肌肉游离移植后MAFbx表达及肌肉功能实验研究

目的观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系。方法雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250±25)g。随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一侧不行手术作为对照侧。术后观察大鼠一般情况,于术后1、2、4、10、15和30周,分别取6只大鼠测量实验侧和对照侧股薄肌肌肉收缩能力、肌湿重维持率,HE染色观察肌纤维横截面积,实时定量PCR检测MAFbx/Atrogin-1mRNA相对表达量,Western blot检测MAFbx蛋白表达。结果36只大鼠全部成活,切口愈合好,实验侧肢体功能无障碍。实验侧肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉最大单收缩力维持率和肌肉强直收缩力维持率均呈先降低(术后1～4周)后增加(术后4～30周)的趋势。MAFbxmRNA相对表达量术后2周最高,为对照侧7倍;术后15～30周逐渐下降,为对照侧1.1～1.5倍;各时间点实验侧与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblot检测结果显示术后1～15周,实验侧肌肉内MAFbx蛋白相对表达量与对照侧相比,差异均有统计学意义(P<0.05);术后30周差异无统计学意义(P>0.05)。肌湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率分别与最大单收缩力维持率和最大强直收缩力维持率的相关系数为0.95、0.75和0.93、0.68(P<0.05)。MAFbxmRNA及蛋白相对表达量分别与肌肉湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率、最大单收缩力维持率、最大强直收缩力维持率的相关系数为—0.62(P<0.05)、—0.45(P>0.05)、—0.72(P<0.05)、—0.78(P<0.05)和—0.95(P<0.05)、—0.82(P<0.05)、—0.89(P<0.05)、—0.54(P>0.05)。结论移植肌肉功能降低与肌肉萎缩密切相关。MAFbxmRNA和蛋白表达增高,尤其在获得神经支配后4～15周仍持续升高,可能是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的一个联系点。