丙型肝炎病毒的血清抗体检测及基因组cDNA扩增

采用抗HCV-N14和抗HCV-C100-3抗体试剂盒检测丙型肝炎(丙肝)高危人群血液标杯1544人份。丙肝抗体阳性率为:输血后肝炎64.5％、血液透析病人28.6％、肝硬变19.1％、肝细胞癌10.5％、临床非甲非乙型肝炎7.3％、献血员4.1％和医院工作人员2.6％,表明丙型肝炎病毒(HCV)感染在我国相当严重。抗HCV-N4抗体出现较早,且与多聚酶链反应PCR的基因诊断有较好的相关性,是判定HCV感染及其传染性的重要指标。

枸杞子多糖、黄芪多糖、刺五加多糖和鼠伤寒杆菌内毒素多糖对LAK活性的调节作用

采用^(125)IUdR释放法测定了不同浓度的枸杞子多糖、黄芪多糖、刺五加多糖及鼠伤寒杆菌内毒素多糖对不同剂量rIL-2激活的杀伤细胞(LAK)抗肿瘤活性的影响,发现4种多糖在一定浓度条件下均可在体外增强LAK活性。枸杞子多糖在0.01～0.1mg·ml^(-1)、黄芪多糖和刺五加多糖在0.01mg·ml^(-1)时增强作用最显著(P<0.001),内毒素多糖在0.0001～0.1μg·ml^(-1)时可增强LAK活性,在0.0001μg·ml^(-1)时最显著。4种多糖浓度过低或过高则不能增强,甚至抑制LAK活性。

中国人丙型肝炎病毒核心基因cDNA的克隆与序列分析

利用本室设计的引物对我国人丙型肝炎病毒核心蛋白基因进行了cDNA合成和扩增,获得了一长534bp的cDNA片段,定名为Q534。将此片段克隆到pUC18质粒中,并进行了序列分析。结果表明所获得的cDNA克隆位于Chiron序列的320-853位,此序列与原型相应序列在核苷酸和氨基酸水平上的同源性分别为90.9％和97.6％,与日本HCV-J株和BK株相应序列的核苷酸同源性为96.8％和97.0％;氯基酸的同源性为98.2％和98.8％。序列比较结果表明此序列属HCVⅡ组。

中国人丙型肝炎病毒基因组λgtll cDNA库的免疫筛选与鉴定

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是散发性及输血后肝炎的主要病原体,易致慢性肝炎、肝硬变或肝细胞癌。为了研究中国HCV基因组的变异及结构特征,我们从中国丙型肝炎(丙肝,Hepatitis C,HC)患者血浆中提取HCV基因RNA,用随机引物合成HCV cDNA并构建其λgtll cDNA库。对此基因库进行了免疫筛选,并对2个阳性克隆(Q349和Q653)在pUC18质粒中进行了亚克隆。序列分析结果表明:Q349和Q653分别来自HCV基因组核心(C)区(第554～902位)和非结构3(NS3)区(第4175～4827位)。Q349和Q653与HCV原型相应序列在核苷酸和氨基酸水平上的同源性分别为86.8％,80.2％和97.3％,93.1％;与日本HCV相应序列间有更高的同源性,故属于HCVⅡ组。特异性灾验表明,Q349和Q653的编码多肽可与HC人群血清特异反应而不与正常人血清反应,且Q653与中国HC血清反应的阳性率(95.8％)比日本HC血清的阳性率(85.7％)高。表明根据中国HCV基因序列(特别是非结构区序列)设计引物或合成多肽将更适合中国人群HCV感染的检出。

单克隆抗体分析霍乱弧菌抗原性的研究

用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株E1Tor霍乱弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究;同时与4种常规分型方法进行对比试验。用12株McAb可将55株E1Tor霍乱弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McAb型。其中11株McAb 2B_1H_1F_3能识别所有55株E1Tor弧菌和大部分突变株霍乱弧菌,表明有种的特异性;其余4株McAb与各型霍乱弧菌的抗原反应均有差异,对这些菌株的反应百分比各不相同,表明可能存在着亚型或亚群。