RNAi作用机制研究进展及其应用

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(posttranscriptionalgenesilencing,PTGS)[1]。RNA干扰可以简单、有效、特异地下调细胞中基因的表达,它不但是研究基因功能的一种有力工具,而且为特异性基因治疗提供了新的技术手段。本文介绍了目前RNA干扰作用机制,与之相关的酶、蛋白、“扳机点”和调节因子,及RNA干扰在生物学方面的应用。

C反应蛋白对合并^(60)Coγ射线放射损伤家兔创面的影响

目的观察纯化的人C反应蛋白(C-reactive prote in,CRP)对合并放射损伤家兔创面的影响。方法亲和层析法纯化CRP,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向免疫扩散法鉴定CRP纯度和抗原特异性。家兔接受5Gyγ射线照射后,背部切出4个直径为2 cm的圆形创面,随机选择创面给予生理盐水或CRP(每个创面5、50、500μg),连续5 d。伤后3、7、14及21 d测定创面愈合率、创面组织蛋白和羟脯氨酸含量。结果分离纯化的CRP纯度为92%,抗原特异性好。伤口局部使用CRP未显著加快放、创复合伤创面愈合速度,但50、500μg/每个创面的CRP治疗组伤后7 d创面组织蛋白和羟脯氨酸含量明显高于对照组(P<0.05)。结论本研究表明CRP提高放、创复合伤创面愈合早期的愈合质量。

p38对骨髓间充质干细胞成肌分化作用的研究

目的以5氮杂胞苷(5AzaCR)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)成肌分化,探讨生肌调控因子中Myf5的表达及信号转导通路p38在此分化过程中的作用。方法分离、纯化MSCs,以10μmol/L5AzaCR诱导其向成肌细胞分化,RTPCR测定Myf5的表达,免疫组化检测肌球蛋白(myosin)的表达,Westernblot检测p38信号通路特异抑制剂SB203580作用前后磷酸化p38的变化。结果SB203580作用后,Myf5表达由6h延迟至9h,诱导12d部分MSCs表达myosin,18d表达的数量及程度明显增加;5AzaCR诱导后,磷酸化p38蛋白水平较作用前增强,但在SB203580抑制后明显受抑。结论5AzaCR诱导后,MSCs表达生肌调控因子并向成肌细胞分化,p38在此分化过程中起着正向信号转导作用。

烧伤后小鼠类固醇受体辅活化子的表达变化

目的 观察小鼠烧伤后早期类固醇受体辅活化子（SRC）蛋白表达的时相变化，初步探讨烧伤早期糖皮质激素抵抗的分子机制。方法 将30只健康C57／129雄性小鼠随机分为正常对照组与烧伤组，烧伤组给予背部TBSA15％～20％Ⅲ°烧伤。分别于伤后1、6、12、24小时采用Westernblot测定肝、脾组织SRC家族（SRC-1、GRIP-1、NC0A-3）蛋白表达水平的变化。结果 烧伤组肝组织SRC-1蛋白表达水平在烧伤后l小时即显著降低，6小时降至最低，以后逐渐恢复，至24小时与正常对照组相比无显著差异；正常脾组织SRC-1蛋白表达水平较低，测定结果无统计学意义。烧伤组肝组织GRIP-1、NC0A-3蛋白表达水平在烧伤后显著升高，12小时达到高峰，24小时仍显著高于正常对照组；烧伤组脾组织GRIP-1、NC0A-3在烧伤后1小时显著升高，GRIP-1在烧伤后6小时达到高峰，24小时与正常对照相比差异不显著；而NC0A-3在烧伤后12小时达到高峰，24小时显著高于正常对照组。结论 小鼠烧伤后早期SRC-1显著降低，GRIP-1、NC0A-3显著升高，烧伤后糖皮质激素抵抗的发生发展可能与SRC家族成员表达变化有关。

