卫生毒理学试题库建设的探索

考试是教学过程中的重要环节,是评价教学效果的主要手段。传统的人工命题方式存在诸多缺点和不足。通过初步探索,建设科学、实用、规范的卫生毒理学试题库,从而为深化课程教学改革、促进教考分离、提高教学质量提供更好的保障。

我国遗传毒理学发展的回顾

回顾了中国遗传毒理学发展的三个阶段 :自 70年代末至 1983年为启动阶段 ,建立了一系列遗传毒性检测方法 ,筛检了大量环境化学物的遗传毒性 ,以及培训了大量专业人员 ,成立了中国环境诱变剂学会。自 1983～ 1993年为深入发展的关键阶段。遗传毒性检测方法标准化、规范化 ,开展遗传毒性机制的研究 ,遗传毒性试验列入新药、农药、食品、化妆品等安全性评价准则 ,并成立了中国毒理学会遗传毒理专业委员会。自 1993年至今 ,遗传毒理学进入了分子时代。建立了分子致突变测试系统 ,例如穿梭质粒载体系统 ,转基因动物致突变测试系统 ,以及其他应用分子生物学方法进行突变的分子分析等。开展了基因突变分子机制的研究 ,在非定标性突变方面取得了显著成就。并且 ,还回顾了遗传毒理在我国人类环境的现场监测、人群健康监测、遗传毒性与疾病。

代谢组学在毒理学研究中的应用

代谢组学是定性和定量分析某一生物或细胞所有低分子量代谢产物,从而监测机体或活细胞中化学变化的一门科学,是系统生物学的重要组成部分。本文从代谢组学的研究领域、研究方法,代谢组学在毒理学研究中应用的现状、优势与不足等几个方面进行了综述。

扩展的简单串联重复位点诱发突变在遗传毒理学的应用进展

扩展的简单串联重复(ESTRs)序列是基因组DNA上高不稳定的一类重复序列。由于其自发突变和诱发突变率高,因而在生殖细胞诱发突变中的研究中得到广泛的应用。随着研究的深入,目前发现有3类重复序列——小卫星、微卫星和ESTRs,主要通过系谱法和单分子PCR法来研究这些重复序列的变化。但迄今为止,这些重复序列的突变机制还不明确。本文主要综述了目前国内外对这3种重复序列的异同、ESTRs突变研究方法的优缺点以及突变机制。

大鼠卵巢细胞体外培养及生殖毒理研究中的应用

大鼠卵巢细胞体外培养及生殖毒理研究中的应用张天宝综述杨在昌孙棉龄审校第二军医大学卫生毒理学教研室（上海２００４３３）长期以来，人们把化学物质对胚胎或胎儿的潜在毒性效应作为生殖毒理学的研究重点。然而，近１０年来研究发现：人群中不育、性功能异常、月经周期...

睾丸细胞体外培养方法及在生殖毒理研究中的应用

睾丸细胞体外培养方法及在生殖毒理研究中的应用张天宝综述杨在昌孙棉龄审校近年来，国外一些毒理学家先后建立或从基础学科引进了啮齿动物睾丸细胞体外培养方法，试图建立睾丸毒性体外试验系统，现已初步显示出有良好的应用前景，很可能成为今后生殖毒理的重要研究手段。...

连翘酯苷冻干粉对SD大鼠的致畸作用

目的：探讨连翘酯苷冻干粉的对SD大鼠的致畸作用。方法：采用大鼠标准致畸试验，孕SD大鼠随机分为4组，每组20只。实验组剂量分别为0．075，0．150，0．3g·kg^-1，对照组给予生理氯化钠溶液。妊娠d6～15尾静脉注射给药，qd。妊娠d20处死孕鼠，检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果：各实验组对母鼠增重、胎鼠外观畸形率、内脏畸形率、活胎率、死胎率、吸收胎率、活胎身长、胎盘重和胎鼠体重无显著影响。同时，在各受试剂量作用下对骨骼的发育也无明显影响。结论：连翘酯苷冻干粉冻干粉在受试剂量下无明显的母体毒性和致畸作用，也无明显的胚胎毒性和胎儿毒性。

