干细胞研究中的化学生物学:学科交叉的新前沿

化学生物学(chemical biology)是利用小分子化合物干预和解析生物系统,认识生物系统的本质和内在规律的学科,在包括干细胞研究在内的多个领域得到应用。近年来,干细胞研究取得了引人瞩目的进步,这些基础研究的进步也正在推动着干细胞技术在再生医学中的应用。对细胞命运转换分子基础的认识以及精确操控是干细胞研究的核心问题。小分子化合物因其在使用的便捷性、可控性和功能多样性等方面的显著优势,正越来越多地被用于干预和研究干细胞的增殖、分化和重编程等生物学行为。利用化学分子调控体内干细胞的生物学行为、促进其体内再生和修复将有望成为再生医学领域极具潜力的发展方向。

干细胞生物学:医学细胞生物学教学的新前沿

近年来干细胞研究已经成为细胞生物学乃至整个生命科学研究的前沿和热点,并取得了许多令人瞩目的重大突破。同时,干细胞研究也直接推动了再生医学的研究和发展。对于医学院校的本科生而言,医学细胞生物学是一门在细胞水平上揭示生命和疾病基本规律的重要基础课程。干细胞的研究进展拓展了细胞生物学的核心知识体系。干细胞生物学正在成为医学细胞生物学教学不容忽视的新前沿,这不仅仅是医学细胞生物学教学与时俱进的要求,同时也是培养医学生迎接再生医学到来的需要。

关于《细胞生物学》教学的思考

细胞生物学是研究细胞的形态结构和功能以及细胞的生命现象和活动规律的科学,是一门重要的现代医学基础学科。学好《细胞生物学》对于学生今后的学习、工作是十分重要的。在教学中,我们应注意:(1)加强与学生的交流,建立良好的师生关系;(2)授课内容的连贯和完整性;(3)充分利用多媒体技术,激发学员的学习兴趣;(4)调动学生主动学习的积极性;(5)培养学生的科研思路;(6)课后及时总结。

浅谈因材施教在医学细胞生物学教学中的应用

因材施教,对不同的对象采取不同的施教方式。细胞生物学作为21世纪生命科学三大重点核心学科之一,在医学院校学生的知识结构组成中占有不可忽视的重要地位。在细胞生物学教学过程中,注重因材施教,针对不同专业不同层次的学生,进行教学内容的取舍、采取不同的教学方法和针对性的考核方式,才能提高兴趣,提升教学效果。

医学细胞生物学课程体系改革探讨

细胞生物学的理论知识已经渗透到医学科学的各个领域,是医学科学的基本组成部分,也是医学科学高水平发展的重要基础。随着医学科学和细胞生物学本身的快速发展,医学教育对于细胞生物学的需求日益增加,为了使医学细胞生物学教学体系适应我国医学教育的发展,第二军医大学细胞生物学教研室本着培养创新型人才、提高教育质量的思想,建立了一种新的医学细胞生物学课程体系。该教学体系的核心内容是将细胞生物学从内涵上融入医学科学教育,既有利于学生的学,又有利于教师的教,保证了"教"与"学"的有效性。

通过加强细胞生物学发展史的教学培养学生的科学思维

细胞生物学是在细胞和亚细胞水平揭示细胞和细胞器基本结构和功能,是细胞生命活动基本规律的科学,是现代生物学的重要支柱和重叠核心学科之一。如果以显微镜的发明和用显微镜观察生物标本作为细胞生物学发展的萌芽阶段,目前细胞生物学已经经历了超过400多年的发展历程。在细胞生物学的教学中,除了向学生传授该学科的核心知识之外,加强细胞生物学学科的发展史及核心知识形成历程的教学同样重要。不仅利于学生理解细胞生物学的核心知识体系,同时有助于学生认识学科发展的普遍规律、培养学生的科学思维。

药学专业的《细胞生物学》课程教学研究

《细胞生物学》是当今生命科学核心学科之一,也是医学院校的主干课程之一.医学院校不同专业的学生对《细胞生物学》课程的重视程度和学习积极性存在显著差异.临床医学的学生通常对细胞生物学课程的重视程度远高于药学专业的学生.在原因分析的基础上,尝试针对药学专业学生的《细胞生物学》课程进行教学改革,通过在教学中加强"药学特色",有效地激发了药学专业学生的学习积极性,提高了教学效果.