安定-氯胺酮麻醉对严重烧伤小鼠肺组织糖皮质激素受体表达的影响

目的观察严重烧伤早期小鼠肺组织糖皮质激素受体（GR）表达的变化，并探讨安定-氯胺酮麻醉对其表达变化的影响。方法70只成年健康昆明小鼠，随机分为健康对照组、烧伤组、烧伤后麻醉组，20％～30％体表总面积Ⅲ度烧伤作为烧伤模型，烧伤后麻醉组在小鼠严重烧伤后立即肌肉注射安定0．4mg／kg、氯胺酮10mg／kg进行麻醉。应用Western blot技术检911各组小鼠肺组织GR蛋白表达水平。结果在严重烧伤后30min，小鼠肺组织中GR蛋白表达水平就已经开始降低，12h后逐渐恢复至正常水平。而烧伤后应用安定-氯胺酮麻醉，小鼠肺组织GR蛋白表达水平均无明显变化。结论严重烧伤可引起小鼠肺组织GR表达水平的早期下降，而严重烧伤后应用安定氯胺酮麻醉能显著抑制GR表达水平下调，结果提示安定氯胺酮麻醉可能部分改善严重烧伤诱发的应激状态．这可能与抑制GR表达水平下调有关。

骨折损伤后不同时相骨髓间充质干细胞表面生长因子受体表达的变化

目的:观察骨折损伤后不同时相骨髓间充质干细胞表面生长因子受体表达的变化,分析其对骨折损伤后组织修复的作用。方法:实验于2002-02/11在解放军第三军医大学预防医学院复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。①建立成兔桡骨骨折模型。②创前(0d)及创后1,5,10,15,20d分别采取骨髓有核细胞,纯化间充质干细胞。③成骨分化培养基诱导培养间充质干细胞。④通过Western-blot法检测碱性成纤维细胞因子受体Bek及骨形态发生蛋白受体-Ⅱ在间充质干细胞上的表达。结果:①碱性成纤维细胞因子受体Bek表达:创后1d,碱性成纤维细胞因子受体Bek表达与0d比较无明显差别(P>0.05);创后5d,Bek表达与0d相比显著增高(P<0.05);创后10d与5d比较无明显差别(P>0.05),但与0d相比,其表达显著增高(P<0.05);创后15d,20d的Bek表达较0,5d及10d均明显增高(P<0.01)。②骨形态发生蛋白受体-Ⅱ表达:创后1d,5d,骨形态发生蛋白受体-Ⅱ表达与0d比较无明显差别(P>0.05);创后10d,15d其表达与0d比较显著增高(P<0.05);创后20d其表达与0,1,5,10,15d相比,明显增高(P<0.01)。结论:创伤后体内骨髓间充质干细胞成骨分化过程中其碱性成纤维细胞因子受体Bek及骨形态发生蛋白受体-Ⅱ的表达逐渐增高。

肌损伤浸液对骨髓间充质干细胞增殖及其成肌诱导作用(英文)

背景:骨髓间充质干细胞具有可诱导分化为成骨细胞及成软骨细胞,利用DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷可诱导间充质干细胞表达生肌调控因子中的Myf5及生肌素,可以使间充质干细胞定向分化为成肌细胞。目的:通过筛选蛋白含量最高时相的肌损伤浸液作用于骨髓间充质干细胞,探讨肌损伤浸液对间充质干细胞增殖及成肌诱导作用。设计:标准对照实验。单位:解放军第三军医大学预防医学院复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室。材料:Balb/C纯系小鼠18只造成肌肉组织的创伤模型,用于肌损伤浸液的提取,同时以5-氮杂胞苷诱导的间充质干细胞成肌组进行对照。方法:实验于2001-04/2003-09在第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所,创伤、烧伤及复合伤国家重点实验室进行。Bradford比色法检测不同时相肌浸液蛋白含量,筛选蛋白含量最高时相的肌损伤浸液作用于骨髓间充质干细胞,于0,3,6,9,12,15d采用四甲基偶氮唑盐法检测伤浸液对间充质干细胞增殖的影响,与未加浸液的间充质干细胞作对照。采用反转录聚合酶链反应法检测其作用后6d生肌素的表达,并与用5-氮杂胞苷诱导的间充质干细胞成肌分化进行对照。主要观察指标:Balb/c小鼠①肌损伤浸液蛋白含量测定。②肌损伤浸液对间充质干细胞增殖的影响。③以生肌素的表达观察肌损伤浸液对间充质干细胞的成肌诱导作用。结果:①肌损伤浸液蛋白含量分析:以损伤后12h为最高。②肌损伤浸液对间充质干细胞增殖的影响:伤浸液作用组间充质干细胞的增殖活力在各时相均明显高于对照组。③肌损伤浸液对间充质干细胞的成肌诱导作用:伤浸液作用组无生肌素的表达,5-氮杂胞苷作用组有较强的生肌素表达。结论:肌损伤浸液可促进间充质干细胞的增殖,但对间充质干细胞无成肌诱导分化作用。