急性镉中毒大鼠睾丸氧化损伤机制的研究

目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。 方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝、睾丸两器官均发生严重的氧化损伤 ,细胞的抗氧化能力明显降低。但两者的变化规律不同 :肝脏在 6 h组 MT大量表达 (达正常值的 6 .7倍 )后 ,上述损伤逐渐减轻 ;而睾丸 MT表达的氧化损伤尽管在前 3h并不严重 ,但此后不断加剧。结论 :急性镉中毒时睾丸与肝氧化损伤规律明显不同 ,MT在睾丸中不能被诱导表达是睾丸对镉极其敏感的原因之一。

烹调油烟颗粒有机提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞周期的影响

为观察菜油油烟颗粒有机提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期影响，从大鼠肺组织中分离得肺Ⅱ型细胞，分别培养和染毒２４ｈ后，应用流式细胞仪进行测定。结果表明，在受试剂量范围内，菜油油烟颗粒提取物对细胞Ｓ期有促进作用，Ｇ２－Ｍ期提前；细胞增殖指数（ＰＩ）增加，二倍体指数（ＤＩ）随染毒剂量而增高。由此提示，菜油油烟颗粒有机提取物可以对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期产生影响，加速细胞分裂。

砷对大鼠胚胎神经系统发育和HSP70mRNA表达的影响

应用显微解剖、原位杂交组织化学、扫描电镜等技术深入研究了三氧化二砷对大鼠胚胎的发育毒性和神经毒性及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达与胚胎神经系统发育的关系。结果表明反映胚胎神经系统发育的头长，神经管未闭、体位异常和脑部形态异常发生率均与染砷剂量和作用时间呈正比关系（Ｐ＜００５）。扫描电镜观察发现大鼠胚胎脑部表皮细胞的微绒毛数量减少，回缩变短，细胞膜表面出现许多小的空洞性病理改变。原位杂交结果表明砷能激发大鼠胚胎产生应激反应，１０ｍｇ／ｋｇ砷诱导的神经管未闭发生率（３５７％）和ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ原位表达强度均明显高于４ｍｇ／ｋｇ砷的作用，证明热休克反应具有双重作用，揭示了砷的发育毒性与其剂量和作用时间是否大于细胞内ＨＳＰ７０合成量的自我调控水平有关，同时亦与损害时间发生于胚胎器官形成期的那一时段密切关联。

连翘酯苷冻干粉的遗传毒性试验

目的检测连翘酯苷冻干粉的遗传毒性,为临床前安全性评价提供依据。方法分别应用Ames试验、小鼠骨髓微核试验、体外培养CHO细胞染色体畸变试验、CHO细胞和正常人肝细胞Chang liver两个细胞株单细胞凝胶电泳法。结果Ames试验选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株,加和不加代谢活化系统(S9)时对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性。小鼠骨髓微核试验采用ICR小鼠,尾静脉注射给药,剂量分别为0.2、0.4和0.8g/kg,结果显示:雌性小鼠微核诱发率分别为1.50、2.67和6.75%,雄性小鼠微核诱发率分别为1.87、5.79和6.57%;其中雌性小鼠在0.8g/kg剂量下、雄性小鼠在0.4、0.8g/kg剂量下的微核诱发率与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。表明受试物连翘酯苷冻干粉在0.4、0.8g/kg剂量下对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。CHO细胞染色体畸变试验结果显示:受试物连翘酯苷冻干粉在受试剂量下作用24h,-S9的染色体畸变率分别为3%、7%和9%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml2个剂量组均显示差异有统计学意义(P<0.05);-S9作用48h的染色体畸变率分别为3%、5%和8%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml剂量组差异有统计学意义(P<0.05);+S9的染色体畸变率分别为1%、1%和6%,各剂量组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重复试验结果一致。以上结果说明连翘酯苷冻干粉在无代谢活化系统时,作用24h328μg/ml以上剂量对CHO细胞有致染色体畸变作用,作用48h164μg/ml以上剂量对CHO细胞具有致染色体畸变作用,在有S9代谢活化系统时,在受试剂量下对CHO细胞均无致染色体畸变作用。细胞彗星试验结果显示,在各试剂量的拖尾率和尾长与溶剂对照组相比较差异无统计学上意义,表明酯苷冻干粉在受试剂量下无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liverDNA的能力。结论连翘酯苷在体外培养CHO细胞染色体畸变试验和微核试验中,在较高剂量时呈阳性,无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liver DNA的能力。连翘酯苷冻干粉有一定的遗传毒性,分析连翘酯苷所致染色体畸变和微核的机制,可能不是通过损伤DNA机制诱导的,而是通过抑制DNA合成的、抑制拓扑异构酶、细胞毒性等非DNA损伤所致。

