生物样品电镜超薄切片染色技术的改进

目的提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量。方法在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式。结果在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。结论与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好。

纳米材料侵入细胞的电镜研究

纳米材料侵入细胞的方式是纳米材料生物学效应研究的重点。本文利用透射电镜对目前应用较广的SiO2、TiO2及Fe3O4三种纳米颗粒材料侵入细胞的方式进行了研究。结果显示TiO2纳米颗粒侵入细胞的方式是最常见的内吞方式,而SiO2及Fe3O4纳米颗粒可以直接穿过细胞膜的方式侵入细胞。

骨骼肌毫秒级功能变化时的结构研究

本文报道了采用两对透射型红外传感器及数字脉冲输出电路组成的双向红外线探测器，与计算机连接，以自研的软件控制超低温快速冷冻固定仪，从超微结构的水平研究生物组织、细胞在毫秒级功能变化时的同步形态变化。

利用膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞浆内钙离子的释放

目的:采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放。方法:在体外培养的单个心室肌细胞上进行全细胞模式膜片钳技术和共聚焦显微镜钙成像技术相结合,同步实时记录钙火花和钙离子浓度变化。结果:在全细胞模式膜片钳记录心肌细胞膜钙电流的同时,激光扫描共聚焦显微镜可准确记录到胞浆内出现的钙火花。此技术有可能对于明确钙火花的特征,准确理解兴奋-收缩偶联的微观机制有重要意义。

几种纳米材料细胞毒性效应的研究现状

随着社会经济、科技的发展,纳米材料在各个领域中的应用也越来越广泛,在给人们生活带来便利的同时,纳米材料的毒性效应也日益受到人们的高度关注。本文就纳米材料的特殊物理化学特性、纳米材料细胞生物毒性的研究方法、纳米材料对细胞造成的毒性效应等方面,综合阐述几种纳米材料(碳基纳米材料、金属及金属氧化物等)的细胞毒性效应及存在的问题。最后,展望了该研究方向的研究重点和亟待研究的重要问题,为研究纳米材料的生物安全性提供导向。

二氧化钛纳米颗粒解聚方法

目的：研究二氧化钛（TiO2）纳米颗粒解聚的方法。方法：以超声的方法在不同条件下对多种TiO2纳米材料进行处理，利用透射电镜观察解聚情况。结果：在一定温度、功率和时间条件下，利用超声法可以对不同粒径和性质的TiO2纳米颗粒进行解聚，解聚后的TiO2纳米颗粒能满足其生物学效应的研究。结论：超声波振荡法是纳米颗粒团聚体解聚的有效方法。

利用激光共聚焦显微镜观察骨骼肌肌纤维中的钙火花现象

钙火花(Ca2+sparks)现象是近年来在骨骼肌、心肌兴奋收缩偶联研究中发现的重要生理现象,但目前确切的机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou 3AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析,在骨骼肌肌纤维中捕获到钙火花现象,并对钙火花现象的发生进行了初步探讨。

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网内Ca^(2+)释放的形态-功能变化研究

采用双向红外线探测器 计算机控制的电刺激 超低温快速冷冻固定同步技术、透射电子显微镜、X 射线能量色散谱及Ca2 +细胞化学技术 ,从超微结构形态学角度 ,实时研究并获取骨骼肌兴奋 收缩偶联时 ,肌浆网内Ca2 +释放及肌浆网的形态改变。研究表明 :1 骨骼肌组织在收缩潜伏期内 ,肌浆网膜与T 管膜接触。 2 在潜伏期 ( <10ms)内 ,肌浆网内的钙离子浓度随时间经历的延长而减少。 3 骨骼肌组织在收缩潜伏期开始 0 8ms时 ,在T 管外周围 (纳米处 ) ,有Ca2 +分布 ,可以认为骨骼肌兴奋收缩偶联时 ,T 管外存在Ca2

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网膜Ca^(2+)通道的研究

目的:从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌肌浆网、T 管在收缩潜伏期内超微结构的时相—形态变化。方法:采用双红外线探测器—计算机控制的电刺激—超低温快速冷冻固定同步技术,对电刺激后的蟾蜍骨骼肌组织作快速冷冻固定,采用透射电镜对骨骼肌在电刺激后0 8ms,2ms,4 6ms,10 8ms和18 4ms的超微结构变化进行观察。结果:刺激0 8ms后,肌浆网和T 管未见明显改变。刺激2ms后,SR内出现电子密度较大的物质。刺激4 6ms后,肌浆网膜内外侧可见一一对应的电子密度大的物质。刺激10 8ms后,SR与T 管形态又恢复原状,SR内电子密度大的物质消失。结论:骨骼肌兴奋 收缩偶联发生时,肌浆网的形态发生改变,肌浆网内出现电子密度较大的物质且逐渐向靠近T 管的方向移动。

