急性高原反应相关因素的多元线性回归分析

目的 建立急性高原反应（acute mountain sickness，AMS）相关因素的多元线性回归模型，以预测AMS的发生。方法 在平原，对进藏人员用V max229D型肺功能仪测试肺功能；定量饮水后不同时间点测定累计尿量进行饮水试验；吸入低氧气体（10％ O2，90％ N2）10min进行低氧反应试验。空运进藏后，对AMS进行症状学评分。用逐步回归分析法建立多元线性回归模型。结果经相关分析，初选出受试者胸廓体积、用力肺活量、1s用力呼气容积、最大呼气流量（peak expiratory flow，PEF）和饮水1000 ml后1．5h内尿量、2h内尿量、2．5h内尿量及低氧反应7min时的心率是与AMS相关的危险因素，进一步经逐步回归，消除自变量间的共线性后，筛选出4个重要指标，得多元线性回归方程为：AMS评分=16．108－0．00304×（饮水1000 ml后2．5h内尿量）－0．441×PEF－0．0487×（低氧反应7min时的心率）－0．240×胸廓体积。回归效果检验的F值=5．889（P〈0．01）。结论 肺功能、饮水1000 ml后1．5－2．5h排出的尿量、低氧反应7min时的心率及胸廓体积可作为预测AMS发生与否的重要参考指标。

久居高原青年官兵脑功能的变化特征及其相关因素研究

目的研究长期移居高原对脑功能的影响及其与移居高原时间、睡眠质量、脑组织氧供情况等因素的相关性。方法对平原青年男性官兵65例、移居4 500 m高原地区1～15年的青年男性官兵64例进行神经行为核心测试组合测试、瑞文标准推理测试和匹兹堡睡眠质量指数问卷调查,并进行血氧饱和度和左、右脑组织氧合指数的检测。结果久居高原者左、右脑组织氧合指数显著降低(P<0.01),并与血氧饱和度呈显著正相关(r=0.364,P<0.01)。长期高原移居者对颜色尤其是蓝色反应延迟(P<0.05),颜色辨别能力下降(P<0.01),短时视觉记忆能力降低(P<0.01),运动稳定性降低(P<0.05)等。久居高原者焦虑、抑郁、敌意、困惑等不良情绪状态增强(P<0.05),睡眠质量下降(P<0.01)。除匹兹堡睡眠质量指数与脑组织氧合指数有相关性(r=-0.287,P<0.05)外,久居高原者其他脑功能的变化与脑组织氧供状况无显著相关性(P>0.05)。认知功能中平均颜色反应时、本顿视觉保留测试得分两项指标与移居高原时间呈显著相关性(r=0.268,r=-0.277,P<0.05)。结论长期移居高原对视觉功能、运动稳定性、情绪和睡眠有显著负面影响,脑氧合指数和移居高原时间是脑功能降低的影响因素。

高原肺水肿动物模型的初步研究

目的通过模拟高原环境,研究大鼠在复合缺氧寒冷运动时诱发高原肺水肿（high altitude pulmonary edema, HAPE）的可能性.方法利用低压氧舱减压大鼠,观察大鼠在复合缺氧寒冷运动条件下的肺血流动力学、肺组织病理形态学改变.结果在模拟高原海拔4 000 m、白昼10 ℃、夜间4 ℃、适度运动条件下,PaO2、SaO2、PaCO2均显著降低,24、48、72 h之间无显著差异;肺动脉压在72 h时显著升高,这与临床观察到HAPE通常在进入高原2～5 d发病相符.病理切片结果：缺氧寒冷运动组70.2%可见肺间质增厚、肿大,大量多核细胞,肺泡腔变小,肺泡腔内无液体渗出,呈间质性肺水肿改变,未见肺泡型肺水肿发生.结论可采用该实验模型复制间质性HAPE动物模型,而肺泡型HAPE有待进一步研究.

