转铁蛋白受体与血液系统的关系

铁在能量代谢、DNA合成及细胞生长的催化反应中起着重要的作用。人类的铁由转铁蛋白运输,后者与细胞表面转铁蛋白受体(Transferrin Receptor,TfR)特异结合,通过细胞胞饮作用进入细胞,在酸性囊泡中将铁释出,发挥其生物学功能。去铁转铁蛋白又返回细胞表面,进入再循环。由于1979年提纯了人TfR,以及稍后又获得了多株抗人TfR单克隆抗体,人们对TfR的认识有了深入的了解。TfR与血液系统的关系在基础与应用方面的研究得到广泛开展,并取得了可喜的进展。本文拟就此作一综述。

血液系统恶性疾患外周血小板四项参数观察

血液系统恶性疾患外周血小板四项参数观察周建平，潘玲芝，侯健，黄隆安白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等恶性血液病的病态造血致使血小板异常，且白血病与淋巴瘤常可侵犯骨髓。观察血小板计数（ＰＬＴ）、血小板压积（ＰＣＴ）、血小板平均体积（ＭＰＶ）和血小板分布宽度...

硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的建立及其差异表达蛋白的飞行时间质谱分析

目的:建立硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株,探讨硼替佐米敏感和耐药多发性骨髓瘤细胞株在蛋白质组水平上的差异。方法:采用硼替佐米浓度递增法诱导NCI-H929细胞株产生耐药株。采用流式细胞术比较亲本NCI-H929和NCI-H929B的细胞周期,双向电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析两者间的差异蛋白表达情况。采用Westernblot方法对部分鉴定结果进行验证。结果:采用浓度递增法自骨髓瘤细胞系NCI-H929建立了硼替佐米耐药株NCI-H929B。MTT法检测硼替佐米对亲本NCI-H929和NCI-H929B 24 h的IC50,其分别为20.7 nmol/L和487.4 nmol/L,耐药倍数为23.5。生长曲线及流式细胞术分析显示NCI-H929亲本和NCI-H929B的生长曲线和细胞周期分布无显著性差异。与亲本NCI-H929细胞的2-DE相比,NCI-H929B细胞中有11个蛋白点表达明显上调,6个明显下调。对这17个蛋白质点进行MALDI-TOF-MS分析,共获得了17个肽质量指纹图谱(PMF)。将PMF质量数据通过Aldente软件查询SWISS-PROT数据库,根据匹配片段及氨基酸序列覆盖率等,初步鉴定出14种蛋白质。Western blot验证其中一种蛋白质(蛋白DJ-1),结果与双向电泳鉴定结果基本一致。结论:通过浓度递增法可建立硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞株。双向电泳结果提示这些差异表达的蛋白质可能与多发性骨髓瘤对硼替佐米耐药的机制有关。

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估?

2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞系增殖与凋亡的影响

为了探讨2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞系增殖及凋亡的影响,并观察其与地塞米松、反应停、三氧化二 砷、唑仑膦酸钠等药物联合时的协同作用,采用台盼蓝染色法检测细胞活力,应用BrdU掺入法检测浆细胞标记指 数(PCLI),DNA片段原位末端标记(TUNEL法)检测凋亡细胞。药物协同作用判断标准按金氏公式计算Q值。结 果表明,7株骨髓瘤细胞系NCI-H929、HS-sultan、KM3、SKO-007、CZ-1、U266、LP-1经1、4、8、12、16μmol／L 2-甲氧基 雌二醇分别作用12、24、36和48小时后细胞活力明显受抑制,呈现时间剂量依赖性,经统计学分析,差异显著(P <0.05)。各细胞系对2-甲氧基雌二醇敏感性不同,其IC50介于(20.8±0.27)μmol／L与(34.1±0.57)μmol／L之 间。1、4、8、12、16μmol／L 2-甲氧基雌二醇分别作用12、24、36和48小时可诱导骨髓瘤细胞系凋亡,凋亡率介于 9％-33％之间,呈现时间和剂量依赖性,经统计学分析,差异显著(P<0.05)。经12μmol／L 2-甲氧基雌二醇作用 24小时后浆细胞标记指数(PCLI)由作用前平均(30.14±4.28)％下降到作用后的(14.71±6.27)％,差异显著(P <0.05)。2-甲氧基雌二醇与药物联合作用后计算Q值介于1.13-1.43之间,具有协同作用。结论:2-甲氧基雌二 醇可抑制骨髓瘤细胞生长,并可诱导骨髓瘤细胞凋亡,与地?

