人巨细胞病毒宫内感染产前诊断方法的研究

目的:探索人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染产前诊断的最佳方法。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、巢式PCR(N-PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)对比分析武汉、上海和沈阳3地3908例孕妇HCMV感染状况及其对妊娠结局的影响。结果:孕妇HCMV IgM检出率为6.24%,与HCMV DNA和晚期mRNA的检测符合率分别为59.03%和56.49%。活动性感染孕妇的宫内传播率(41.58%)明显高于对照组(15.87%)。HCMV晚期mRNA阳性的宫内感染儿流产、早产发生率明显升高。采集绒毛、羊水和脐血进行产前诊断的安全性良好。结论:在应用ELISA法进行初筛的基础上,联合应用N-PCR和RT-PCR技术检测HCMV DNA和晚期mRNA表达,是产前诊断HCMV宫内感染安全而可靠的方法之一。

人巨细胞病毒重组抗原在酶联免疫吸附试验中的应用研究

目的：探讨人巨细胞病毒重组抗原在ＥＬＩＳＡ中的应用。方法：采用基因工程方法组建含有巨细胞病毒ＰＰＵＬ３２及ＰＰＵＬ４４蛋白共三个强抗原决定簇基因的重组抗原克隆，以此重组抗原建立ＥＬＩＳＡ方法，用于１１７份待测血清巨细胞病毒ＩｇＭ抗体的检测，并将ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印方法进行了比较。结果：经统计学分析，建立的ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印检测方法的检测结果具有非常显著的一致性（χ２＝５４．０８，Ｐ＜０．０１）。与免疫转印方法比较，其敏感性和特异性分别为１００％和８１．３％；阳性预测率和阴性预测率分别为６０．５％和１００％，此ＥＬＩＳＡ方法具有良好的重复性。结论：此重组抗原具有良好的应用价值，可望替代ＨＣＭＶ感染ＥＬＩＳＡ诊断中的全病毒抗原。

新生儿肺炎病毒病原学研究

新生儿肺炎病毒病原学研究刘兰青，陈淑荣，刘庆，魏克伦，杨玉坤（第二临床学院病毒研究室）（第二临床学院小儿内科）关键词间接免疫荧光法；新生儿病毒性肺炎；ＩｇＭ抗体新生儿肺炎是新生儿时期常见病，死亡率较高。其主要病毒病原为呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）、腺病毒...

EB病毒对人T淋巴细胞感染的研究

为了确定ＣＲ２受体是否在ＥＢ病毒对Ｔ淋巴细胞的感染中起一定的作用，研究了ＣＲ２受体在Ｔ细胞的表达和ＥＢ病毒对Ｔ细胞的感染。从正常人外周血中分离的ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞其纯度达９８％以上。经逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双色荧光抗体染色并结合流式细胞分析仪分析的结果证明，在ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞检测不到ＣＲ２ｍＲＮＡ和细胞表面的ＣＲ２抗原。然而，在体外用ＥＢ病毒感染这些Ｔ细胞后，可以用ＰＣＲ方法检测到ＥＢ病毒特异性ＥＢＮＡ２ＡＤＮＡ序列和用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测到ＥＢ病毒ＢＲＬＦ１ｍＲＮＡ表达。结果提示，ＥＢ病毒可以通过一种不同于Ｂ细胞ＣＲ２受体的、尚未确定的ＥＢ病毒受体感染ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞。这一结果为进一步研究ＥＢ病毒感染与Ｔ细胞淋巴瘤的关系提供了新的直接的线索。

巨细胞病毒感染与肺癌的关系研究初探

用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测５０例肺癌患者，４２例肺非癌患者和９８例自然人群外周血单个核细胞中巨细胞病毒（ＣＭＶ）ＤＮＡ，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３１例肺癌患者，４２例肺非癌患者血清ＣＭＶＩｇＭ抗体。结果肺癌患者ＣＭＶＤＮＡ明显高于肺非癌患者和自然人群（Ｐ＜０．０５），肺非癌患者和自然人群无显著差异（Ｐ＞０．０５）。肺癌和肺非癌患者ＣＭＶＩｇＭ分别检出８例和２例，二者差异显著（Ｐ＜０．０５）。提示ＣＭＶ感染与肺癌具有统计学相关性。

产前诊断先天性人巨细胞病毒感染安全性和可靠性分析

目的:探究宫内取材进行先天性人巨细胞病毒(HCMV)感染产前诊断的安全性和可靠性。方法:联合应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、巢式PCR(N-PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)分析武汉、上海和沈阳三地6723例育龄妇女和孕妇HCMV感染状况及妊娠结局。结果:育龄妇女活动性HCMVIgM检出率为6·11%,其中孕妇和非孕妇间无显著性差异。活动性感染孕妇绒毛、脐血HCMV感染率分别为51·52%、66·18%,明显高于对照组。先天性感染儿发生异常妊娠结局的危险性明显高于非感染儿。宫内取材所致妊娠丢失率均无显著增加,其检查结果与出生后的诊断一致。结论:宫内采集绒毛、羊水、脐血进行产前诊断,安全性和可靠性良好,可为胎儿的取舍提供依据。