四种不同高血压大鼠模型形成过程中血清抗AT_(1A)受体自身抗体的检测(英文)

本实验采用不同的方法复制两肾一夹(two-kidney one-clip renal hypertensive,2KIC)、神经性、DOCA-盐高血压和自发性高血压大鼠模型,观察AT1A受体自身抗体(AT1A-receptor autoantibodies,AT1A-AAs)在不同高血压发病的变化规律,同时对自身抗体生物活性进行分析。实验结果表明,在高血压发病过程中AT1A-AAs的阳性率和滴度均明显增加,在四种模型中,自发性高血压组最明显,2K1C和神经性组次之。AT1A-AAs的生物活性显示,可增加培养的新生鼠心肌细胞跳动频率和血管收缩张力。结果提示,自身免疫机制参与了高血压的形成,AT1A-AAs可能与心肌肥厚有关。

甲苯对原代培养海马神经细胞的毒性研究

目的 通过在体外对原代培养的海马神经细胞进行染毒 ,观察其对神经细胞的毒作用 ,并探讨其作用机制。方法 取新生的SD大鼠海马神经细胞进行原代培养 ,两周后 ,用甲苯染毒 ,分成 3个染毒组 ,染毒浓度分别为 3、6和 9mmol L ,并设空白对照组和赋形剂组 ,染毒 2 4h ,观察其对细胞形态、细胞存活率、LDH漏出率、细胞内游离钙和细胞凋亡的影响。结果 甲苯染毒后 ,细胞的形态发生改变 ,引起细胞突起萎缩 ,细胞肿胀变圆 ,细胞数量减少 ;神经细胞存活率的显著下降 ,且随着染毒时间的延长及浓度的升高其存活率逐渐降低 ;高剂量组神经细胞LDH漏出率的显著升高 ,与对照组相比有显著性 (P <0 0 5 ) ;细胞细胞内的[Ca2 + ]i浓度显著上升 ,与对照组相比P <0 0 5 ,并呈剂量依赖性的变化 ,加入钙通道拮抗剂硫氮卓酮后 ,则未见 [Ca2 + ]i浓度上升 ;可见明显的细胞凋亡。结论 甲苯体外染毒对神经细胞有较强的毒性。这可能与甲苯有较强的脂溶性、引起细胞钙内流增加 ,促进细胞凋亡有关。

酒精抑制脑星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白和S_(100)蛋白的表达

目的研究酒精对脑星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达的影响。方法对体外分离培养的大鼠胚胎脑星形胶质细胞分别施以不同剂量酒精(2、5和20mmol/L),染毒7天后,以免疫细胞化学法观察酒精对星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达的影响。结果随酒精剂量增加,脑星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达强度下降,高剂量组细胞数量轻度减少。结论提示酒精能抑制星形胶质细胞GFAP和S_(100)蛋白表达。酒精诱导的星形胶质细胞蛋白表达异常可能是酒精引起中枢神经系统发育异常的主要机制之一。