VTD方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤36例

目的观察硼替佐米联合沙利度胺、地塞米松(VTD)方案治疗多发性骨髓瘤的疗效和不良反应。方法采用VTD方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤患者36例。结果36例患者平均完成3.8个疗程,总有效率为80.6%。主要不良反应为血小板减少、乏力、周围神经病变等。结论VTD方案治疗复发难治性多发性骨髓瘤的疗效好,且不良反应少、易耐受。

UbcH10基因沉默对多发性骨髓瘤U-1996细胞增殖和凋亡的作用研究

目的采用脂质体法转染siRNA的方法沉默多发性骨髓瘤U-1996细胞中的UbcH10基因,研究基因沉默后U-1996细胞增殖活性及凋亡等生物学特性的变化情况。方法根据UbcH10基因信息,设计针对UbcH10基因编码序列(CDS)区的siRNA序列。通过脂质体法转染相关siRNA序列至多发性骨髓瘤U-1996细胞。在转染siRNA后48h,采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹法检测U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA和其蛋白水平。选取未转染siRNA序列的空白组和转染阴性siRNA序列组作为试验对照,采用CCK-8法检测转染siRNA序列后24、48、72hU-1996细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测48h后U-1996细胞的凋亡情况。结果通过脂质体法成功转染构建siRNA序列至U-1996细胞。转染后的U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA及蛋白表达情况较转染前均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。和对照组相比,沉默UbcH10基因后U-1996细胞的增殖活性下降,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡率上升,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论干扰UbcH10基因表达可显著抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖活性并增加细胞凋亡。

多发性骨髓瘤患者外周血白细胞糖皮质激素受体的变化

目的：探讨多发性骨髓瘤（ＭＭ）外周血白细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）表达水平与糖皮质激素疗效关系。方法：应用放射配体结合一点分析法检测了２３例ＭＭ和１０例正常对照外周血白细胞ＧＲ表达水平。结果：ＭＭＧＲ水平，初诊未化疗组（６例）（４７６７±１４６４）位点／细胞，部分缓解组（９例）（５９８９±１８９４）位点／细胞，与正常对照组（１０例）比较均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。难治性ＭＭ组（２１１７±８３９）位点／细胞，明显低于其他组（Ｐ＜０．０１）。结论：ＭＭ患者外周血白细胞ＧＲ检测有助于预测糖皮质激素疗效。

不典型毛细胞白血病1例报告并文献复习

目的:探讨毛细胞白血病(HCL)不典型特征的鉴别思路。方法:报告1例不典型HCL的临床特征、诊断、治疗及预后情况,简述HCL诊断的最新进展。结果:结合患者临床特征和各项辅助检查结果,对不典型特征进行进一步鉴别,确诊为HCL。结论:HCL诊断时应结合患者临床特征和辅助检查,遇不典型特征应作进一步鉴别以防出现误诊、漏诊。

应用集落刺激因子后急非淋白血病病情加重三例报告

应用集落刺激因子后急非淋白血病病情加重三例报告周建平，侯健，黄隆安１临床资料例１，男，６８岁。经骨穿示急性单核细胞性白血病（ＡＭＬ）Ｍ５６型，原单＋幼单０．０７９，第３次入院化疗。入院查外周血ＷＢＣ１．４×１０９／Ｌ，Ｎ０．３８，予ＤＡＨ方案化疗后出...

肿瘤溶解综合征的危险因素及治疗(附11例报告)

目的:探讨发生肿瘤溶解综合征的危险因素和治疗。方法:对11例化疗早期发生肿瘤溶解综合征的肿瘤患者临床特点及化疗前后各项实验生化指标进行分析。结果:初次治疗、男性、年龄轻、肿瘤负荷高、化疗前有肾功能不全、血尿酸水平高、血乳酸脱氢酶高、存在脱水和酸性尿等为发生肿瘤溶解综合征的危险因素。结论:对存在发生肿瘤溶解综合征的危险因素的患者,必须高度重视和早期采取适当的治疗措施。

PAD与TAD方案治疗新诊断多发性骨髓瘤患者的疗效比较及预后分析

目的 评价PAD方案（硼替佐米＋表柔吡星＋地塞米松）和TAD方案（沙利度胺＋表柔吡星＋地塞米松）诱导治疗后多发性骨髓瘤患者的疗效及预后,并评估细胞遗传学分层及自体造血干细胞移植对PAD诱导治疗患者预后的影响.方法 前瞻性研究191例自2008年5月至2013年12月经第二军医大学长征医院血液科及上海市闸北区中心医院血液科确诊的多发性骨髓瘤患者,非随机进入PAD诱导治疗组（PAD组,132例）和TAD诱导治疗组（TAD组,59例）,诱导后根据患者意愿分别按自体外周造血干细胞移植或原诱导方案巩固治疗,分析两组的诱导后疗效及生存差异,并评估细胞遗传学分层及自体造血干细胞移植对PAD诱导治疗患者的预后影响.结果 PAD与TAD组诱导后的缓解率分别为84.4％ （108/128）和69.5％（41/59）,差异有统计学意义（P=0.011）;获得非常好的部分缓解（VGPR）以上疗效率分别为70.3％（90/128）和32.2％ （19/59）,差异有统计学意义（P＜0.001）;获得接近完全缓解/完全缓解（nCR/CR）率分别为68.0％（87/128）和25.4％（15/59）,差异有统计学意义（P ＜0.001）.PAD组与TAD组患者的中位无进展生存（PFS）期及总生存（OS）期差异尚无统计学意义（P =0.223、0.989）.接受PAD诱导治疗的132例患者的生存分析显示：荧光原位杂交（FISH）高危组患者的中位PFS和OS均短于FISH低危组（15.2比19.1个月,41.2个月比未到达）,且OS差异有统计学意义（P =0.098、0.017）.根据巩固方式进一步的亚组生存分析显示,在FISH高危组,诱导后接受造血干细胞移植巩固患者的中位PFS期显著长于诱导后继续原诱导方案巩固的患者（17.8比14.6个月,P=0.029）,而两组之间的总生存期暂差异无统计学意义（P=0.840）.在FISH低危组,诱导后接受造血干细胞移植巩固患者与接受原诱导方案巩固患者间中位PFS及OS期差异均无统计学意义（P =0.131、0.294）.结论 PAD方案诱导治疗总缓解率及高质量缓解率均显著好于TAD.且在以PAD诱导后,以FISH为基础的细胞遗传学分层可以区分高危及低危多发性骨髓瘤患者的预后.对于FISH高危患者,接受自体造血干细胞移植可以延长其PFS.

