生物技术在中药材品质改良、保护和鉴定等方面的应用

目的 介绍生物技术在中药材品质改良、保护和鉴定等方面的应用。方法 总结 2 0世纪 80年代以来中药生物技术领域的国内外相关文献并进行分析。结果 生物技术在中药领域主要应用于多倍体育种、药用植物及活性成分的工业化生产、转基因药材、中药鉴定及药用动植物种质资源保存等方面并发挥着重要的作用。

楮实子红色素体外抗氧化作用研究

目的:探讨楮实子红色素(Fructus B roussonetiaHaem atochrom e,FBH)体外抗氧化作用。方法:采用H2O2和Fe2+系统产生羟基自由基,NADH-PMS-NBT系统产生超氧阴离子自由基,并观察了FBH对羟基自由基及超氧阴离子自由基清除效果以及对H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制和对肝组织匀浆自氧化终产物MDA及VC-Fe2+系统引起的线粒体的形态改变的抑制作用。结果:FBH能显著清除超氧阴离子及羟基自由基,抑制H2O2诱导小鼠红细胞溶血和肝匀浆自氧化,对肝线粒体也有保护作用。结论:FBH有较强的体外抗氧化作用。

药用植物的多倍体育种

概述了多倍体的概念、多倍体植物的特点及鉴定方法 ,总结了染色体人工诱导加倍的常用方法 。

四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅱ.转半夏凝集素基因菘蓝的分子生物学检测

目的 获得转基因菘蓝的分子生物学证据。方法 对经卡那霉素筛选的抗性再生菘蓝苗进行聚合酶链式反应 (PCR) ,Southern杂交和 RT-PCR检测。结果 PCR和 Southern杂交检测结果表明 ,外源半夏凝集素基因已经整合到转基因菘蓝的基因组中 ,RT-PCR结果表明其 DNA可以正常转录成 m RNA。结论 可以利用农杆菌介导的基因转化技术培育抗虫的菘蓝新品系。

去甲基斑蝥素治疗卵巢癌的实验研究

目的 观察去甲基斑蝥素 (NCTD)体内外对人卵巢癌细胞株 3AO和 AO的抑制作用。方法 利用细胞培养技术 ,以结晶紫染色法测定 NCTD对 3AO和 AO细胞的体外杀伤作用 ,并在光镜和电镜下观察 NCTD对其进行治疗 ,以观察 NCTD体内对卵巢癌的抑癌效应。结果 体外实验表明 NCTD对 3AO和 AO细胞有较强抑制作用 ,并呈浓度和时间依赖性。在 NCTD作用下 ,光镜下卵巢癌细胞大多变圆呈悬浮状 ,电镜下则表现为细胞微绒毛消失 ,线粒体水肿、嵴断裂 ,胞质呈空泡样变性。体内实验则表明无论是腹腔内注射还是瘤内注射 ,NCTD对卵巢癌均有抑制瘤效应。结论 NCTD体内外对卵巢癌均有较强的抑制作用 ,提示

四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅰ.根癌农杆菌介导的转基因菘蓝

目的 将外源半夏凝集素基因 ( PTA )转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫抗性。方法 构建了以 Ca MV 35 S为启动子 ,新霉素磷酸转移酶 ( Npt- )为选择标记 ,带有半夏凝集素基因 PTA的 p CAMB A2 2 0 0植物双元表达载体 ,应用根癌农杆菌 EHA 10 5遗传转化四倍体菘蓝。结果 菘蓝外植体植株再生率达到 95 %以上 ,转化率有10 %。结论 建立了以 6 - BA和

8种楤木属药用植物化学成分分析

对木属主要药用种的化学成分预试和薄层层析研究发现，该属木本、草本种均含皂甙和β－谷甾醇，从而表明皂甙和β－谷甾醇不能作为属内木本和草本类群化学分类的依据；对不同种和同种不同物候期采集的根皮作了齐墩果酸含量测定，发现了一些含量较高的种，并提出了最佳采收期。

鬼针草黄酮类化学成分及其抗脂质过氧化作用的研究

采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法对鬼针草乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分进行化学成分研究,并利用IR,1H NMR,13C NMR,MS等光谱技术鉴定其化学结构。从鬼针草中分离得到了6个黄酮类化合物,经鉴定分别为:5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮(1)、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(2),槲皮素-7-O-葡萄糖苷(3)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(4),5,7,3′,4′-四羟基-3-甲氧基黄酮(5)和β-谷甾醇(6)。这些化合物均为首次从该植物中分得。另外,针对分离得到的化合物进行测定小鼠血清MDA水平,SOD和GSH-Px活性,研究发现化合物2,3,4和5具有较强的抗脂质过氧化作用。

