线粒体单倍群M中mtDNA 5351G和6680C基因型与高原肺水肿易感性的关联

目的研究在汉族人群中,线粒体DNA(mtDNA)的单倍群M中mt5351G和mt6680C基因型与高原肺水肿(HAPE)易感的相关性。方法收集汉族HAPE患者标本206例,以及与其匹配的汉族健康对照标本144例。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法确定mtDNA的单倍群M和N,通过聚合酶链式反应-高温连接酶检测反应(PCR-LDR)的方法研究在mtDNA单倍群M中mt5351G、mt6680C基因型与HAPE易感的相关性。结果 mtDNA单倍群M和N在HAPE病例组的频率分别为49.0%和51.0%,在对照组中的频率分别为47.2%和52.8%,两组mtDNA单倍群M和N的频率无显著差异(P>0.05)。在mtDNA单倍群M中,mt5351G和mt6680C基因型在HAPE病例组频率显著高于其在对照组中的频率(均为12.0%比1.5%,P=0.016)。结论在单倍群M中mt5351G和mt 6680C基因型是汉族人群HAPE发病的危险因素,是汉族人群HAPE易感的遗传标记之一。

模拟高原缺氧大鼠骨髓细胞EPOR亲和力及数量的测定

目的:探讨促红细胞生成素受体(EPOR)在高原缺氧诱导的红细胞增多发生机制中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为常氧对照组和模拟高原缺氧5 d1、5 d、30 d组共4组。利用同位素技术观察骨髓细胞EPOR亲和力和数量的改变。结果:和对照组大鼠相比,缺氧5 d组大鼠骨髓细胞EPOR亲和力显著升高,而缺氧15 d组和30 d组大鼠的骨髓细胞EPOR亲和力反而是显著降低(P<0.01)。单个骨髓细胞表面EPOR的数量在整个缺氧过程中呈现显著增高,并且缺氧30 d组显著高于缺氧5 d组。结论;缺氧诱导的EPOR亲和力与数量的改变在缺氧早期红细胞增多过程中起重要作用。缺氧后期可能有其他因子参与红细胞增多的调节。

缺氧对人肺腺癌细胞浸润迁移能力及MMP-2、TIMP-2表达的影响

背景与目的已有的研究表明实体肿瘤组织内部存在一定程度缺氧,而栓塞缺氧治疗可抑制肿瘤细胞生长,但其中缺氧程度的把握是关键。本研究旨在探讨不同程度缺氧对人肺腺癌细胞浸润、迁移特性的影响及其机制。方法将人肺腺癌细胞株暴露于常氧(空气,5%CO2)、缺氧(1%O2,5%CO2,94%N2)或无氧(95%N2,5%CO2)环境48h后,分别用划痕法和羊膜-内皮细胞模型测定各组细胞的迁移和浸润能力。将处理的细胞接种于裸鼠皮下,观察其生长情况及转移特点。同时检测了细胞培养基中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)在不同程度缺氧后的水平。结果与常氧组相比,缺氧组细胞迁移、浸润能力显著增高(P<0.05)。缺氧组淋巴结转移率、肺转移率以及培养基中MMP-2水平均显著高于常氧组(P<0.05或P<0.01),TIMP-2显著低于常氧组(P<0.05)。无氧组成瘤率较常氧组显著降低(P<0.01),MMP-2、TIMP-2水平均显著低于常氧组(P<0.01)。结论适度缺氧可以刺激肺腺癌细胞分泌MMP-2并抑制TIMP-2表达,进而增强癌细胞迁移力、浸润力。但是严重缺氧可损伤癌细胞,癌细胞MMP-2、TIMP-2分泌下降,生长增殖能力、迁移力、浸润力下降。

二十八烷醇对缺氧大鼠保护作用的初步研究

目的观察二十八烷醇对缺氧大鼠的保护作用,评价其抗缺氧效果,为研发新型抗缺氧药物提供科学依据。方法清洁级雄性成年SD大鼠18只,随机分为平原对照组、缺氧对照组、缺氧给药组,每组各6只。缺氧给药组是在模拟高原环境下(海拔5000m)按5mg/kg剂量给予0.5%(m/v)二十八烷醇悬浊液灌胃,缺氧对照组为相同条件下给予等体积的1ml/kg食用调和油灌胃,平原对照组则在原(海拔300m)直接给予食用调和油灌胃,连续灌胃30d,1次/d。各组大鼠30d后取其心、脑组织于电镜下观察其病理变化。结果缺氧给药组大鼠心、脑组织水肿程度比缺氧对照组减轻,且脑组织比心脏组织效果明显。结论二十八烷醇可提高大鼠的缺氧耐受能力,对缺氧大鼠心脑组织细胞的结构有一定保护作用。

利用DNA shuffling技术鉴定草甘膦N-乙酰转移酶抗性相关位点

为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个单位点突变,3个双位点突变,1个3位点突变。其中,MTGAT3(H41Q)、MTGAT5(S52P)、MTGAT6(I53M)、MTGAT7(F56L)、MTGAT8(R82G)、MTGAT11(I19T/P22L)和MTGAT14(Y70H/L98P/K119E)7个突变体的草甘膦抗性几乎丧失。本工作为深入研究GAT1蛋白分子结构与功能之间的关系奠定了基础。