骺板软骨细胞复合三维支架体外构建组织工程软骨的研究

目的 探讨将骺板软骨细胞复合三维支架经体外培养 ,构建组织工程软骨的效果及其生物学特点。 方法 将 3周龄幼兔第 1代骺板软骨细胞与液态的生物凝胶混合 ,接种于聚磷酸钙纤维 /L -聚乳酸 (CPPF/PL L A)三维支架材料 ,构建组织工程软骨组织块 ,连续培养 4周。行大体、倒置显微镜及组织学、 型和 型胶原免疫组织化学光镜观察 ,定量检测硫酸糖胺多糖 (GAG)含量。 结果 构建的组织工程软骨块在培养过程中能保持其初始外形 ,种子细胞呈稳定的三维均相分布 ,外观逐渐呈乳白色、半透明 ,硬度亦不断增加。培养 1周有软骨细胞陷窝形成 ,2周后形成富含 型胶原和蛋白聚糖、具有典型软骨组织结构的工程化软骨 ,且 型胶原逐渐转为阴性。 4周时构建软骨的组织结构与天然骺板软骨相类似 ,硫酸 GAG含量平均为天然骺板软骨的 34%以上。 结论 骺板软骨细胞复合三维支架体外培养可生成典型软骨 ,且可形成类似天然骺板软骨的组织结构 ,能满足修复骺板缺损的基本要求。体外培养 1～ 2周可能是植入体内修复骺板缺损的较佳时机。