干细胞与生物医药

干细胞是指那些处于分化过程之中，具有分裂增殖能力、并能分化产生一种以上“专业”细胞的原始细胞。根据干细胞的分化潜能可将其分为全能性干细胞、多能性干细胞和专能性干细胞三大类。但是干细胞的分 化潜能是相对的，在特定的环境下干细胞可表现出一定的可塑性。目前，干细胞是生命科学的热点研究领域之一，而且进展很快。可以预料，这方面的知识和理论将有助于对个体发育认识的加深和为重大疾病防治手段的研究提供新的思路。

基于肝干细胞的肝癌生物学研究进展

肝干细胞是一类具有自我更新能力和分化为肝细胞与胆管细胞能力的肝原始细胞。而原发性肝癌是我国死亡率居第2位的恶性肿瘤。近年在中晚期肝癌中发现了具有干细胞特性的细胞(即肝癌干细胞)存在,并认为肝癌干细胞自我更新机制的失调可能是原发性肝癌发生的因素之一,这种细胞可能与肝癌细胞增殖的维持、转移、放疗和化疗抵抗等现象有关。本文就肝干细胞和肝癌干细胞在原发性肝癌的发生、转移和治疗抵抗中发挥的作用进行综述。

干细胞生物学的课程设计和实践

干细胞是指机体内具有自我更新能力和特定分化潜能的细胞。近年来,干细胞研究取得了突飞猛进的发展。这些进步不仅为生命科学领域建立了一个新的知识系统,同时干细胞基础研究的进步也为其向临床的转化应用奠定了基础。基于此,设计了针对硕士研究生的干细胞生物学课程,该课程分为干细胞总论、多能干细胞生物学、细胞重编程、成体干细胞、以及干细胞和再生医学五大知识模块。希望通过这门课程的学习能够帮助学生掌握干细胞的核心知识、认识该领域的研究概况和研究热点、了解干细胞研究的最新技术以及干细胞的应用情景,从而拓展他们的学术视野。

利用分叶顺次肝切除术建立小鼠肝脏大部切除后再生模型

目的:利用肝部分切除术,建立可准确量化和易于操控的小鼠肝脏再生模型,为研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制及其病理学意义提供技术平台。方法:正常成年C57BL/6小鼠经心脏灌注固定后,逐叶分离肝脏、称重,计算各肝叶所占肝重的百分比;麻醉状态下,分叶顺次无菌切除小鼠肝脏的左外叶、左中叶和右中叶,建立肝脏大部切除的再生模型;利用RT-PCR方法动态检测术后肝脏甲胎蛋白基因的激活表达特征。结果:肝左外叶、左中叶和右中叶合计约占小鼠肝脏总重量的68%,分叶顺次切除上述3个肝叶,术后动物恢复和存活状态良好,RT-PCR结果证实甲胎蛋白基因在小鼠肝脏再生中的激活表达。结论:利用分叶顺次肝切除术,成功建立了小鼠的肝大部切除后再生模型,该方法可准确量化肝脏切除的程度,具有可控性强、简便易行和成功率高等优点,为小鼠肝再生的研究奠定了基础。

荧光染料Hoechest33342与干细胞研究

Hoechest33342是一种可以与DNA结合的荧光染料,在细胞周期研究方面得到广泛的应用。最近研究发现,某些癌细胞和干细胞可以将进入细胞的Hoechest33342排出细胞外,利用流式细胞仪可以将这些不着色的细胞加以分离。现在已经从许多组织中分离得到了这种细胞。许多研究也提出了利用该方法分离干细胞的可能性。

高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。

天鹅型记忆接骨器与钢板内固定术后软组织界膜的生物相容性

目的 :通过局部组织大体观察、组织学病理及超微结构观察等方法 ,比较天鹅型记忆接骨器 (swan likememoryconnector,SMC)和不锈钢板内固定后对于软组织界膜的影响 ,初步评价SMC的生物相容性 .方法 :对临床既往骨折后经SMC或不锈钢板内固定病例 1 3例经随访发现骨折取得骨性愈合后 ,于内固定取出术中取与金属密切接触的局部软组织进行大体标本观察、光镜和电子显微镜观察 .结果 :SMC组局部软组织结构致密规则 ,炎症反应较轻或无 ,微观结构观察见为规则致密的纤维结缔组织 ,成纤维细胞为主要细胞成分 ,细胞周围可见排列规则致密、纵横交错的胶原纤丝 ;钢板组软组织结构多数紊乱 ,局部组织发黑或发灰 ,微观结构观察胶原纤维增生 ,透明变性 ,结构紊乱 ,并有不同程度的炎性反应或异物反应 (异物巨细胞反应、纤维素样坏死 )存在 .结论 :SMC具有良好的生物相容性 。

