大鼠脂肪间充质干细胞膜片的生物学特点研究

目的:探讨利用大鼠脂肪间充质干细胞体外构建细胞膜片方法,并分析细胞膜片的生物学特点。方法:从出生7d大鼠体内提取脂肪组织并获得纯化的脂肪间充质干细胞(ADSCs,adipose-derived mesenchymal stem cell),将ADSCs体外构建细胞膜片,待膜片成熟后采用倒置显微镜和HE染色对膜片进行形态学检测,实时定量PCR检测细胞COL-1、FN、FGF、VEGF的基因表达水平,Western Blot检测COL-1、FN、FGF、VEGF的蛋白表达情况。结果:纯化的ADSCs体外诱导培养10d后获得白色膜状细胞膜片,镜下观察见细胞复层生长,染色显示细胞间紧密连接并分泌大量细胞外基质(ECM,extracellular matrix)。Real Time-PCR结果表明细胞膜片组COL-1、FN、FGF、VEGF mRNA表达水平高于正常培养的ADSCs组。Western Blot蛋白学检测与基因检测趋势一致。结论:体外培养大鼠脂肪间充质干细胞能构建细胞膜片,膜片的COL-1、FN、FGF、VEGF表达水平显著高于对照组。

不同海拔高度部队驻军官兵牙周健康调查

目的：探讨我国不同海拔高度、不同驻守时间驻军人员的牙周健康状况。方法：以分层、单纯随机抽样方法抽取新疆叶城、西藏林芝、拉萨、那曲、日喀则驻军官兵l300人为调查样本，按照海拔分为平原、2900m、3700m、4500m组和高原驻守时间：1年组、2～4年组、5～9年组、≥10年组，采用《第三次全国口腔健康流行病学调查方案》基本方法，检查官兵口腔4个象限的第一、二磨牙；右侧上颌中切牙和左侧下颌中切牙的牙周袋深度和附着丧失。结果：平原组和1年组（2900m、3700m、4500m）无统计学差异（P〉0．05）。平原组和2～4年组（2900m、3700m、4500m）有统计学意义（P〈0．05）；与5～9年、≥10年组同样有统计学意义（P〈0．05）。2900m、3700m、4500m的各自1年组与2～4年、5～9年、≥10年组两两比较均有统计学意义（P〈0．05）。表明不同海拔驻军官兵牙周袋深度的患病率和附着丧失的程度随海拔高度的增加、高原驻守时间延长呈升高的趋势。结论：高原驻军官兵的的牙周炎患病率较高，建议加强官兵卫生知识的教育普及和部队卫勤人员的口腔卫生保健能力，加强牙周疾病的防治工作。

盐酸小檗碱对体外培养人牙周膜细胞炎性反应影响的初步分析

目的:研究盐酸小檗碱(Ber)作用于体外培养的人牙周膜细胞(PDLCs),在脂多糖(LPS)刺激下,合成和分泌前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的变化,初步推断Ber对牙周炎的治疗作用。方法:将体外培养的PDLCs根据加入LPS与否设定为NLPS和LPS两大组,再根据培养液中Ber终浓度0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL和20μg/mL将其分为NLPS0、NLPS1、NLPS2、NLPS3以及LPS0、LPS1、LPS2和LPS3共八个组,用ELISA法检测上清液中PGE2、IL-1β和IL-6的浓度。结果:培养48h后,各组PGE2、IL-6和IL-1β有一定的表达量,NLPS各组该三者表达的差异无统计学意义(P>0.05);加入LPS后,LPS0组上清液中PGE2、IL-1β和IL-6表达明显升高,与NLPS各组之间差异具有统计学意义(P<0.05);在加入LPS的同时加入Ber后与LPS0组比较PGE2、IL-1β和IL-6表达明显下降(P<0.05);PGE2表达,LPS各组差异具有统计学意义(P<0.05),其中除LPS3以外,其他LPS组与NLPS各对应组差异具有统计学意义(P<0.05);IL-1β表达,LPS0与其他LPS组差异有统计学意义(P<0.05),而LPS1、LPS2和LPS3之间差异无统计学意义(P>0.05),且该三组与NLPS对应组之间差异无统计学意义(P>0.05);IL-6表达,随着Ber浓度升高,各LPS组表达逐渐降低(P<0.05),且与对应NLPS组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ber可以抑制LPS刺激体外培养的PDLCs产生的炎性反应。

牙囊细胞条件培养液在大鼠脂肪间充质干细胞向成牙骨质分化中的作用

目的:探讨牙囊细胞条件培养液(DFCCM)在诱导大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)向成牙骨质样细胞分化中的作用。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞、牙囊细胞,制备DFCCM。用DFCCM诱导ADSCs,通过MTT检测ADSCs增殖能力的变化;免疫荧光及实时定量PCR方法检测成骨关键蛋白-骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)及成牙骨质关键蛋白-牙骨质附着蛋白(CAP),牙骨质蛋白(CP23)的情况。结果:牙囊细胞条件培养液诱导ADSCs后可抑制ADSCs的增殖能力。DFCCM诱导7d后,ADSCs细胞浆内表达OCN及CAP。同时DFCCM诱导ADSCs后CAP,CP23,ALP及OCN mRNA表达水平显著高于对照组。结论:牙囊细胞条件培养液构建的微环境可使ADSCs向成牙骨质样细胞分化,为干细胞介导的牙骨质再生提供新的思路。