CXCR4基因转染促进移植dMSCs向放创复合伤大鼠创面分布的研究

目的探讨CXCR4腺病毒表达载体（Adv—CXCR4）转染的真皮多能干细胞（dMSCs）移植后可否更多地向放创复合伤大鼠创面分布，并加速创面愈合。方法3H—TdR标记Adv—CXCR4转染的dMSCs（A组）、绿色荧光蛋白腺病毒表达载体转染的dMSCs（B组）、未转染病毒载体的dMSCs（C组）后移植到放创复合伤大鼠体内，液闪法测量创面中dMSCs的含量。用生物医学图像分析仪测量伤后创面残留面积。结果从伤后5d起，A组创面中dMSCs的含量约占移植细胞总量的1．95％～3．85％，明显高于B组和C组（占移植细胞总量的1．07％～1．86％）。从伤后12d开始，A组创面残留面积明显小于B组和C组。A组创面愈合时间比B组和C组提前约1．5d。结论Adv—CXCR4转染的dMSCs在移植后可更多地分布到放创复合伤大鼠的创面，且能更快地促进创面愈合。

放创复合伤大鼠伤口液对真皮多能干细胞的趋化作用

目的观察放创复合伤大鼠伤口液对真皮多能干细胞(dMSCs)的趋化作用以及dMSCs对创面愈合的作用。方法采用Transwell培养体系,观察伤口提取液对dMSCs的趋化作用。用3HTdR标记dMSCs,经尾静脉输入大鼠体内,液闪法测量各组织内dMSCs的含量。用生物医学图像分析仪测量伤后创面残留面积。结果在伤口液的作用下,复合伤组Transwell培养小室内上层细胞迁移到下层的明显多于正常组织液组和生理盐水组(P<001)。伤后1周,复合伤组创面皮肤dMSCs含量明显高于正常对照组(P<001);伤后3和4周,复合伤组单位重量创面组织dMSCs含量明显高于同组的肺脏、肝脏等组织。伤后15d开始,dMSCs输注组创面残留面积明显小于复合伤对照组(P<005)。结论放创复合伤大鼠伤口提取液对dMSCs有很强的趋化作用,进而促进静脉输注的dMSCs偏向分布于创面,并促进其愈合。

类固醇受体辅活化子-3基因敲除对炎症反应中糖皮质激素受体的影响

目的观察类固醇受体辅活化子(SRC)-3基因敲除对脂多糖(LPS)诱导的糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平及核转位的影响。方法健康清洁SRC-3+/+小鼠、SRC-3-/-小鼠各20只,雌性,体质量约20g,分为SRC-3+/+组和SRC-3-/-组,每组设正常(N)、1h、4h、12h四个时相点,每个时相点各5只小鼠。采用Westernblot测定肝、脾组织GR及SRC-1、SRC-2的蛋白表达。结果无论是SRC-3+/+组还是SRC-3-/-组,LPS刺激引起肝组织GR蛋白表达及核转位显著降低,但SRC-3-/-组降低程度明显小于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组和SRC-3-/-组小鼠脾组织GR表达水平4h后开始下降,但SRC-3-/-组下降幅度显著低于SRC-3+/+组,GR核转位在SRC-3+/+组显著降低,而SRC-3-/-组则无显著变化。LPS刺激后SRC-3+/+组、SRC-3-/-组肝组织SRC-1均显著降低,但SRC-3-/-组变化程度均显著小于SRC-3+/+组;两组脾组织中未能明确检测到SRC-1蛋白表达。LPS刺激后两组小鼠肝组织SRC-2蛋白表达均显著增加,但在相应时相点SRC-3-/-组小鼠显著高于SRC-3+/+组;SRC-3+/+组小鼠脾组织SRC-2蛋白表达明显降低,而SRC-3-/-组却显著增加。结论炎症反应中GR蛋白表达及核转位显著降低,产生明显的糖皮质激素抵抗(GCR),SRC-3基因敲除后可缓解其程度。SRC-3基因敲除对炎症反应中肝、脾组织GCR程度的不同影响,可能与SRC家族成员的不同补偿效应有关。

