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miR-21在肺癌血管生成中的作用及培美曲塞对其影响
被引量:
8
1
作者
印洁
李玉枫
+4 位作者
宋勇
姚鸣
高云
孙倍成
施毅
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012年第5期476-480,共5页
目的肺癌死亡率居肿瘤相关疾病死因的首位。肿瘤组织中血管异常增生,与肿瘤的分级、转移和预后不良密切相关。文中利用体内外血管生成模型评价肺癌细胞不同miR-21表达水平肺癌细胞在肿瘤血管生成中的作用及其可能机制,并探讨培美曲塞对...
目的肺癌死亡率居肿瘤相关疾病死因的首位。肿瘤组织中血管异常增生,与肿瘤的分级、转移和预后不良密切相关。文中利用体内外血管生成模型评价肺癌细胞不同miR-21表达水平肺癌细胞在肿瘤血管生成中的作用及其可能机制,并探讨培美曲塞对其影响。方法采用划痕实验研究不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清对血管内皮细胞增殖能力的影响。采用Luminex检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清中的表达水平。采用免疫组化法检测CD31(亦称血小板内皮细胞黏附分子-1)、血管内皮生长因子受体2(Vascularendothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)及磷酸化VEGFR2蛋白在不同miR-21表达水平肺癌实体瘤组织的表达水平差异。结果划痕实验表明,miR-21高表达的人肺癌A549(A549-21H)细胞划痕修复能力明显强于miR-21低表达的人肺癌A549(A549-21L)细胞,表现为划痕直径明显缩小。Luminex检测VEGF在不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清的表达水平,实验结果表明,A549-21H细胞培养上清中VEGF含量显著高于A549-21L。采用IHC法检测裸鼠肺癌移植瘤中CD31、VEGFR2及磷酸化VEGFR2蛋白表达变化研究结果表明,A549-21H瘤体CD31表达明显高于A549-21L(P<0.01),A549-21H瘤体VEGFR2表达与A549-21L比较无显著性差异,A549-21H瘤体Tyr951磷酸化VEGFR2表达明显高于A549-21L(P<0.01)。结论 miR-21可能通过调节VEGF表达水平及VEGFR2磷酸化水平参与肿瘤血管生成的调控,培美曲塞对肿瘤血管生成具有一定的抑制作用。
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关键词
MIR-21
非小细胞肺癌
血管生成
血管内皮生长因子
培美曲塞
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职称材料
支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性观察
被引量:
7
2
作者
辛晓峰
修清玉
+4 位作者
赵明
李子玲
宋勇
施毅
毛广平
《医学研究生学报》
CAS
2006年第7期616-619,共4页
目的:观察缓解期哮喘和稳定期中、重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性。方法:吸入沙丁胺醇200μg后10m in吸入3%的高渗盐水诱导痰。观察16例哮喘患者、14例COPD患者和11例健康对照者诱导痰前、后肺功能...
目的:观察缓解期哮喘和稳定期中、重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性。方法:吸入沙丁胺醇200μg后10m in吸入3%的高渗盐水诱导痰。观察16例哮喘患者、14例COPD患者和11例健康对照者诱导痰前、后肺功能、心率(HR)、呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SaO2)和不良反应,做诱导痰炎性细胞分类计数。夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)测定诱导痰上清液中白细胞介素-5(IL-5)的含量。结果:哮喘和COPD患者诱导痰前后肺功能、HR、RR和SaO2均无显著变化(P>0.05)。哮喘组患者诱导痰中嗜酸性粒细胞数(16.3±7.2)%显著高于对照组(0.7±0.6)%和COPD组(6.5±5.4)%(P<0.05),而COPD组患者诱导痰中中性粒细胞数(59.4±10.6)%显著高于对照组(25.1±6.1)%和哮喘组(28.7±7.3)%(P<0.05)。哮喘组诱导痰中IL-5水平(53.3±24.2)ng/L显著高于对照组(20.2±4.1)ng/L和COPD组(29.8±4.7)ng/L(P<0.05)。COPD组患者中性粒细胞数的百分比与基础第1秒用力肺活量(FEV1)间呈负相关(r=-0.58,P<0.05)。哮喘组和COPD组不良反应发生率分别为31.25%和42.86%,但轻微且均能耐受。结论:缓解期哮喘和稳定期中、重度COPD患者吸入高渗盐水进行痰的诱导是安全的。诱导痰的分析能反映哮喘和COPD的气道炎症特征。
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关键词
哮喘
慢性阻塞性肺疾病
高渗盐水
诱导痰
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职称材料
人肺腺癌细胞基因表型与尼妥珠单抗疗效的关系
被引量:
8
3
作者
宋海珠
易俊
+1 位作者
黄桂春
施毅
《医学研究生学报》
CAS
2011年第2期148-153,共6页
目的分子靶向治疗是目前肺腺癌治疗的热点,靶向于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单抗可提高化疗效果,但肺癌基因表型与疗效的关系尚不明确。文中研究尼妥珠单抗联合化疗的疗效与人肺腺癌细胞表面EGFR表达强...
