热带传染病诊断技术的研究进展

热带传染病仍是新发传染病的主要病种,在世界范围内呈愈演愈烈之势。不断提高该类疾病诊断技术水平对疾病防控极为重要。本文主要对热带传染病诊断技术研究进展,特别是免疫学检测和分子生物学检测等诊断技术的研究进展作一综述。

吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用及宿主miRNA表达变化

目的研究吡喹酮对日本血吸虫虫卵引起的肝纤维化的治疗作用及其可能的机制。 方法选用BALB／c小鼠建立日本血吸虫感染小鼠模型．实验组以250 mg／（kg·d）吡喹酮连续用药3 d进行杀虫。再以600mg／（kg·d）连续给药30 d进行抗纤维化治疗 对照组仅进行吡喹酮杀虫。以肝组织羟脯氨酸含量等指标评定小鼠肝纤维化的程度，并通过实时荧光定量PCR（real．time PCR）检测各组肝组织中某些微小RNA（microRNA，miRNA）的表达水平。各组检测结果以t检验进行统计学分析。结果经过吡喹酮治疗后，小鼠肝脏羟脯氨酸含量等肝纤维化指标明显降低，小鼠肝脏羟脯氨酸含量感染后第75天，感染组、杀虫组、治疗组依次为（0．86±0．07）、 （0．66±0．06）、 （0．25±0．05）mg／g肝湿重，治疗组低于感染组和杀虫组（t=12．86，P〈0．01）。同时小鼠肝脏的部分miRNA表达水平发生了明显改变，治疗组与杀虫组相比较。Col I、milt-223、miR-146b、miR．142—5p、miR．199a．5p、miR．34c＊、miR-195依次下调了62％、38％、75％、77％、40％、54％和56％。 结论 吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化有一定的治疗作用，其作用可能与调节某些宿主miRNA的表达水平有关。

microRNA在血吸虫感染中的表达研究进展

血吸虫病是一种严重威胁人类生命健康的重大寄生虫病,其发病机理目前仍不是很明确。microRNA是一种内源性小分子RNA,通过在转录后调控基因的功能,从而广泛参与生理和病理过程的调控。目前,miRNA在血吸虫病中的功能研究是血吸虫病研究领域的热点方向,包括虫源miRNA的鉴定及功能研究、宿主miRNA在疾病进展中的功能研究、血清miRNA表达谱研究以及胞外囊泡miRNA的鉴定及功能研究。这些研究成果加深了人们对血吸虫病发病机理的认识,并有望转化为血吸虫病新的诊断标志物和药物作用靶点。本文对miRNA在血吸虫病中的功能研究进展进行了综述。

恶性疟原虫青蒿素抗性相关k13基因及其C-末端功能域的克隆及表达

目的探索在大肠埃希菌中表达恶性疟原虫青蒿素抗性相关基因k13及其C-末端propeller结构域,为后续蛋白结构分析及青蒿素抗性机制等功能研究奠定基础。方法以恶性疟原虫基因组DNA为模板、PCR扩增k13及其C-末端基因片段并分别克隆至pET-28a载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dthiogalactoside,IPTG)诱导,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western blot检测重组蛋白的表达。再分别用恶性疟和间日疟患者血清进行重组蛋白rK13和rK13-propeller的Western blot检测。结果 PCR扩增得到全长k13基因和k13-propeller片段,并构建了重组质粒pET-28a-k13和pET-28a-k13-propeller。SDS-PAGE电泳和Western blot检测表明,两重组蛋白均表达,且重组蛋白rK13可与恶性疟患者血清反应,rK13-propeller既可与恶性疟又可与间日疟患者血清反应。结论利用原核表达系统成功表达重组蛋白rK13和rK13-propeller,两重组蛋白能够与疟疾患者血清反应,且与不同种疟疾的患者血清反应的特异性有所不同。