类固醇受体辅活化子-3缺失对脂多糖诱导炎症反应的影响

目的观察类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白缺失对脂多糖（LPS）诱导炎症反应的影响。方法健康清洁野生型（SRC-3^＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3^-/-）小鼠各20只，雌性，体质量约20g，分为SRC-3^＋/＋组和SRC-3^-/-组，每组设正常（N）、1h、4h、12h四个时相点，每个时相点各5只小鼠。采用腹腔注射5mg／kg体质量LPS构建炎症反应动物模型，观察各时相点重要脏器的病理变化并测定血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10浓度。结果LPS腹腔注射后，SRC-3^-/-组小鼠全身情况好于SRC-3^＋/＋组小鼠，但两组的肝、脾、肾、心肌和胸腺病理均未见明显差别。LPS腹腔注射后两组血清TNF—α、IL-1β、IL-6和IL-10的水平均显著升高，但SRC-3^-/-组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著低于SRC-3^＋/＋组小鼠，IL—10水平却显著高于SRC-3^＋/＋组。结论SRC-3蛋白与致炎细胞因子的分泌和释放有关，SRC-3蛋白缺失可减轻炎症反应程度，抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6分泌和释放。

类固醇受体辅活化子-3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定

目的:繁殖并鉴定类固醇受体辅活化子(steroid receptor coactivator,SRC)-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠。方法:通过SRC-3-/-雄性小鼠与杂合子(SRC-3+/-)雌鼠杂交,繁殖出SRC-3+/-及SRC-3-/-两种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,并进一步提取肝、脾组织总蛋白,采用Western blot进行蛋白表型鉴定。结果:成功繁殖并准确鉴定出更多数目的SRC-3-/-小鼠。SRC-3+/+小鼠脾组织SRC-3蛋白表达水平显著高于肝组织,而SRC-3-/-小鼠的肝、脾组织均未见SRC-3蛋白表达。结论:雄性基因敲除小鼠与雌性杂合子杂交是获取大量SRC-3-/-小鼠的有效途径,PCR法是其子代简单准确的鉴定方法。

骨髓间充质干细胞成骨分化中转化生长因子受体的表达

背景:机体受创后尤其是骨折发生后,骨髓间充质干细胞将启动成骨分化,其表面多种生长因子如碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子、骨形态发生蛋白的受体表达将发生变化。目的:观察骨折损伤后不同时相骨髓间充质干细胞表面转化生长因子受体的表达变化。设计、时间及地点:对照观察实验,于2002-02/2003-11在解放军第三军医大学预防医学院复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。材料:选用健康成年兔,建立成兔桡骨骨折模型。方法:在造模当日及造模后1,5,10,15,20d抽取实验兔骨髓液,取骨髓有核细胞,纯化间充质干细胞,成骨分化培养基诱导培养。主要观察指标:通过Western-blot法检测转化生长因子β1,β2受体在间充质干细胞上的表达。结果:造模后1d转化生长因子β1受体表达与造模当日比较无明显差异(P>0.05);造模后5d,其表达显著高于造模当日(P<0.05);造模后10d与5d比较无明显差异(P>0.05),但显著高于造模当日(P<0.05);造模后15,20d的转化生长因子β1受体表达显著高于造模当日及造模后5,10d(P<0.01)。造模后1,5d转化生长因子β2受体表达与造模当日无明显差异(P>0.05);造模后10,15d,其表达显著高于造模当日(P<0.05);造模后20d转化生长因子β2受体的表达显著高于造模当日及造模1,5,10,15d(P<0.01)。结论:创伤后体内骨髓间充质干细胞成骨分化过程中转化生长因子β1,β2受体的表达呈现逐渐增高的趋势。