目的分子靶向治疗是目前肺腺癌治疗的热点,靶向于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单抗可提高化疗效果,但肺癌基因表型与疗效的关系尚不明确。文中研究尼妥珠单抗联合化疗的疗效与人肺腺癌细胞表面EGFR表达强度,以及EGFR、KRAS和PI3KCA基因突变的关系。方法免疫组化法测定A549、SPC-A1和SPC-A1/DTX肺腺癌细胞表面EGFR的表达强度,突变富集-液相芯片法及测序法检测3种细胞EGFR、KRAS和PI3KCA基因的突变情况,绘制细胞生长曲线测定细胞倍增时间。流式细胞仪检测尼妥珠单抗对细胞周期的影响,MTT法检测尼妥珠单抗联合补体依存性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)作用,与顺铂/多西紫杉醇的联合指数(combination index,CI)。结果 EGFR表达强度:A549(-),SPC-A1(+),SPC-A1/DTX(3+);基因突变:A549的KRAS基因13号密码子和PI3KCA基因的外显子9及20位点突变,SPC-A1/DTX的PI3KCA基因外显子20突变,其余均无突变;SPC-A1/DTX倍增时间最长,为(35.0±2.1)h。尼妥珠单抗(10μg/ml)作用24 h后,进入G0/G1期细胞均增多,但SPC-A1细胞(P=0.018)和SPC-A1/DTX细胞(P=0.0002)差异有统计学意义,A549细胞差异无统计学意义(P=0.24)。低剂量尼妥珠单抗(10μg/ml)联合补体的CDC效应与细胞表面EGFR的表达强度和作用时间呈正相关。尼妥珠单抗(100μg/ml)与顺铂或多西紫杉醇联合时,A549细胞均为相加作用,SPC-A1均为协同作用,SPC-A1/DTX中,多西紫杉醇与尼妥珠单抗为协同作用(CI=0.40),而顺铂与尼妥珠单抗为相加作用(CI=0.93)。结论尼妥珠单抗单药对于EGFR表达阴性,KRAS和PI3KCA基因突变的A549细胞无明显细胞毒性作用和CDC作用,与化疗无协同作用。尼妥珠单抗单药作用于EGFR表达阳性的细胞有G0/G1期阻滞效应和CDC效应,EGFR表达强度越大,化疗增敏作用越强,而与PI3KCA基因突变的影响不显著。
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关键词
肺腺癌
尼妥珠单抗
表皮生长因子受体
化疗
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职称材料
烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化
4
作者
申玉英
徐小勇
+2 位作者
张鹏鹏
张峰
施毅
《医学研究生学报》
CAS
2010年第12期1249-1252,共4页
目的通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达组织因子(tissue factor,TF)的变化,以及用不同干预因素处理对HUVEC表达TF的影响,以探讨侵袭性肺...
目的通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达组织因子(tissue factor,TF)的变化,以及用不同干预因素处理对HUVEC表达TF的影响,以探讨侵袭性肺曲霉病(invansive pulmonary aspergillosis,IPA)血管侵袭的机制。方法实验分为6组,即对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、烟曲霉菌丝组、细胞松弛素D组、N-cadherin抗体组和地塞米松组,分别于0、2、6、12、18h获取细胞冻融液,采用ELISA法检测TF浓度。结果实验组2、6、12、18h TF表达量与0h比较均升高(P(0.05),而对照组则无明显变化;实验组TF表达量在2、6、12、18h高于对照组(P(0.05);TNF-α组的TF表达量在2、6、12h高于烟曲霉菌丝组(P(0.01);N-cadherin抗体组的TF表达量在2、6、12h低于烟曲霉菌丝组(P(0.05);细胞松弛素D组或地塞米松组的TF表达量在各时间点与烟曲霉菌丝组比较差异均无统计学意义。结论烟曲霉菌丝感染后,HUVEC过度表达TF,N-cadherin单克隆抗体可减少TF的表达,而细胞松弛素D或地塞米松对TF的表达无明显影响。
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关键词
烟曲霉
菌丝
内皮细胞
组织因子
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职称材料
题名
miR-21在肺癌血管生成中的作用及培美曲塞对其影响
被引量:
8
1
作者
印洁
李玉枫
宋勇
姚鸣
高云
孙倍成
施毅
机构
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)
呼吸
内科
南方医科
大学
研究生
学院
南京
医科
大学
第一附属
医院
肝移植中心
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012年第5期476-480,共5页
基金
江苏省自然科学基金(BK2011658)
文摘
