体外构建并评价组织工程化复合PLGA人工硬脊膜

目的体外构建并评价组织工程化复合聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)人工硬脊膜。方法此膜片设计为双层结构:内层(再生层)为有“取向性”PLGA纳米纤维膜(O-PLGA),接种成纤维细胞,以期使新生组织接近天然硬脊膜;外层(防粘连层)为无“取向性”PLGA-壳聚糖纳米纤维膜片(PLGA-CS),用以预防硬膜外粘连及瘢痕形成。采用静电纺丝法及壳聚糖溶液单面涂层制备。扫描电镜观察O-PLGA及PLGA-CS膜片的表观形貌,进行力学性能检测。分离、扩增培养及鉴定山羊皮肤成纤维细胞,并接种于O-PLGA纤维膜,接种后第1、3、5、7、10、14天扫描电镜观察细胞在生物材料上的附着、生长及分布情况。结果成功构建出O-PLGA及PLGA-CS 2种膜片,O-PLGA纤维丝呈“取向性”分布,弹性模量为(4.90±1.26)MPa;PLGA-CS纤维丝取向具有随机性,弹性模量为(2.88±1.83)MPa。接种后第5天,成纤维细胞与其分泌的胶原基质在O-PLGA膜表面融合成一层均匀致密的薄膜,且与PLGA纤维排列方向一致。此后新生薄膜逐渐增厚,但仍呈“取向性”分布。结论O-PLGA及PLGA-CS 2种膜片均具有良好的力学性能,O-PLGA可诱导成纤维细胞及其分泌的胶原基质呈“取向性”排列,种子细胞接种第5天为体内回植修复硬脊膜缺损的理想时间点。