人FcεRI膜外区α蛋白的表达及其自身抗体的检测

利用昆虫细胞杆状病毒表达系统,成功表达了人FcεRI膜外区α蛋白;用该蛋白检测抗FcεRI自身抗体,结果显示慢性荨麻疹病例组与健康对照组差异不显著。

人羊膜负载猪骨髓间充质干细胞体外生长的形态特点(英文)

背景:人羊膜含胶原、糖蛋白、蛋白多糖、整合素和板层体等多种成分,表达多种生长因子及其mRNA的相关蛋白,能为细胞的增殖、分化提供丰富的营养成分,有利于细胞的生长繁殖,其能否负载培养猪骨髓间充质干细胞良好生长值得研究。目的:建立人羊膜负载培养猪骨髓间充质干细胞生长的组织工程方法,观察骨髓间充质干细胞生长增殖的形态特点。设计:随机对照观察。单位:创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室,解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所。材料:实验于2003-01/11在解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。选用3只出生二三个月的贵州小香猪,雌雄不拘,体质量6～8kg,由解放军第三军医大学实验动物中心提供。主要试剂:IMDM培养基(Hyclone,USA);优质胎牛血清PAA(Germany);Eosin B(Sigma,USA);OCT包埋剂(USA)。主要仪器:BX51立式荧光显微镜(Olympus,Japan);IX70型倒置荧光显微镜(Olympus,Japan);恒冷切片机(2700-Frigcut,德国);骨髓穿刺针(江苏);超净工作台(苏净集团安泰公司);CO2恒温培养箱(QUEUE,USA)。方法:按文献所述方法准备人羊膜,将按文献所述方法分离、培养的贵州小香猪骨髓间充质干细胞贵州小香猪的骨髓间充质干细胞原代培养、传代扩增后,以不同密度(0.84×105/cm2,1.54×105/cm2,2.75×105/cm2)接种于人羊膜基质面,倒置显微镜及扫描电镜下观察不同培养密度骨髓间充质干细胞的生长增殖变化情况;将第2、3代骨髓间充质干细胞以1.54×105/cm2的密度作为合适种植密度接种到由聚酯环支撑的人羊膜的基质面,最长培养至18d,逐日经卷膜、切片、苏木精-伊红染色光镜下观察人羊膜负载骨髓间充质干细胞生长情况,同时给予扫描及透射电镜。主要观察指标:不同培养密度及不同时间点骨髓间充质干细胞在人羊膜上的生长情况。结果:①不同种植密度人羊膜促进骨髓间充质干细胞生长比较:倒置显微镜下,以0.84×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,细胞排列不规则、稀疏,间距大;以1.54×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,细胞生长排列规则,密度适中,24h前细胞轮廓清楚,细胞活性好;以2.75×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,细胞拥挤生长,12h后不见细胞轮廓,多见非贴附细胞,随时间的推移,细胞老化快,细胞碎屑多见。扫描电镜下,以0.84×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,胞体肥大,呈不规则的长多边形扁平状,见粗细突起,细胞间距大;以1.54×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,细胞密度适中,胞体肥大,呈不规则的长多边形扁平状,粗细突起较多,突起相互连接交织。细胞边缘有重叠现象;以2.75×105/cm2细胞密度接种的骨髓间充质干细胞,细胞拥挤重叠生长,周围突起不明显,边缘卷折,细胞碎屑多见。②不同时间点人羊膜负载骨髓间充质干细胞生长情况:倒置显微镜下,骨髓间充质干细胞接种在人羊膜的基质面后很快贴附生长,30min内就可见到骨髓间充质干细胞在人羊膜基质面上的贴附生长象。24h后可见几乎全部骨髓间充质干细胞贴附生长,细胞活力好,折光度强,48h后融合为单层,第4￣18天可见骨髓间充质干细胞在人羊膜的基质面密集生长。苏木精-伊红染色可见骨髓间充质干细胞在人羊膜的基质面呈放射状、漩涡状或平行生长,胞体较大,呈梭形,胞核居中、深染、大而清晰,细胞形态较为一致;扫描电镜下,骨髓间充质干细胞在人羊膜的基质面生长4d,排列密度适中,胞体肥大呈不规则的长多边形扁平状,粗细突起丰富,部分突起相互连接交织成网,胞膜形成突起牢固粘附于人羊膜基质上;透射电镜下,骨髓间充质干细胞在人羊膜的基质面生长4d切面,骨髓间充质干细胞在人羊膜上大多呈双层生长,细胞呈纺锤状,胞核两端胞浆突起较长,互相重叠,染色质以常染色质为主,核仁明显,可见丰富细胞器,如粗面内质网,线粒体。结论:人羊膜对骨髓间充质干细胞有明显的促增殖作用,骨髓间充质干细胞可以人羊膜为载体在体外进行培养,人羊膜是骨髓间充质干细胞的良好载体。

