蛋白质组分析中蛋白质分步提取方法的建立

利用细胞裂解液充分溶解细胞蛋白质是成功进行蛋白质组分析的先决条件 .尝试利用三步提取法 ,即以三种溶解性能不同的裂解液分步提取细胞中的蛋白质组 ,并分别进行二维聚丙烯酰胺凝胶电泳 (two dimensionalpolyacrylamidegelelectrophoresis,2 DPAGE)分离 .通过对 2 DPAGE蛋白质图谱的比较 ,发现其与常规方法相比 ,具有蛋白质提取率高、双向电泳 (two dimensionalelectrophoresis,2 DE)分辨率高等优点 .

高效毛细管电泳法同时测定4种喹诺酮类药物

用高效毛细管电泳法分离测定４种喹诺酮类药物：盐酸洛美沙星、依诺沙星、盐酸环丙沙星、氧氟沙星．用５０ｍｍｏｌ／Ｌ硼砂—磷酸盐缓冲液（ｐＨ８．５），运行电压１８ｋＶ，２１４ｎｍ检测，压差法进样１０ｃｍ，１０ｓ．以咖啡因为内标定量，线性范围分别为：氧氟沙星和盐酸环丙沙星２０～１００ｍｇ／Ｌ，依诺沙星２４～１２０ｍｇ／Ｌ，盐酸洛美沙星２０．８～１０４ｍｇ／Ｌ．峰面积之比与样品浓度线性回归，ｒ＞０．９９９５．最低检测限为０．４～０．４８ｍｇ／Ｌ．

仪器分析课程中的柱色谱实验——大孔吸附树脂分离纯化中药栀子中的栀子苷单体

介绍一个操作简便、快速、经济、环保的柱色谱分离方法,适用于分析化学(仪器分析)课程中的柱色谱实验教学。通过该实验有助于学生理解柱色谱实验的基本操作及实验条件优化方法,了解不同浓度的洗脱液对分离效果的影响,从而熟悉和掌握(大孔吸附树脂)柱色谱分离纯化中药包括天然产物活性成分的基本原理及实验技能。

知母药材高效液相指纹图谱研究

用高效液相色谱法建立了知母药材的指纹图谱分析方法。采用ZorbaxEclipseXDB C18色谱柱(5μm,4.6×250mm,Agilent),流动相为乙腈和25mmol/LKH2PO4缓冲液,梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温为25℃;检测波长257nm。确定了8批不同产地知母药材甲醇提取部分6个共有峰,各产地药材指纹图谱与对照指纹图谱相似度良好(>0.9),可以用来作定性研究。方法准确可靠,为提高知母药材质量控制标准提供参考。

芦笋总黄酮及5种黄酮苷成分的体外抗氧化活性研究

目的研究芦笋总黄酮及其5种黄酮苷的抗氧化活性。方法以维生素C为阳性对照,采用比色法测定芦笋总黄酮和5种黄酮苷对.OH、O2-和DPPH.的清除作用以及对大鼠红细胞氧化溶血的抑制作用。结果芦笋总黄酮和5种黄酮苷对3种自由基均有明显的清除作用,对大鼠红细胞氧化溶血也有较强的抑制作用。从5种黄酮苷对.OH的IC50结果来看,抗氧化能力为芦丁>槲皮素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷>水仙苷>异鼠李素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷>烟花苷。结论芦笋总黄酮和5种黄酮苷体外抗氧化活性明显,且存在明显的量效关系。

HPLC法测定酸模属植物根中蒽醌类成分的含量

目的 :考察酸模属植物根中蒽醌类成分的含量 ,以评价其药用价值。 方法 :采用 HPL C法对 5种酸模属植物根及 3个不同产地羊蹄根中的蒽醌类成分进行含量测定。结果 :该属 5种植物根中蒽醌类成分的含量范围分别为 :大黄素 0 .0 5 1%～0 .30 3%、大黄酚 0 .0 95 %～ 0 .32 0 %、大黄素甲醚 0 .0 2 5 %～ 0 .142 % ;3个不同产地羊蹄根中的蒽醌类成分的含量范围分别为 :大黄素 0 .0 5 1%～ 0 .12 5 %、大黄酚 0 .12 7%～ 0 .193%、大黄素甲醚 0 .0 49%～ 0 .0 96 %。结论 :巴天酸模及羊蹄根中的蒽醌类成分含量相近 ,从化学上支持两者都作为“羊蹄”入药的传统用法 ;不同产地及生境的羊蹄根中 ,蒽醌类成分含量存在差异 ,3种蒽醌类成分以南京产羊蹄为最高 ;金不换及酸模根中蒽醌类成分较高 ,而齿果酸模中各成分含量均较低。

芦笋水解氨基酸的测定

目的测定芦笋中的水解氨基酸。方法新鲜芦笋匀浆液加盐酸水解后得到的过滤液,采用HPLC-AccQ-Tag法进行分析,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)为衍生试剂进行柱前衍生,色谱柱为DiamonsilC18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为磷酸-三乙胺-水(0.3∶0.5∶100),流动相B为乙腈-水(60∶40),进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长为248 nm,柱温37℃。结果 11种氨基酸的线性回归方程r值为0.998 8～0.999 9,平均回收率为99.31%～100.44%(RSD为1.52%～2.41%,n=6)。结论该法简单、准确、重复性好,可用于芦笋水解氨基酸的测定。