模拟高原运动大鼠心肌重塑与肌球蛋白重链的适应性变化

目的观察缺氧及缺氧复合运动条件下大鼠心肌重塑与肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)异构体组成的变化。方法Wisatar大鼠随机分为4组平原对照组、缺氧组、平原运动组和缺氧复合运动组。缺氧复合运动组大鼠持续暴露于模拟海拔5000m高原5周,每天降至4000m高原进行游泳运动1h(6d/周),运动结束后回升至5000m;缺氧组大鼠同时在低压舱内相同海拔高度饲养,但不进行游泳运动;平原运动组和平原对照组在舱外同时饲养,其中平原运动组每天进行游泳运动1h(6d/周)。在末次运动结束后24h处死大鼠,分离左、右心室,称重并计算左、右心室重量指数。用含10%甘油的SDS-PAGE电泳分离左、右心室MHC异构体,观察心室肌MHC异构体组成变化。结果缺氧35d大鼠右心室重量指数增加,缺氧复合运动组大鼠左、右心室重量指数均增加。缺氧组右室MHC异构体组成比例与平原对照组相比无显著变化,平原运动组右室α-MHC异构体比例显著高于平原对照组,缺氧复合运动组右室α-MHC异构体比例显著高于平原对照组和缺氧组,低于平原运动组。左室MHC异构体组成比例变化趋势与右心室相似。结论缺氧复合运动条件下,心肌纤维MHC异构体由β-MHC向α-MHC转换,可能是缺氧条件下适度运动促进机体对高原习服适应的机制之一。

大鼠右心室血管紧张素转换酶2在高原低氧适应过程中表达的变化

目的研究低氧(2%O2)对成年雄性SD大鼠心脏右心室血管紧张素转换酶2(angiotensin conversion enzyme 2,ACE2)mRNA、蛋白水平表达的影响。方法在常氧与低氧环境(模拟海拔5000m高原、23h/d)下饲养SD大鼠,并随机分为缺氧1、3、30d组和常氧对照组,每组10只,分别在模拟海拔5000m高原低压舱内缺氧各组)和舱外(常氧对照组)测定肺动脉压、右心室功能、左右心室质量指数,采用RT-PCR、Western blot检测各组大鼠心脏右心室心肌ACE2mRNA、蛋白水平的表达变化。结果缺氧组大鼠肺动脉压、右心室收缩压显著高于对照组(P<0.01),缺氧30d组右心室明显肥大伴右心功能显著上调,同时右心室ACE2 mRNA、蛋白合成均有明显增加(P<0.01)。结论慢性低压低氧环境下SD大鼠心脏右心室心肌组织ACE2 mRNA表达、蛋白水平显著上调。

健康青年男性快速进入高原早期肺功能改变的观察

目的研究健康青年男性快速进入高原后早期肺功能及肺弥散能力的改变。方法对96名健康青年男性分别检测在海拔300 m和乘飞机快速进入海拔3 700 m后72 h的肺功能及肺弥散能力。结果快速进入高原后1 s用力呼气容积(forced exp iratory volum e in one second,FEV1.0)和FEV1.0/FVC无显著改变,用力肺活量(forced vital capac ity,FVC)和肺泡容积(alveolar ventilation,VA)显著低于对照组,肺-氧化碳弥散量(D lco)、肺-氧化碳弥散常数(d iffusion constant,D l-co/VA)以及最大呼气流量(peak exp iratory flow,PEF)则显著高于对照组。结论快速进入高原低氧环境后,肺功能的改变特别是肺泡弥散能力的增强使肺换气能力增加可能是造成急性低氧性缺氧时肺代偿的重要机制。

GABBR1基因G1465A多态与中国汉族青少年肌阵挛癫痫的关系

目的探讨γ-氨基丁酸B受体B1亚单位（gamma—aminobutyric acid B receptor 1，GABBR1）基因G1465A多态与中国汉族人青少年肌阵挛癫痫（juvenile myoclonic epilepsy，JME）的关系。方法柱层析法提取血细胞基因组DNA，应用PCR—RFLP检测105例青少年肌阵挛癫痫患者和100例中国汉族正常人GABBR1基因G1465A多态基因型。结果①A／A基因型频率在JME组（0．524）显著高于对照组（0．360）（P〈0．05）。②A等位基因频率在JME组（0．695）显著高于对照组（0．560）（P〈0．05）。③A等位基因频率患JME的相对风险度为1．792（95％CI：1．195～2．688）（P〈0．05）。结论GABBR1基因G1465A多态与中国汉族人群JME相关，A等位基因可能是JME的易感基因。

