讨高速三角破片敏猪坐骨神经损伤的伤情特点。方法长白猪14只，体重（34．3±5．2）kg。采用随机数字表法分为A、B两组各7只，用初速为（773．1±12．4）m／s的0．37g三角破片致伤，分别瞄准猪右后肢外侧坐骨神经体表投影线中点和旁开2cm射击。观察伤道入口和出口大小、长度，神经与伤道位置关系，伤后48h观察神经大体及光电镜改变。结果破片在伤道内存在不同程度的偏离原射入方向：A、B组分别有5只和1只坐骨神经位于原发伤道内，其中4例出现不同程度断裂；光镜下见神经严重出血水肿、炎细胞浸润，大量神经纤维、轴索断裂，髓鞘着色浅；电镜下见髓鞘严重溃变、轴索变形。A、B组分别有1只和5只位于震荡区内，距原发伤道（2．07±0．45）cm，光镜见神经轻度出血、充血，部分神经纤维、轴索断裂；电镜下可见髓鞘部分分层。A、B组各有1只位于挫伤区内，神经受损程度介于二者之间。结论高速三角破片在组织内走行不稳定；其原发伤道内的猪坐骨神经断裂发生率高，损伤严重，范围广，华勒变性早；位于原发伤道旁的神经亦发生形态学改变，其损害程度与神经和原发伤道距离有关。

体外氧糖剥夺损伤诱导信号转导和转录激活因子-3信号通路在海马神经元中的动态变化

目的观察体外培养的大鼠海马神经元经氧糖剥夺损伤后信号转导和转录激活因子一3（signaltransducerandactivatoroftranscriptionfactor-3，STAT3）磷酸化及其核转移，探讨体外模拟的脑缺氧、缺血损伤细胞模型中STAT3信号通路的动态变化。方法选择新生24h内sD大鼠，取双侧海马神经元，用DMEM／F12培养基培养9d，氧糖剥夺处理4h，建立海马神经元氧糖剥夺损伤模型。运用免疫荧光技术，在激光共聚焦扫描显微镜下观察磷酸化STAT3（P—STAT3）的表达部位。采用Westernbloting技术检测海马神经元氧糖剥夺后不同时相点P—STAT3表达强度的变化。结果对照组P—STAT3在胞核表达不明显；而模型组在建模后1hP—STAT3在胞核内即有表达，3h达到高峰，各时相点与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氧糖剥夺损伤诱导海马神经元胞核中P—STAT3水平明显升高，提示海马神经元氧糖剥夺损伤后STAT3信号转导通路被过度激活。