乙醇及乙醛对胚胎发育的联合作用

为探讨乙醇及其代谢产物乙醛在胎儿酒精综合征 (FAS)中的作用 ,应用植入后全胚胎培养研究不同浓度的乙醇 ,乙醛组合对 9.5- 1 1 .5d大鼠胚胎发育的联合作用 .结果显示在卵黄囊直径 ,头长 ,体长 ,心脏 ,前脑 ,DNA含量等指标乙醇与乙醛存在交互作用 .进一步分析发现 0 .1 g·L-1乙醇与不同剂量乙醛组合可导致拮抗 ,协同和独立等多种联合作用类型 ,但对头长和脑均表现为独立作用 . 0 .2 g· L-1乙醇与不同剂量乙醛组合除心脏呈协同作用外其余均为乙醇独立作用 .上述结果提示 FAS中的脑发育异常是乙醇独立作用的结果 。

草苔虫内酯对SD大鼠致畸作用的研究

目的:探讨草苔虫内酯对SD大鼠的致畸作用。方法:采用大鼠标准致畸试验,孕SD大鼠随机分为4组,每组16～17只。草苔虫内脂高、中、低剂量实验组分别按0.016、0.008、0.004mg/kg给药,对照组给予0.9%生理盐水。大鼠于孕期第6～15天按10ml/kg体重连续尾静脉注射给药。孕20天处死孕鼠,检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果:中、高剂量组的孕鼠增重分别为67.72、11.98g,与对照组比较明显减少(P<0.05),并具有一定的剂量_反应趋势。在高剂量下,活胎率为61.42%,与对照组比较明显降低(P<0.05);吸收胎率和死胎率分别为20.81%、17.77%,与对照组比较明显增高(P<0.05)。各受试剂量下,活胎体质量、活胎身长较对照组明显减少和降低(P均<0.05)。各实验组均未观察到胎鼠明显的外观、脏器以及骨骼的畸形。结论:草苔虫内酯在中、高剂量下具有母体毒性,在高剂量下有胚胎毒性。在受试剂量下有一定的胎儿毒性,但无明显的致畸作用。

铬、汞、镉、镍四种重金属化合物对FL/P4501A1细胞酶活性的影响

利用不同浓度的重金属化合物溴化汞、三氯化铬、硫酸镉、氯化镍处理人羊膜ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞，其半数抑制浓度（ＩＣ５０，ｍｇ／ｍｌ）分别为６．０２６０，３７．５２１３，２４．５４９１和４５．３８４５。结果表明：不同的重金属化合物对ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞的毒性相差很大，溴化汞和硫酸镉的细胞毒性较大。ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞带有Ｐ４５０１Ａ１基因，该基因产物为乙氧基异吩恶唑Ｏ—去乙基酶（ｅｔｈｏｘｙｒｅｓｏｒｕｆｉｎＯ－ｄｅｅｔｈｙｌａｓｅ，ＥＲＯＤ）。酶活性测定结果表明溴化汞、硫酸镉能抑制ＦＬ／１Ａ１细胞自发产生的ＥＲＯＤ活性；三氯化铬、溴化汞、氯化镍、硫酸镉能抑制去甲肾上腺素诱导ＦＬ／１Ａ１细胞产生的ＥＲＯＤ活性。Ｐ４５０１Ａ１酶能激活多环芳烃，溴化汞和硫酸镉可通过降低Ｐ４５０１Ａ１酶活性干扰多环芳烃的致癌作用。

雷公藤内酯醇的遗传毒性评价

目的 观察雷公藤的主要有效成分之一雷公藤内酯醇的遗传毒性。方法 采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）、体外培养CHO细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测雷公藤内酯醇的遗传毒性。结果 Ames试验提示在每皿1.6～1 000μg受试剂量下,在加或不加S9代谢活化系统时,受试物对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535所诱发的回复突变菌落数均与溶媒对照的突变菌落数相近。体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果 显示0.01、0.02和0.04μg/ml 3个剂量的受试物,对加与不加S9代谢活化系统培养的CHO细胞的染色体畸变率无明显影响。小鼠骨髓微核试验设180、360、720μg/kg 3个剂量,在720μg/kg剂量时,雷公藤内酯醇有诱发骨髓嗜多染红细胞微核率增高的效应。结论 在本实验条件下,雷公藤内酯醇对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体无致畸变作用,720μg/kg剂量下对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核率增高的效应。提示雷公藤内酯醇对人体可能具有潜在的遗传毒性。