纳米二氧化钛颗粒对小鼠单核细胞超微结构的影响

目的:观察二氧化钛(TiO2)纳米颗粒随时间变化对小鼠单核细胞超微结构的影响。方法:将50μg/ml纳米TiO2颗粒溶液与小鼠单核细胞(RAW264.7)共培养,在37℃,5%CO2的细胞培养箱中分别孵育1、2、4、8、16、24h,收集细胞,透射电镜下观察小鼠单核细胞超微结构的改变。结果:纳米TiO2的平均粒径为30nm,当TiO2纳米颗粒与单核细胞作用4h以下时,细胞中有少量纳米TiO2颗粒,线粒体和内质网出现不同程度的肿胀或扩张,细胞核无明显变化。随着作用时间的增加,细胞核也出现不同程度的变化。讨论:纳米TiO2颗粒以胞吞的方式进入细胞,对各细胞器产生影响,其中主要作用于细胞核。

骨骼肌肌浆网在收缩潜伏期内的超微结构形态变化

采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术对被电刺激后的骨骼肌作快速冷冻固定，采用透射电镜对电刺激后０．８ｍｓ，５．６ｍｓ，８．４ｍｓ及完全舒张时的蟾蜍腓肠肌超微结构变化进行了对比研究。骨骼肌组织在电刺激后０．８ｍｓ，５．６ｍｓ及８．４ｍｓ时发现肌浆网的前端，膜产生两个圆孔，而在骨骼肌处于全舒张时，肌浆网膜并无此形态结构。骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，发现肌浆网近Ｔ－管端的膜产生两个圆孔，而骨骼肌处于全舒张时，肌浆网膜也无此形态结构；骨骼肌收缩时出现的肌浆网膜小孔是否与肌浆网内某种物质（引起钙离子释放的某种未知物质？钙流？）在肌组织收缩时的转运或释放有关？

骨骼肌在兴奋收缩偶联潜伏期内毫秒级功能变化时的形态研究

骨骼肌在兴奋收缩偶联潜伏期内毫秒级功能变化时的形态研究杨勇骥郑尊邵晓良夏金辉余宏宇姜永良宋田斌吴越（第二军医大学基础部生物物理研究所，上海２００４３３）采用双向红外线探测器—计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术对骨骼肌组织电刺激后，在潜伏期...

二氧化钛纳米颗粒对小鼠单核巨噬细胞超微结构影响的电镜研究

目的:应用电镜观察二氧化钛纳米颗粒(nano-TiO2)对小鼠单核巨噬细胞超微结构的影响。方法:将不同浓度的nano-TiO2溶液加入小鼠单核巨噬细胞(Rawcell)中,在37℃、5%CO2的细胞培养箱中孵育4h,收集细胞,制样后在透射电镜下观察小鼠单核巨噬细胞超微结构的改变。结果:电镜下,nano-TiO2的粒径为20～35nm。致密的nano-TiO2通过内吞进入细胞,当浓度超过200μg/mL时,细胞胞质空泡内吞噬有大量成簇的致密颗粒,细胞核固缩,染色质浓缩、边集,出现早期细胞凋亡改变。

骨骼肌兴奋收缩偶联潜伏期肌浆网内Ca^(2+)变化的研究——细胞化学法及X-射线能量色散谱微区分析

报道了采用红外探测－计算机控制的超低温快速冷冻固定技术、Ｘ－射线能量色散谱微区定量分析及Ｃａ２＋细胞化学技术对骨骼肌收缩潜伏期时肌浆网内的Ｃａ２＋进行了分析，从超微结构形态学的角度对骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时，肌浆网内Ｃａ２＋的作用进行了研究，这对揭示骨骼肌兴奋－收缩偶联时，肌浆网内Ｃａ２＋的释放机理研究有重要意义。

冷冻和化学固定后蟾蜍骨骼肌超微结构变化的比较研究

比较冷冻和化学固定后骨骼肌超微结构的不同特征。方法 :蟾蜍缝匠肌经常规化学固定以及超低温快速冷冻固定、冷冻置换后 ,透射电镜进行超微结构观察。结果 :冷冻固定后 ,缝匠肌基膜仅仅由电子密度高的一层组成 ;横小管为圆形 ;终池内含有电子密度高的环形物 ,终池膜上存在一排线状电子密度高的蛋白颗粒。化学固定后 ,缝匠肌基膜由两层组成 :一层电子密度低 ,另一层电子密度高 ;横小管为扁平状或哑铃状 ;终池内仅有一些散在的电子密度高的颗粒 ,终池膜上有几个脚状突起伸向横小管。结论 :冷冻和化学固定后 ,骨骼肌基膜、横小管、终池等结构存在着不同的形态特点。这些不同的形态形成的原因及生理意义还有待进一步研究。