不同产地短瓣金莲花中黄酮苷的测定

目的考察不同产地短瓣金莲花药材中3种黄酮苷的量。方法采用HPLC同时测定短瓣金莲花中槲皮素-3-O-新橙皮糖苷、荭草苷及牡荆苷的量。结果不同产地短瓣金莲花药材中槲皮素-3-O-新橙皮糖苷和荭草苷的量有较大差异。结论所建立的分析方法准确可靠,可用于短瓣金莲花药材质量控制。本研究为短瓣金莲花的资源利用及质量控制提供了一定的科学依据。

顶空气相色谱法测定奥利司他中残留溶剂

目的建立奥利司他原料药中有机溶剂残留量的测定方法。方法采用顶空进样毛细管气相色谱法,HP-IN-NOWAX毛细管柱（30 mm×0.32 mm,0.25μm）,以氮气为载气,用FID检测器,测定奥利司他原料药中正己烷、正庚烷、甲醇和乙腈的残留量。结果 4种有机溶剂完全分离,浓度在考察范围内与峰面积具有良好的线性关系,r为0.999 0~0.999 3,平均回收率为97.1%~101.9%,精密度RSD均小于10%,最低检出限为0.009~1.833μg/ml。结论本法快速、灵敏、准确,可用于本品中4种有机溶剂残留量的测定。

药品包装材料中锡迁移量的石墨炉原子吸收光谱法测定

建立了石墨炉原子吸收光谱法测定模拟不同极性(10%乙醇、正庚烷、异辛烷)的浸提条件下药品包装材料中锡的迁移量。模拟浸提后,挥干有机溶剂,消化回收后测定,用硝酸钙为基体改进剂,3%硝酸为辅助剂。锡在5～25ng/ml低浓度条件下,线性良好(r=0.9995)。10%乙醇、正庚烷、异辛烷3种浸提溶剂的回收率分别为95.6%、96.2%和98.4%,检测限分别为0.4、0.3和0.7ng/ml。

反相高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠血浆中延胡索乙素的浓度

目的：建立大鼠血浆中延胡索乙素浓度的高效液相色谱-荧光检测法。方法：色谱柱为Phenomenex C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈-0．1％磷酸（用三乙胺调至pH6．15）（60：40）；柱温：30℃；流速：1．0mL·min^-1；荧光检测器：激发波长：231nm，发射波长：324nm：进样量：60μL.结果：标准曲线的线性范围为5～1000ng·mL^-1（r=0．9989，n=8），低、中、高3种浓度的绝对回收率分别为（90．1±2．4）％、（94．1±2．7）％、（93．6±3．0）％；方法回收率分别为（93．4±1．2）％、（96．1±2．7）％、（95．8±1．5）％；日内精密度RSD≤2．3％，日间精密度RSD≤4．0％。本方法的检测限0．5ng·mL^-1。结论：本方法快速、简便、灵敏、准确.

基于“成分-药效”关联分析的六味地黄丸质量控制方法

本文以中药复方制剂六味地黄丸为研究示例,分别进行六味地黄丸药效成分明确化鉴别、典型药理模型的药效实验、成分与药效的关联分析,共鉴别出六味地黄丸中16个成分.通过成分与药效的关联性分析,得出4个与典型药理模型药效相关的成分.建立了指标性成分的含量测定方法学,通过"成分与药效"的关联性分析所得出指标性成分的含量测定方法,可实现对中药复方制剂六味地黄丸的质量控制.

HPLC法同时测定芦笋黄酮中5个黄酮苷的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定芦笋黄酮中槲皮素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷、烟花苷和水仙苷的含量。方法:采用Diamonsil(钻石)C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.1%醋酸水(8∶16∶76),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长260 nm。结果:芦笋黄酮中槲皮素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖-芸香糖苷、烟花苷和水仙苷浓度分别在30.38～70.88μg.mL-1(r=0.9996)、60.75～141.75μg.mL-1(r=0.9995)、29.40～68.60μg.mL-1(r=0.9997)、29.63～69.13μg.mL-1(r=0.9996)、18.00～42.00μg.mL-1(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系。方法的加样回收率(n=6)分别为99.4%,99.2%,99.2%,102.6%,101.4%;RSD分别为2.0%,1.6%,1.8%,1.3%,2.2%。结论:本法快速、简便、准确,重复性好,适用于芦笋黄酮的质量控制。

山楂总黄酮对大鼠离体血管功能的影响及其机制

目的研究山楂总黄酮对大鼠离体血管功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用大鼠离体血管灌流模型,观察山楂总黄酮对大鼠离体血管舒张和收缩功能的影响。结果山楂总黄酮对大鼠离体血管具有浓度依赖性地舒张作用,还可浓度依赖性地抑制苯肾上腺素、CaCl2引起的血管收缩,对无钙液中肾上腺素引起的血管收缩也有抑制作用。非选择性钾通道抑制剂、内向整流钾通道抑制剂可部分阻断山楂总黄酮引起的血管舒张作用。结论山楂总黄酮对大鼠离体血管具有舒张作用,该作用主要是通过抑制细胞外Ca2+内流,抑制细胞内贮Ca2+释放,以及激活非选择性钾通道和内向整流钾通道来实现的。