gpc3/mxr7基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的 :通过原核表达并纯化GPC3蛋白 ,免疫家兔获得抗 -GPC3多克隆抗体 ,为深入研究 gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础。方法 :将 gpc3/mxr7基因片段亚克隆至 pPROEXTMHTb原核表达载体 ,采用融合 6 -his的融合蛋白方法原核表达GPC3蛋白质 ,纯化蛋白后免疫家兔 ,鉴定并纯化出抗 -GPC3多克隆抗体。结果 :原核诱导表达出GPC3蛋白 ,免疫家兔后获得多克隆抗体 ,经鉴定为抗一GPC3特异性多克隆抗体 ,并能识别原核、真核表达的外源性及HepG2和Hu -h7细胞内源性GPC3蛋白。结论 :GPC3蛋白多克隆抗体能特异识别GPC3蛋白 ,可应用于gpc3/mxr7基因的功能研究 ,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物。