异体角质形成细胞免疫原性的初步研究

目的观察组织工程皮肤的种子细胞角质形成细胞体外培养后的免疫原性变化情况。方法取自愿捐献的健康儿童、青少年包皮,采用分离酶、胰蛋白酶两步消化法进行体外培养并传代至5代,行苔盼蓝计数细胞活性。SP法标记各代角质形成细胞中的朗格汉斯细胞和黑色素细胞,计算其占总细胞数的百分比。各代角质形成细胞与从外周血中分离培养淋巴细胞进行混合培养,观察淋巴细胞增殖情况,闪烁仪计数cpm值。结果培养的细胞生长良好,原代及传代后的细胞融合后呈铺路石样生长。细胞冻存后复苏,苔盼蓝染色细胞活力>80%。原代中朗格汉斯细胞占5.8%,黑色素细胞占8.1%;1代中朗格汉斯细胞占2.1%,黑色素细胞占2.8%;2代后二者均消失。cpm值原代482.13±46.61,1代362.50±35.12,2代228.38±51.46,3代171.86±34.63,4代143.63±15.95,5代123.25±14.39,与对照组53.67±8.61比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。原代、1代与其他各代比较,2代与4、5代比较,差异均有统计学意义(P<0.05);2代与3代间,3、4代及5代间,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论异体角质形成细胞经体外培养后不断传代,细胞免疫原性逐渐下降。