氯胺酮调节炎症反应中类固醇受体辅活化子的表达

目的观察脂多糖(LPS)腹腔注射后类固醇受体辅活化子(SRC)家族蛋白表达的早期变化及氯胺酮的影响,探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法将15只健康C57/129雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+氯胺酮组,每组5只。LPS 5 mg/kg,腹腔注射；氯胺酮10 mg/kg,肌肉注射,LPS注射后15 min给予。LPS注射后4 h脱臼处死,取肝、脾、肺,采用Western blot测定SRC家族(SRC-1、GRIP-1、NCoA-3)在蛋白水平的变化。结果LPS组与正常对照组相比,肝组织SRC-1蛋向表达水平显著降低,GRIP-1、NCoA-3显著升高；肺组织SRC-1、NCoA -3显著增加,GRIP-1显著降低；脾组织GRIP-1显著降低,NCoA-3显著增加。LPS+氯胺酮组肝组织SRC-1显著高于LPS组,低于正常对照组,肺组织显著低于LPS组,与正常对照组相比明显升高；肝组织GRIP-1显著低于LPS组,高于正常对照组,而脾、肺组织显著增加,与正常对照组相比无显著差别；NCoA-3蛋白表达水平显著低于LPS组,脾、肺组织明显高于正常对照组,而肝组织相差不显著。结论LPS刺激下肝、脾、肺组织SRC家族成员的变化不同,氯胺酮可抑制LPS诱导的SRC表达变化,其对炎症反应的抑制可能是一种间接作用。

人小肠黏膜防御素5mRNA的表达特点及意义

目的 检测人小肠黏膜防御素 5基因 (Alphadefensin 5 ,DEFA5)的表达 ,为从分子水平上探讨小肠黏膜抗菌防御机制提供实验依据。方法 从 2例新鲜尸体和 2例右半结肠癌患者的回肠部位取小肠黏膜提取总RNA ,通过RT PCR扩增出DEFA5的两个外显子序列 ,比较其个体间的差异 ;沿小肠轴间隔 30cm取新鲜尸体小肠黏膜提取总RNA ,仍通过RT PCR扩增编码HD 5的阅读框序列 ,比较HD 5沿肠轴的表达趋势。结果 DEFA5在个体间的表达是一致的 ,通过RT PCR获得的外显子序列大小为 4 5 1bp ,且碱基序列与GenBank中的DEFA5标准序列相一致 ;通过PCR获得的编码HD 5的阅读框序列为 30 3bp ,其中 ,酶切位点 12bp ,保护性碱基 6bp ,终止子 3bp ,编码HD 5的序列 2 82bp(94AA) ;沿着空肠到回肠的肠轴方向 ,DEFA5在空回肠黏膜均有表达 ,至回肠末端最强 ,并有逐渐增强的趋势。结论 DEFA5基因的表达在个体间是保守的 ,而且沿着空肠到回肠的肠轴方向在mRNA水平的表达有逐渐增加的趋势 ,提示HD 5作为天然免疫物质在小肠黏膜屏障功能的维护中起着十分重要的作用。此外 ,本实验获得的HD 5阅读框序列为进一步重组表达HD 5奠定了基础。

基因治疗在慢性难愈创面的应用进展

众多疾病和创伤都会带来损伤创面的难愈问题,慢性难愈创面的长期存在不仅增加了局部感染的机会,而且大大影响了局部组织的结构和功能。基因治疗作为一种新的生物治疗方法,其相关理论和技术近来日臻完善,为慢性难愈创面的治疗提供了新的技术途径,有望带来突破性的治疗效果。