人巨细胞病毒PPUL44蛋白单克隆抗体CH13抗原决定簇位点的确定

目的 :确定人巨细胞病毒 PPU L44蛋白单克隆抗体 CH13在 PPU L44上的抗原决定簇位置 ,探讨随机多肽文库在研究相互作用蛋白质的氨基酸序列方面的应用。方法 :用 CH13在一个随机多肽文库中筛选出能与CH13结合的克隆 ,测定上述克隆随机多肽的 DNA序列 ,用随机多肽的氨基酸同源序列与 PPUL44蛋白质的氨基酸序列比较。结果 :能与 CH13结合的随机多肽的氨基酸序列显示出高度的一致性 ;随机多肽同源序列NEGEAFGPDVSG与 PPUL44蛋白位于第 32 1～ 332的氨基酸序列高度同源 ;而随机多肽序列 FQIL VCVESVL R与 PPU L44位于第 181～ 184的氨基酸序列有 4个相邻的氨基酸一致。结论 :CH13的抗原决定簇位于 PPU L44蛋白第 32 1～ 332氨基酸序列附近 ;CH13与 PPU L44位于第 181～ 184氨基酸序列可能有一定反应。随机多肽文库在研究相互作用蛋白质的氨基酸序列方面具有广泛的应用前景。

临产妇柯萨奇病毒B组感染的血清学调查

临产妇柯萨奇病毒Ｂ组感染的血清学调查吉耀华，刘庆，阮强，魏洪斌，吕绳敏，刘兰青（第二临床学院病毒研究室）王景银（第二临床学院妇产科）关键词产妇；柯萨奇病毒；血清学近年全国先后有北京、黄山和沈阳等地的几家医院发生柯萨奇病毒Ｂ组暴发流行，并导致新生儿死亡...

融合蛋白NrCAM-Fc的重组体的构建

目的 :构建神经原相关的细胞粘附分子 (NrCAM )和免疫球蛋白Fc片段融合基因的重组质粒并通过Baculovirus载体转染到昆虫细胞。方法 :利用RT PCR方法从神经母细胞瘤细胞系SK N SN获得NrCAM的信号肽区和跨膜区片段并直接克隆到 pGEMT载体 ,经多次酶切、连接、转化、筛选获得NrCAM Fc的重组融合基因 ,测序后将此基因通过Baculovirus载体转染至昆虫细胞。结果 :多种酶切和测序结果表明NrCAM Fc的序列与原序列符合率达 98%以上 ,NrCAM与Fc连接处序列保证了Fc的读码框架 (ORF)。结论 :Baculovirus载体转染效率高 。

孕妇TORCH感染的产前诊断

TORCH 感染是弓形虫病(TO)、风疹病毒(RV)、单纯疱疹病毒(HSV)和巨细胞病毒(CMV)四种感染的总称。孕妇有这四种感染时,病毒或寄生虫能通过胎盘传给胎儿,使胎儿有先天性感染而出现各种症状及畸形。这四种病原的先天性感染儿,其临床症状很相似,如黄疸、肝脾肿大、紫癜、小头畸形、脑积水、耳聋、脉络视网膜炎、白内障、智力低下、先天性心脏病、肺炎或其它畸形。我国人群中 CMV 感染很普遍,因此对胎儿的危害也最大。我国先天性 CMV 感染率为0.5～1.0%,

HCMV宫内感染对婴幼儿智力和听觉发育的影响

目的 探讨人巨细胞病毒宫内感染儿的脑发育状况、认知能力及听觉发育状况.方法 采用酶联免疫吸附试验法检测4 412例孕妇外周血中HCMV IgM,对HCMV IgM阳性孕妇进一步应用逆转录-聚合酶链反应检测胎儿附属物中人巨细胞病毒晚期mRNA,其中1项阳性者为宫内感染组（92例）,2项均为阴性者为对照组（88例）,联合应用头颅超声、Bayley婴幼儿发育量表、脑干听觉诱发电位检测人巨细胞病毒宫内感染儿出生时及婴幼儿期的听力、智力发育状况.结果 宫内感染儿在出生和出生3个月时头颅超声异常率皆高于对照组（P=0.011;P=0.032）;宫内感染儿出生后4个月脑干听觉诱发电位的异常率高于对照组（χ^2=12.515,P〈0.001）.宫内感染儿智力发育指数显著落后于对照组（t=4.637,P〈0.01）;应用韦氏学龄前及幼儿智力量表（WPPSI）追踪测试患儿,其智能迟缓率仍高达20.00%.结论 人巨细胞病毒宫内感染可引起婴幼儿神经系统病变、智力发育迟缓及听力障碍.

