应用套式聚合酶链反应检测母婴垂直感染乙型肝炎的研究

目的：为准确、迅速诊断乙型肝炎，本研究在１１３例母婴血清标本中建立套式ＰＣＲ检测技术并与ＰＣＲ方法进行比较。方法：应用套式聚合酶链（ＰＣＲ）法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ１１３例。结果：１１３例孕妇，第一对引物ＰＣＲ扩增１０１例阳性，第二对引物ＰＣＲ扩增９７例阳性。７７例为乙肝的婴儿，第一对引物ＰＣＲ扩增６９例阳性，第二对引物ＰＣＲ扩增６５例阳性。二对引物经套式ＰＣＲ，孕妇又有１２例阳性，其中阳性率提高８．８５％，婴儿有８例阳性，阳性率提高７．８％。结论：套式ＰＣＲ比ＰＣＲ方法更快、更敏感、更特异、更简便。

^(103)pd诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡及对相关基因的影响

目的:探讨γ射线对胱冬肽酶-3(caspase-3),Fas和bcl-2基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中的活性影响及意义. 方法:犬12只随机分2组,每组6只;建立胆管损伤后狭窄模型,在犬胆管内分别植入103pd(103钯)放射性支架和普通胆管支架,采用HE,TUNEL,RT—PCR, 免疫组化检测增殖内膜中胆管平滑肌细胞增殖、凋亡及相关caspase-3,bcl-2和Fas基因表达,在JEM- 1200EX电镜下观察凋亡细胞超微结构变化,并用计算机图像检测系统检2组胆管腔面积. 结果:103pd支架组犬胆管组织中caspase-3和Fas基因表达较普通支架组明显(0.44±0.09 vs 0.16±0.02, 83.33% vs 50.00%,P<0.05),出现明显增殖平滑肌细胞凋亡(87.90±7.96 vs 5.60±0.51,P<0.05)。肝外胆管无明显狭窄;而普通支架caspase-3和Fas基因低表达,胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡,而肝外胆管有明显狭窄.103pd支架组犬胆管组织中bcl-2基因表达较普通支架组弱(16.66%vs 83.33%,P<0.05), 且bcl-2基因低表达组犬胆管出现明显增殖平滑肌细胞凋亡,而且犬肝外胆管无明显狭窄;bcl-2基因高表达组犬胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡,而肝外胆管有明显狭窄. 结论:103pd放射性支架可以激活caspase-3和Fas基因, 促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡;bcl-2基因表达水平与细胞对辐射的敏感性有关,103pd放射性支架通过降低bcl-2基因表达,促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡,从而抑制犬肝外胆管狭窄.

^(103)钯支架诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡与防治胆管狭窄关系研究

目的探讨103钯(103Pd)放射性支架诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡与防治犬胆管损伤后胆管狭窄的关系。方法将12只犬随机均分为103Pd支架组和普通支架组,然后将103Pd放射性支架和普通支架分别植入2组犬的肝外胆管内,30d处死全部动物,取出胆管标本,用凝胶电泳和免疫组化染色进行凋亡细胞检测,并用计算机图像检测系统检侧两组胆管腔面积。结果103Pd支架组犬胆管组织中出现明显增殖平滑肌细胞凋亡,而且犬肝外胆管无明显狭窄;普通支架组犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡不明显,而且犬肝外胆管有明显狭窄。结论103Pd放射性支架通过促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡,从而抑制犬肝外胆管损伤后的胆管狭窄。

电离辐射诱导犬胆管成纤维细胞凋亡及防治胆管损伤后瘢痕增生的研究

目的探讨电离辐射诱导犬胆管成纤维细胞凋亡及防治胆管损伤后狭窄关系。方法将103Pd放射性支架,放射性活度为125×104kBq,和普通支架分别植入犬肝外胆管内,取出胆管标本,用DNA凝胶电泳检测成纤维细胞凋亡和透射电镜观察凋亡细胞形态和DNA的变化;并用计算机图像检测系统检测两组胆管腔面积。结果103Pd放射性支架明显抑制犬胆管组织中增生性瘢痕成纤维细胞生长,并出现典型的细胞凋亡特征,即出现凋亡小体、DNA梯状条带等。而且,103Pd放射性支架犬肝外胆管无明显狭窄,普通支架组犬胆管未出现成纤维细胞凋亡,胆管有明显狭窄。结论103Pd放射性支架诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡是防治胆管损伤后由于增生瘢痕导致胆管狭窄的重要机理之一。