目的肺癌死亡率居肿瘤相关疾病死因的首位。肿瘤组织中血管异常增生,与肿瘤的分级、转移和预后不良密切相关。文中利用体内外血管生成模型评价肺癌细胞不同miR-21表达水平肺癌细胞在肿瘤血管生成中的作用及其可能机制,并探讨培美曲塞对其影响。方法采用划痕实验研究不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清对血管内皮细胞增殖能力的影响。采用Luminex检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清中的表达水平。采用免疫组化法检测CD31(亦称血小板内皮细胞黏附分子-1)、血管内皮生长因子受体2(Vascularendothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)及磷酸化VEGFR2蛋白在不同miR-21表达水平肺癌实体瘤组织的表达水平差异。结果划痕实验表明,miR-21高表达的人肺癌A549(A549-21H)细胞划痕修复能力明显强于miR-21低表达的人肺癌A549(A549-21L)细胞,表现为划痕直径明显缩小。Luminex检测VEGF在不同miR-21表达水平肺癌细胞培养上清的表达水平,实验结果表明,A549-21H细胞培养上清中VEGF含量显著高于A549-21L。采用IHC法检测裸鼠肺癌移植瘤中CD31、VEGFR2及磷酸化VEGFR2蛋白表达变化研究结果表明,A549-21H瘤体CD31表达明显高于A549-21L(P<0.01),A549-21H瘤体VEGFR2表达与A549-21L比较无显著性差异,A549-21H瘤体Tyr951磷酸化VEGFR2表达明显高于A549-21L(P<0.01)。结论 miR-21可能通过调节VEGF表达水平及VEGFR2磷酸化水平参与肿瘤血管生成的调控,培美曲塞对肿瘤血管生成具有一定的抑制作用。
关键词
MIR-21
非小细胞肺癌
血管生成
血管内皮生长因子
培美曲塞
Keywords
miR-21
Non-small cell lung cancer
Angiogenesis
Vascular endothelial growth factor
Pemetrexed
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性观察
被引量:
7
2
作者
辛晓峰
修清玉
赵明
李子玲
宋勇
施毅
毛广平
机构
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)
呼吸
内科
第二军医大学
长征
医院
呼吸
内科
南京军区
南京
总
医院
博士后科研工作站
出处
《医学研究生学报》
CAS
2006年第7期616-619,共4页
基金
江苏省"六大人才高峰重点课题"基金资助项目(批准号:2005A6)
文摘
目的:观察缓解期哮喘和稳定期中、重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性。方法:吸入沙丁胺醇200μg后10m in吸入3%的高渗盐水诱导痰。观察16例哮喘患者、14例COPD患者和11例健康对照者诱导痰前、后肺功能、心率(HR)、呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SaO2)和不良反应,做诱导痰炎性细胞分类计数。夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)测定诱导痰上清液中白细胞介素-5(IL-5)的含量。结果:哮喘和COPD患者诱导痰前后肺功能、HR、RR和SaO2均无显著变化(P>0.05)。哮喘组患者诱导痰中嗜酸性粒细胞数(16.3±7.2)%显著高于对照组(0.7±0.6)%和COPD组(6.5±5.4)%(P<0.05),而COPD组患者诱导痰中中性粒细胞数(59.4±10.6)%显著高于对照组(25.1±6.1)%和哮喘组(28.7±7.3)%(P<0.05)。哮喘组诱导痰中IL-5水平(53.3±24.2)ng/L显著高于对照组(20.2±4.1)ng/L和COPD组(29.8±4.7)ng/L(P<0.05)。COPD组患者中性粒细胞数的百分比与基础第1秒用力肺活量(FEV1)间呈负相关(r=-0.58,P<0.05)。哮喘组和COPD组不良反应发生率分别为31.25%和42.86%,但轻微且均能耐受。结论:缓解期哮喘和稳定期中、重度COPD患者吸入高渗盐水进行痰的诱导是安全的。诱导痰的分析能反映哮喘和COPD的气道炎症特征。
关键词
哮喘
慢性阻塞性肺疾病
高渗盐水
诱导痰
Keywords
Asthma
Chronic obstructive pulmenary disease
Hypertonic saline
Sputum induction
分类号
R562.25 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
人肺腺癌细胞基因表型与尼妥珠单抗疗效的关系
被引量:
8
3
作者
宋海珠
易俊
黄桂春
施毅
机构
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)肿瘤
内科
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)心胸外科
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)
呼吸
内科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2011年第2期148-153,共6页
基金
南京军区南京总医院科研基金(Q2008027)
文摘