苍耳及其同属药用植物研究进展

本文介绍了菊科苍耳属 (XanthiumL .)的植物资源 ,并分别介绍了苍耳草、苍耳子、苍耳蠹虫及苍耳花和根的化学成分和药理活性及其毒性。苍耳属植物所含的化学成分主要是倍半萜内酯、挥发油和水溶性苷类。在临床上 ,苍耳草常用来治疗鼻炎、麻风病等 ;苍耳子则具有抗微生物、抗凝血、免疫抑制、抗氧化以及抗炎与镇痛作用等 ,疗效显著。苍耳全草有毒 ,以苍耳子毒性最大 ,其有毒成分为苍术苷类。

蛇床子总香豆精与挥发油和水提物对肾阳虚大鼠血浆前列腺素和环核苷酸的影响

为进一步研究蛇床子的补肾壮阳作用并筛选其有效成分,用醋酸氢化可的松制造大鼠肾阳虚模型,以蛇床子总香豆精、挥发油和水提物分别给药,测定大鼠血浆前列腺素(PGE_2和PGF_(2α))和环核苷酸(cAMP和cGMP)的浓度。结果阳虚组与正常组相比,PGE_2和PGF_(2α)显著降低(P<0.01),cAMP降低(P<0.01),cGMP相差不显著(P>0.05),但cAMP/cGMP值显著降低(P<0.01)。用药组总香豆精组和水提物组与阳虚组比较,PGE_2、PGF_(2α)及cAMP/cGMP值均显著升高(P<0.01)。用药组挥发油组与阳虚组比较,PGF_(2α)升高(P<0.01),但PGE_2和cAMP/cGMP值变化不明显(P>0.05)。通过实验认为影响体内环核苷酸和前列腺素代谢是蛇床子补肾壮阳作用的机理或途径之一,并认为香豆精成分是蛇床子补肾壮阳的作用的有效成分。

葛属植物中3种异黄酮成分分析

目的 :测定 7种葛属植物根中异黄酮成分的含量。方法 :采用高效液相色谱法。色谱柱为HypersilODS2(15 0mm× 4 6mm ,5 μm) ;检测波长 2 5 0nm ;葛根素、大豆苷、大豆苷元的加样回收率±RSD分别为 (10 5 7± 4 6 ) % ,(10 5 4± 6 9) % ,(10 4 5± 9 2 ) %。结果 :葛属植物中 3种异黄酮成分含量差异较大 ,野葛、粉葛和峨嵋葛中含有的葛根素和大豆苷比其它几种葛属植物高 ,野葛中葛根素的含量最高 ;从液相色谱图中观察到不同产地野葛的图谱与其它种的葛属植物有明显区别。结论

草乌煎煮时间、给药剂量与抗炎镇痛功效的相关性研究

目的:研究草乌煎煮时间、给药剂量与抗炎镇痛功效的相关性,确定药物发挥功效的最佳煎煮时间和给药剂量。方法:根据草乌祛风除湿止痛的功效,选择热板痛证模型、扭体痛证模型、急性炎证模型、亚急性炎症模型等,运用均匀设计和回归分析方法,确定药物不同功效的最佳煎煮时间和最佳给药剂量。结果:草乌能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀;显著对抗鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀;抑制巴豆油所致大鼠炎性肉芽肿的增生,减少炎性渗出液。显著减少醋酸所致小鼠扭体次数,延长小鼠扭体潜伏期;明显延长热板刺激小鼠添足潜伏期,提高热板小鼠痛阀值。草乌发挥抗炎功效的最佳煎煮时间为6 h,最佳给药剂量为2.4 g/kg;镇痛功效的最佳煎煮时间为6 h,最佳给药剂量为2.4 g/kg。结论:草乌具有明显的抗炎作用和中枢镇痛作用;煎煮时间、给药剂量与抗炎镇痛功效显著相关。发挥抗炎镇痛功效的最佳煎煮时间和剂量为6 h和2.4 g/kg。

脾虚胃癌病证结合动物模型的建立

目的探索脾虚胃癌病证结合动物模型的建立方法。方法以过食酸味法建立脾气虚证动物模型,并在此基础上连续灌胃2-乙基亚硝胺120天。结果成功建立了脾虚胃癌病证结合动物模型。脾虚胃癌小鼠在脾虚状态、胃癌表现等方面与单纯胃癌小鼠有显著性差异。结论用本文所述方法可复制出稳定的病证结合脾虚胃癌动物模型;从实验的角度证明了脾虚在胃癌的发生、发展过程中起着重要作用。