大肠杆菌双杂交系统筛选与AMPKα2相互作用的蛋白质

目的利用大肠杆菌双杂交系统筛选脑组织中与大鼠AMP激活的蛋白激酶α2(AMP-activated protein kinaseα2,AMPKα2)相互作用的蛋白质,以期进一步探讨AMPKα2在脑内的生物学功能及调节机制。方法以重组质粒pBT-AMPKα2作为诱饵,应用大肠杆菌双杂交系统筛选大鼠胎脑cDNA文库,并对结果进行生物信息学分析。结果筛选出与AMPKα2结合的蛋白7个,包括聚合泛素、热休克蛋白8(heat shock protein8,HSP8)、磷酸果糖激酶、细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COXⅠ)、人类白细胞抗原B关联性转录物3(HLA-B-associatedtranscript3,BAT3)异构体1、蛋白酪氨酸磷酸酶受体型D(protein tyrosine phosphatase receptor type D,Ptprd)、岛-脑蛋白1(islet-brain1,IB1)。结论寻找到了脑内与AMPKα2相互作用的7种蛋白:聚合泛素、HSP8、磷酸果糖激酶、COXⅠ、BAT3异构体1、Ptprd、IB1。

茶多酚预防缺氧大鼠红细胞增多症的实验研究

目的探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)对缺氧大鼠红细胞增多症的预防作用。方法雄性Wistar大鼠,分为平原组、慢性缺氧组、高剂量TP(20mg/kg)+慢性缺氧组、低剂量TP(10mg/kg)+慢性缺氧组。大鼠在5000m高原环境模拟舱中,间断缺氧(12h/d),每2天1次腹腔注射CoCl2溶液(5.5mg/kg)以建立红细胞增多症模型。经颈动脉插管取血,然后测定大鼠红细胞数、血红蛋白和红细胞压积,并进行血流变学及动脉血气分析。结果①红细胞增多症模型组大鼠的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积显著增加,全血黏度等血流变学指标显著上升;②与模型组相比,慢性缺氧大鼠的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积值均明显下降,且高剂量TP组较低剂量组显著,但仍高于平原组;同时TP可以改善缺氧大鼠血流变学指标,降低全血黏度及红细胞刚性指数等;但TP对缺氧大鼠的血氧饱和度等血气值没有影响。结论TP对缺氧大鼠红细胞增多症有一定预防作用,提示TP对高原红细胞增多症可能有类似作用。

线粒体DNA稳定性与疾病的关系

线粒体是真核细胞内进行氧化磷酸化和三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）合成的细胞器，为细胞活动提供能量，有“细胞动力工厂”之称。此外，线粒体还是细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）产生的主要场所，并能启动和执行细胞的凋亡。线粒体由核基因和线粒体基因组共同编码，其DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）和（或）核DNA（nuclear DNA，nDNA）的遗传缺陷均可引起线粒体功能障碍而导致疾病发生。

连二亚硫酸钠在建立培养细胞的无氧环境中的应用

目的 无氧环境是我们在用细胞进行研究的过程中经常会需要的。利用连二亚硫酸钠清除氧的能力 ,我们希望得到简便适用的方法制造培养细胞的无氧气、液相环境。方法 2mmol的连二亚硫酸钠可完全清除溶液里的氧气 ,我们用血气分析的方法检测连二亚硫酸钠溶液的性质 ,以及装有连二亚硫酸钠溶液的密闭容器内的气体成分的变化。结果 2mmol的连二亚硫酸钠溶液可保持无氧状态 1h左右 ,溶液的pH值并无变化。含 2mmol的连二亚硫酸钠的溶液可消耗密闭容器内的氧气 ,使容器内的氧含量接近与零。结论 连二亚硫酸钠可帮助我们得到简便使用的方法制造培养细胞的无氧气、液相环境。

低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响

目的:研究低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡和Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性成年Wistar大鼠随机分为4组:常氧对照组、低氧5 d组、低氧15 d组和低氧30 d组(各组n=6)。常氧对照组在平原喂养;低氧5 d组、15 d组和30 d组分别在低压舱内模拟5 000 m高原喂养5、15、30 d。采用流式细胞术和TUNEL法检测低氧对睾丸生殖细胞凋亡的影响。运用Western印迹技术检测低氧对大鼠睾丸内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果:低氧5 d组、15 d组和30 d组睾丸内发生生殖细胞凋亡的生精小管数量[每100个生精小管中,含有凋亡生殖细胞的生精小管数分别为(20.50±5.07)、(21.25±7.85)、(14.00±2.45)个]均非常显著地高于常氧对照组[(6.00±2.16)个,P<0.01]。凋亡的生殖细胞以精原和精母细胞为主。低氧15 d组睾丸组织亚单倍体细胞百分率[(2.18±0.82)%]显著高于常氧对照组[(1.30±0.33)%,P<0.05],低氧30 d组[(3.08±0.93)%]极显著高于常氧对照组(P<0.01)。低氧30 d组睾丸组织Bax表达显著高于常氧对照组(P<0.05),其灰度值分别为17.34±4.54和10.50±2.82。低氧30 d组睾丸组织Bax/Bcl-2比值显著高于常氧对照组(P<0.01),比值分别为0.40±0.10和0.27±0.04。结论:低氧诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡增多,慢性低氧引起的睾丸生殖细胞凋亡增多与Bax表达增加有关。