胚胎干细胞转染外源基因教学实验优化

针对胚胎干细胞的培养和外源基因转染实验教学过程中,存在学生培养的胚胎干细胞状态较差、转染外源基因效率偏低等问题,通过实验探索,发现通过控制接种滋养层细胞的密度、悬浮转染代替传统贴壁转染的方法,可显著改善上述问题。该探索不仅优化了转染方法、提高了教学效果,也为学生培养科研能力奠定了基础。

人骨髓间充质干细胞在新生小鼠脑中的植入和分化

背景与目的:探讨人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)在体内向神经细胞分化的可能性。材料与方法:将标记绿色荧光蛋白的人骨髓间充质干细胞植入到新生3d的小鼠侧脑室中,分别于移植后0d,9d和14d处死受体鼠,取其脑组织,4%多聚甲醛固定后行冠状面冰冻切片,荧光显微镜下观察hMSCs的植入,激光共聚焦显微镜检测植入细胞神经特异性蛋白的表达,定位双重标记的植入细胞。结果:受体小鼠脑中均可检出植入的细胞,此类细胞表达神经元细胞特异的微管相关蛋白β-Ⅲ-Tubulin(Tuj1)、微管相关蛋白2(MAP2),一些细胞表达神经胶质细胞特异的胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)。结论:hMSCs植入后受到脑组织特定微环境的影响,在体内可以向神经细胞分化并参与到发育的神经系统中。

肝癌干细胞的研究现状

肿瘤发生的癌干细胞假说认为肿瘤组织是由处于各种分化等级的细胞组成的,其中的癌干细胞数量虽少,但在肿瘤的发生、恶化、转移中起重要作用。肝细胞癌作为最常见的恶性肿瘤之一,其中是否存在“肝癌干细胞”的问题一直倍受人们关注。该文介绍肝癌干细胞的研究情况。

MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达

目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MafA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)。方法:通过PCR方法克隆MafA基因全长.将其构建到pBMN—Z—IRES-Neo逆转录病毒载体中获得pBMN—MafA—Neo载体;将该载体导入Phoenix包装细胞系,收集病毒上清并感染LEPCs,筛选稳定表达MafA的LEPCs;RT-PCR方法检测MafA表达对LEPCs分子表型的影响。结杲:成功构建pBMN—MafA-Neo载体,并获得稳定表达MafA基因的肝原始细胞系(LEPCs—MafA)。LEPCs-MafA细胞GK和GLUT2基因表达高于LEPCs。结论:成功获得稳定表达MafA的肝原始细胞系,为研究MafA诱导肝干细胞向胰腺细胞转分化奠定了基础。

SP细胞的研究现状

在干细胞研究中,侧群(side population,SP)表型是指用来表示某些细胞具有的将进入细胞的荧光染料Hoechst33342或诺丹明123排出的特性,将利用该特性分离的细胞称为侧群细胞(side population cell,SP细胞)。众多实验提示SP表型可能是干细胞或前体细胞的筛选标志。然而也有实验指出SP细胞与干细胞存在差异,因此对SP细胞的研究日益深入。本文就SP表型的形成及影响因素,SP细胞与干细胞的一致性及差异性等研究现状作一综述。

锌指蛋白ZBTB20生物学功能的研究进展

锌指蛋白ZBTB20是ZBTB锌指蛋白亚家族的新成员,与已知的BCL6和PLZF同源。通过基因打靶小鼠和疾病人群研究,学者们发现ZBTB20在肝脏、胰岛、神经系统和免疫系统等多个器官与系统中具有重要生理学功能,是个体发育、学习记忆、痛觉感受、糖脂代谢等正常生理过程所必需的调节分子。ZBTB20表达或功能异常可导致个体发育障碍,与智障、肿瘤和代谢性疾病等多种重大疾病的病理生理过程密切相关。作为甲胎蛋白基因的主要转录抑制因子,ZBTB20在出生后肝脏甲胎蛋白基因的表达失活中发挥了关键性作用,且与肝癌预后密切相关。人群中ZBTB20基因的缺失与多种肿瘤有关,其点突变可导致Primrose综合征。本文就ZBTB20的生物学功能研究进展作一综述。