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重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆
被引量:
1
1
作者
刘厚奇
朱奎
傅继梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第2期105-108,共4页
目的:纯化可溶性白血病抑制因子(LIF)受体,获得特异性免疫原并利用衰变加速因子(DAF)的附膜特性探讨LIF受体的生物特性和功能。方法:采用基因重组技术,将LIF受体α亚基(gp190)细胞外区(gp190sol)...
目的:纯化可溶性白血病抑制因子(LIF)受体,获得特异性免疫原并利用衰变加速因子(DAF)的附膜特性探讨LIF受体的生物特性和功能。方法:采用基因重组技术,将LIF受体α亚基(gp190)细胞外区(gp190sol)的C端与DAFC端37个氨基酸连接,再将该重组基因载入pGEX5T表达系统。结果:在E.coliXL1中可高度表达一种N端为谷胱甘肽S转移酶和C端为190solDAF的融合重组蛋白。此蛋白在XL1中表达产物为不溶性包涵体,以变性剂8mol/L尿素溶解并复性后,可与交联在亲和层析柱上的谷胱甘肽(Glutathione-Sepharose4B)结合,从而一次性分离LIF受体α亚基细胞外区。结论:大分子糖蛋白也能采用pGEX5T系统在大肠杆菌中表达,并通过谷胱甘肽亲和法纯化而作为免疫原。
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关键词
白血病抑制因子
受体
分子克隆
重组蛋白
GST
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职称材料
题名
重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆
被引量:
1
1
作者
刘厚奇
朱奎
傅继梁
机构
第二军医大学基础医学部医学分子生物学开放实验室
法国波尔多
大学
免疫学
实验室
第二军医大学
基础医学
部
生物学
教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第2期105-108,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
目的:纯化可溶性白血病抑制因子(LIF)受体,获得特异性免疫原并利用衰变加速因子(DAF)的附膜特性探讨LIF受体的生物特性和功能。方法:采用基因重组技术,将LIF受体α亚基(gp190)细胞外区(gp190sol)的C端与DAFC端37个氨基酸连接,再将该重组基因载入pGEX5T表达系统。结果:在E.coliXL1中可高度表达一种N端为谷胱甘肽S转移酶和C端为190solDAF的融合重组蛋白。此蛋白在XL1中表达产物为不溶性包涵体,以变性剂8mol/L尿素溶解并复性后,可与交联在亲和层析柱上的谷胱甘肽(Glutathione-Sepharose4B)结合,从而一次性分离LIF受体α亚基细胞外区。结论:大分子糖蛋白也能采用pGEX5T系统在大肠杆菌中表达,并通过谷胱甘肽亲和法纯化而作为免疫原。
关键词
白血病抑制因子
受体
分子克隆
重组蛋白
GST
Keywords
LIF receptor
recombinant protein
glutathione S transferase
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q73 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆
刘厚奇
朱奎
傅继梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997
1
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