慢性缺氧对大鼠骨骼肌胰岛素受体的影响及其在增强葡萄糖摄取能力中的作用

目的 从组织胰岛素受体变化及其对组织葡萄糖摄取能力的影响方面探讨缺氧习服的机制。方法 将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,3 0d后取动脉血 ,测定血气、血浆胰岛素、血糖等 ,取双后肢骨骼肌测定在有或无胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率 ,通过Scatchard分析胰岛素受体结合位点密度数及其亲和力。以平原大鼠为对照。结果 缺氧组大鼠血糖、血胰岛素以及骨骼肌中胰岛素受体高、低亲和力两种结合位点的密度 ,均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。有或无胰岛素刺激时的葡萄糖摄取率及其增量值 ,在缺氧组均非常显著地高于对照组 (P <0 0 1)。胰岛素受体的解离常数在缺氧与对照组之间没有显著性差异。结论 经 3 0d低压缺氧后 ,大鼠骨骼肌胰岛素受体密度显著增加 ,对胰岛素反应能力增强 ,是组织葡萄糖摄取方面对胰岛素信号反应能力增强的机制之一。

缺氧复合运动大鼠心肌线粒体功能的变化

目的观察缺氧及缺氧复合运动条件下大鼠心肌线粒体功能的变化。方法将Wistar大鼠分为4组:平原对照组、缺氧组、平原运动组和缺氧复合运动组。缺氧复合运动组大鼠持续暴露于模拟海拔5 000 m高原5周,每天降至4 000 m的高原进行游泳运动1 h(6 d/周),运动结束后回升至5 000 m;缺氧组大鼠同时在低压舱内相同海拔高度饲养,但不进行游泳运动;平原运动组和平原对照组在舱外同时饲养,其中平原运动组每天进行游泳运动1 h(6 d/周)。在末次运动结束后24 h处死大鼠,分离心室肌提取线粒体。用clark氧电极法测定线粒体呼吸功能。结果与单纯缺氧组比较,缺氧复合运动后心肌线粒体ST3、ST4显著增加,呼吸控制率降低;各组线粒体膜电位无显著改变;与平原对照组比较缺氧组大鼠心肌线粒体ATP合成酶α亚基表达显著下降;与单纯缺氧组比较,缺氧复合运动组线粒体ATP合成酶α亚基表达显著增加。结论结果表明缺氧复合运动可改善心肌线粒体3态呼吸,ATP合成酶α亚基表达增加。提示缺氧复合运动后心肌ATP产生效率增加,有氧氧化代谢增强。

大鼠肾脏异丙酚代谢相关ugt1a6基因在无肝期表达变化的研究

目的研究无肝期前后与异丙酚代谢相关的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶ugt1a6在大鼠肾脏中的基因表达变化,初步阐释异丙酚无肝期肝外代谢特点形成的原因。方法15只雄性大鼠随机分为3组(5只/组),A组为对照组,B组阻断肝门30 m in,C组阻断肝门60 m in,截取各组大鼠肾脏组织,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测各组ugt1a6 mRNA的表达。结果大鼠肾脏组织ugt1a6的基因表达水平B、C组明显高于A组(P<0.05);B组与C组相比,无显著差异(P>0.05)。结论大鼠肾脏组织ugt1a6基因表达在无肝期比无肝期前增多,这可能是异丙酚无肝期肝外代谢增强的机制之一。

ATRA对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其机制研究

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其可能的分子机制。方法ATRA处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,Western blot检测CDK4、Rb、p-ERK1/2蛋白的表达,荧光定量PCR法检测CyclinD1mRNA水平。结果ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平的作用。结论ATRA可能通过下调A549细胞p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖。

低氧调节大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体非协同性表达

目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4,ST4)和呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR),用Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白的表达。结果慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体ST3和RCR显著低于对照组(P<0.05)。慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体复合体Ⅰ30×103亚基、复合体Ⅱ70×103亚基、复合体Ⅴα亚基蛋白表达量显著低对照组(P<0.05)。2组线粒体ST4和复合体Ⅲ核心亚基2蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。结论低氧可调节大鼠骨骼机线粒体复合体蛋白非协同性表达,导致线粒体氧化磷酸化功能下降。