目的分子靶向治疗是目前肺腺癌治疗的热点,靶向于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单抗可提高化疗效果,但肺癌基因表型与疗效的关系尚不明确。文中研究尼妥珠单抗联合化疗的疗效与人肺腺癌细胞表面EGFR表达强度,以及EGFR、KRAS和PI3KCA基因突变的关系。方法免疫组化法测定A549、SPC-A1和SPC-A1/DTX肺腺癌细胞表面EGFR的表达强度,突变富集-液相芯片法及测序法检测3种细胞EGFR、KRAS和PI3KCA基因的突变情况,绘制细胞生长曲线测定细胞倍增时间。流式细胞仪检测尼妥珠单抗对细胞周期的影响,MTT法检测尼妥珠单抗联合补体依存性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)作用,与顺铂/多西紫杉醇的联合指数(combination index,CI)。结果 EGFR表达强度:A549(-),SPC-A1(+),SPC-A1/DTX(3+);基因突变:A549的KRAS基因13号密码子和PI3KCA基因的外显子9及20位点突变,SPC-A1/DTX的PI3KCA基因外显子20突变,其余均无突变;SPC-A1/DTX倍增时间最长,为(35.0±2.1)h。尼妥珠单抗(10μg/ml)作用24 h后,进入G0/G1期细胞均增多,但SPC-A1细胞(P=0.018)和SPC-A1/DTX细胞(P=0.0002)差异有统计学意义,A549细胞差异无统计学意义(P=0.24)。低剂量尼妥珠单抗(10μg/ml)联合补体的CDC效应与细胞表面EGFR的表达强度和作用时间呈正相关。尼妥珠单抗(100μg/ml)与顺铂或多西紫杉醇联合时,A549细胞均为相加作用,SPC-A1均为协同作用,SPC-A1/DTX中,多西紫杉醇与尼妥珠单抗为协同作用(CI=0.40),而顺铂与尼妥珠单抗为相加作用(CI=0.93)。结论尼妥珠单抗单药对于EGFR表达阴性,KRAS和PI3KCA基因突变的A549细胞无明显细胞毒性作用和CDC作用,与化疗无协同作用。尼妥珠单抗单药作用于EGFR表达阳性的细胞有G0/G1期阻滞效应和CDC效应,EGFR表达强度越大,化疗增敏作用越强,而与PI3KCA基因突变的影响不显著。
关键词
肺腺癌
尼妥珠单抗
表皮生长因子受体
化疗
Keywords
Pulmonary adenocarcinoma
Nimotuzumab
Epidermal growth factor receptor
Chemotherapy
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化
4
作者
申玉英
徐小勇
张鹏鹏
张峰
施毅
机构
第二军医大学
南京
临床
医学院
(
南京军区
南京
总
医院
)
呼吸
内科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2010年第12期1249-1252,共4页
基金
国家自然科学基金(81000003)
文摘
目的通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达组织因子(tissue factor,TF)的变化,以及用不同干预因素处理对HUVEC表达TF的影响,以探讨侵袭性肺曲霉病(invansive pulmonary aspergillosis,IPA)血管侵袭的机制。方法实验分为6组,即对照组、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、烟曲霉菌丝组、细胞松弛素D组、N-cadherin抗体组和地塞米松组,分别于0、2、6、12、18h获取细胞冻融液,采用ELISA法检测TF浓度。结果实验组2、6、12、18h TF表达量与0h比较均升高(P(0.05),而对照组则无明显变化;实验组TF表达量在2、6、12、18h高于对照组(P(0.05);TNF-α组的TF表达量在2、6、12h高于烟曲霉菌丝组(P(0.01);N-cadherin抗体组的TF表达量在2、6、12h低于烟曲霉菌丝组(P(0.05);细胞松弛素D组或地塞米松组的TF表达量在各时间点与烟曲霉菌丝组比较差异均无统计学意义。结论烟曲霉菌丝感染后,HUVEC过度表达TF,N-cadherin单克隆抗体可减少TF的表达,而细胞松弛素D或地塞米松对TF的表达无明显影响。
关键词
烟曲霉
菌丝
内皮细胞
组织因子
Keywords
Aspergillus fumigatus
Hypha
Endothelial cell
Tissue factor
分类号
R379 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-21在肺癌血管生成中的作用及培美曲塞对其影响
印洁
李玉枫
宋勇
姚鸣
高云
孙倍成
施毅
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012
8
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职称材料
2
支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者吸入高渗盐水诱导痰的安全性和有效性观察
辛晓峰
修清玉
赵明
李子玲
宋勇
施毅
毛广平
《医学研究生学报》
CAS
2006
7
下载PDF
职称材料
3
人肺腺癌细胞基因表型与尼妥珠单抗疗效的关系
宋海珠
易俊
黄桂春
施毅
《医学研究生学报》
CAS
2011
8
下载PDF
职称材料
4
烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化
申玉英
徐小勇
张鹏鹏
张峰
施毅
《医学研究生学报》
CAS
2010
0
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