三城市孕妇人巨细胞病毒感染及其母婴传播的流行病学调查

目的：分析武汉、上海及沈阳三城市孕妇人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染及其母婴垂直传播状况。探讨早期诊断胎儿ＨＣＭＶ宫内感染的方法。方法：应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）筛查５０１５例孕妇ＨＣＭＶ的特异性抗体（ＩｇＧ及ＩｇＭ），同时应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测其中３０１例具有活动性ＨＣＭＶ感染者的胎儿附属物，新生儿血、尿及母乳的ＨＣＭＶＤＮＡ。结果：三城市孕妇ＨＣＭＶ感染率为８８．９３％；沈阳、上海分别为９６．７４％和９１．４２％，明显高于武汉（７９．５３％）；孕妇活动性感染率为５．４２％，武汉与沈阳分别为１１．２３％和１０．９８％，明显高于上海。有异常妊娠史孕妇的活动性感染率为１４．５９％；孕早期绒毛和孕中期羊水的ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率分别为１６．００％和３５．３３％；羊水的ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率与分娩期脐血、胎盘、新生儿血相比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：我国城市孕妇ＨＣＭＶ感染有地区差异，三城市孕妇多数于孕前早已感染ＨＣＭＶ；孕妇于活动性感染时易传播胎儿。

沈阳地区30例流行性感冒的病原学研究

目的确定１９９５年冬至１９９６年春沈阳地区发生的严重流行性感冒的病原。方法作者用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ），对门诊上呼吸道感染病人咽拭子标本进行了４８小时短期培养后流感病毒基因检测。结果甲型流感病毒阳性率为６０％，确定为甲型流感病毒引起的流感流行。此病毒为一种在鸡胚尿囊腔不生长，不凝集鸡红细胞的“Ｏ”相甲型流感病毒。结论ＲＴＰＣＲ法检测咽拭子中流感病毒基因，为特异、敏感、快速。

沈阳市妊娠晚期妇女柯萨奇病毒B组的流行情况调查

近年来，柯萨奇病毒Ｂ组在北京、沈阳等地先后发生多起暴发流行［１，２］，引起新生儿死亡。对柯萨奇病毒Ｂ组流行规律的研究和进行妊娠晚期妇女柯萨奇病毒Ｂ组流行情况监测，有助于指导临床及时采取消毒隔离措施，切断传染源，避免造成新生儿死亡。本研究用间接免疫荧光...

人巨细胞病毒PPUL44蛋白核定位信号结合多肽氨基酸序列分析

目的 寻找与人巨细胞病毒 (HCMV)PPUL44蛋白核定位信号 (NLS)具有较强结合能力的多肽 ,研究这些多肽的氨基酸序列特点。方法 采用合成的HCMVPPUL44NLSA和NLSB分别在一个随机多肽文库中筛选出与NLS具有结合能力的克隆 ,用四色荧光自动测序的方法测定上述克隆的DNA序列 ,对这些克隆的多肽氨基酸序列进行同源性比较 ,并与蛋白质文库中已知蛋白的氨基酸序列进行比较。结果 与HCMVPPUL44NLSA具有结合能力的多肽 (bNLSApep)的氨基酸序列与细胞输入蛋白Importinα亚单位的氨基酸具有较高的同源序列 ,其中bNLSApep48氨基酸序列AVVTPVLTEILK与lmportinα亚单位的Arm7区的第 18至 2 9氨基酸序列ANIFPVLTEILQ具有极高的相似性 ;bNLSBpep39氨基酸序列则与lmportinα亚单位的全部 8个Arm区的第 10至 2 1氨基酸的同源序列相似。结论 HCMVPPUL44NLSA可能是lmportinα亚单位针对HCMVPPUL44蛋白的特异性识别位点 ,与lmportinα亚单位Arm 7区结合 ;而HCMVPPUL44NLSB则为lmportinα亚单位的非特异性识别位点。

血清抗体测定在抗病毒免疫核糖核酸治疗病毒性肺炎中的意义

应用抗RSV-ADV-I-RNA治疗病毒性肺炎33例,治疗前、后血清特异性抗体水平明显增高,差异有显著意义。对照组治疗前、后无显著差异,提示,抗RSV-ADV-I-RNA可提高患儿自身抗病毒能力,为应用本药治疗病毒性肺炎取得较好疗效提供了理论依据。

母婴间病毒感染

许多病毒感染都可通过怀孕的母亲在宫内或分娩时传播给胎儿,称为母婴感染或垂直感染。母婴间病毒感染除 TORCH 感染,即弓形体(TO)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)和单纯疱疹病毒(HSV)以外。

一起新生儿病房柯萨奇B组病毒感染的血清学检查

1993年9月19日至10月18日,某医院发生一起新生儿集体感染,在接生的244名婴儿中,有49名发病,并有37名患儿陆续转到我院新生儿急救中心救治,先后共有15名重患因抢救无效死于 DIC 及多脏器功能衰竭。患儿主要临床表现为:发热、拒乳、黄疽以及心、肝、肾等多脏器受损。发病日龄为3～18天。大多数患儿在生后10日内发病。现将此次感染流行的病毒血清学检查报告如下。