天目山山胡椒不同部位内生真菌组成及多样性分析

采用表面消毒法,从浙江天目山野生山胡椒〔Lindera glauca(Sieb.et Zucc.)Blume〕的茎、叶和树皮中分离出内生真菌,基于ITS序列分析进行分类鉴定;并以内生真菌的分离率、定殖率、分离频率、多样性指数(H')及相似性系数为指标,分析了山胡椒内生真菌的菌群组成及多样性。结果显示:在26株山胡椒样株的728块组织块中共分离得到328株内生真菌(茎、叶和树皮中分别有161、40和127株);共鉴定出44个分类单元(茎、叶和树皮中各有19、18和28个),其中25个分类单元鉴定到种、17个鉴定到属、2个鉴定到科,ITS序列的GenBank登录号从JF502420至JF502462。在44个分类单元中,有40个分类单元属于子囊菌(310株),存在于山胡椒的各个部位;仅有4个分类单元属于担子菌(18株),且仅存在于茎和树皮中。山胡椒茎、树皮和叶中内生真菌的定殖率分别为65%、60%和15%,分离率分别为0.77、0.61和0.19;叶和树皮中内生真菌的多样性指数均为2.63,远大于茎(H'=1.83)。山胡椒内生真菌的优势属为Phomopsis、Paraconiothyrium、Phoma和Colletotrichum,大量存在于叶、茎和树皮中。山胡椒茎与树皮、茎与叶及叶与树皮间内生真菌的相似性系数分别为0.27、0.19和0.18,显示树皮和叶之间以及树皮和茎之间内生真菌的组成极不相似。研究结果表明:山胡椒体内存在大量的内生真菌,其茎、叶和树皮的内生真菌菌群组成具有一定程度的多样性和差异性,且内生真菌的分布具有组织特异性。

泽兰化学成分的研究(II)

目的 对泽兰 (LycopuslucidusTurcz .)化学成分进行研究 ,分离并鉴定化合物。方法 采用现代层析分离技术进行化学成分的分离 ,根据理化性质和光谱方法确定所分离化合物的结构。结果 分离得到 6个化合物 ,分别为 2α -羟基熊果酸(VIII) ,胡萝卜苷 (IX) ,原儿茶醛 (X) ,原儿茶酸 (XI) ,咖啡酸 (XII) ,迷迭香酸 (XIII)。

一种大鼠急性心力衰竭动物模型的建立方法

目的 建立一种简便易行的大鼠急性心力衰竭动物模型复制方法。方法选用体重280～350g的雄性sD大鼠，麻醉后于舌下静脉快速推注盐酸普鲁帕酮注射液10．5，mg／kg，观察记录造模后1小时内动物心率、左心室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）、左心室内压最大下降速率（-dp／dtmax）。结果大鼠造模后数秒内心率即显著减少，＋dp／dtmax显著下降，-dp／dtmax显著上升，持续数十分钟。与空白组比较有极显著性差异。参附注射液和白附片水煎液显著恢复模型动物心率、＋dp／dtmax、-dp／dtmax，与模型组比较有显著性或极显著性差异。结论采用普鲁帕酮注射液复制大鼠急性心阳虚衰动物模型是一种简便可靠的方法。

HPLC-ELSD法测定三种植物基原金线莲的金线莲苷含量

建立HPLC-ELSD法,测定三种植物基原金线莲中金线莲苷含量。采用phenomenex NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(92∶8,V/V)为流动相进行等度洗脱,流速为0.8 m L/min,柱温室温,ELSD雾化室温度为70℃,氮气流速为1.5 L/min。实验结果表明,金线莲苷进样量在76.02~2432.64μg/m L范围内线性良好(r=0.9991);精密度、稳定性、重复性实验的RSD均≤3%;平均加样回收率为97.55%,RSD为1.50%(n=6)。33批次金线莲的金线莲苷含量在6.37%~22.66%之间,平均含量为15.00%,存在较大的差异(RSD=26.29%)。该方法快速、简便,结果准确、可靠,适用于金线莲中金线莲苷的定量分析。

川芎和阿斯匹林治疗短暂性脑缺血发作的对照研究

短暂性脑缺血发作(Transient ischemicattacks,TIA)是指短暂性、可逆性、局灶性脑血液循环障碍,与完全性脑卒中关系密切,人们把它视为脑卒中的先兆或“早期警号”。

青葙子药材的HPLC指纹图谱分析

目的:研究不同产地青葙子药材的HPLC指纹图谱,为青葙子药材的鉴别及质量控制提供依据。方法:采用Elite Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1mL.min-1,以蒸发光散射检测器(ELSD)检测,记录70 min色谱图。结果:22个不同产地青葙子药材的指纹图谱相似度较高,有12个共有峰,各共有峰之间的分离度较好;聚类分析将产于我国中部地区的青葙子聚为1类,而产于我国南部地区的青葙子被聚为另1类。结论:青葙子药材指纹图谱的特征性及专属性强,可用于青葙子药材的鉴别及质量控制;不同产地青葙子的化学组成存在一定差异,固定产地来源对保障青葙子药材质量的稳定性极为重要。