初诊多发性骨髓瘤合并肾功能不全患者的临床分析

目的 分析初诊多发性骨髓瘤（MM）及MM合并肾功能不全（MM-RI）患者的临床特点.方法 回顾性分析3家医院2010年1月1日至2012年6月30日收治的897例初诊MM患者中MM-RI患者的临床和病例特点、生存情况及影响初诊MM患者预后的因素.结果 897例初诊MM中有177例为MM-RI患者,占总例数的19.7％（177/897）.MM-RI患者平均年龄为59岁,年龄＞65岁的占28.2％（50/177）,男性占70.6％（125/177）,M蛋白分型中IgDλ型占17.2％（30/174）、轻链型占27.6％（48/174）,DSⅢ期（167/176）及ISSⅢ期（166/175）占94.9％.相比于MM肾功能正常（MM-RN）患者,MM-RI患者分型中IgD-λ型及轻链型比例高,分期中DS和ISSⅢ期比例高;骨髓浆细胞、白细胞和尿酸水平高;血红蛋白和J血小板水平低（均P ＜0.05）.中位随访24（2～114）个月,MM-RI及MM-RN患者的中位无进展生存期分别为28.0和29.0个月,差异无统计学意义（P =0.457）;MM-RI及MM-RN患者的预期中位总生存期分别为44.0和59.2个月,差异有统计学意义（P =0.033）.Cox回归多因素分析显示年龄、乳酸脱氢酶、β2微球蛋白、一线方案是否含硼替佐米、是否曾接受移植是MM患者的独立预后因素.结论 MM-RI与MM-RN患者有着不同的临床特点,年龄、乳酸脱氢酶、β2微球蛋白及一线方案是否含硼替佐米、是否曾接受移植为初诊MM患者的独立预后因素.

修订的国际分期系统（R-ISS）在初诊多发性骨髓瘤患者预后判断中的意义

目的探讨修订的国际分期系统（R-ISS）在真实世界中对初诊多发性骨髓瘤（MM）患者的适用性。方法回顾性分析2010年5月至2015年4月新诊断的202例MM患者的临床资料。所有患者均接受基于硼替佐米或沙利度胺为主的方案诱导治疗至少4个疗程。以国际分期系统（ISS）为对照，分析R-ISS的预后意义。结果202例患者中，男124例，女78例，中位年龄57（28~81）岁。中位随访31个月，采用R-ISS分期，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者分别为56、108、38例，中位总体生存（OS）时间分别为未达到、61个月和38个月，三期间差异有统计学意义（P=0.001）；采用ISS分期，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者分别为62、70、70例，中位OS时间分别为58、52和40个月，三期间差异有统计学意义（P=0.001）。采用Cox预后风险模式分析发现：R-ISS预后Ⅲ对Ⅰ、Ⅱ对Ⅰ期的HR值分别为9.606和4.038，P值分别为0.008和0.029；ISS预后的HR值分别为4.127和2.877，P值分别为0.070和0.005。亚组分析结果显示，未行移植（P=0.003）、接受硼替佐米为主的方案治疗（P=0.010）及年龄小于65岁（P=0.001）R-ISS不同分期患者的OS时间差异均有统计学意义。结论R-ISS能更好地区分初诊MM患者的OS时间，尤其对于接受硼替佐米治疗为主、年轻、未行移植患者的预后评估价值较为突出，对中国MM患者具有重要的预后价值。

沙立度胺治疗多发性骨髓瘤疗效影响因素分析

多发性骨髓瘤（MM）是一种浆细胞恶性克隆增生性疾病，目前仍认为是一种不可治愈的疾病。上世纪90年代末，沙立度胺被证实具有抗骨髓瘤作用，逐渐在临床上得到广泛应用。我院用沙立度胺治疗的MM患者进行回顾性总结及分析其疗效的影响因素，为其临床应用提供参考。

《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2011年修订）》诊断部分的解读

《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2011年修订）》终于与读者见面了。此版指南参照国际上有关指南或共识做了不少更新。在诊断部分，根据《WHO造血和淋巴组织肿瘤分型》的诊断标准，删除了2008版中关于主要标准、次要标准的描述，强调在发现血清和（或）尿液M成分的基础上，倘能证实克隆性浆细胞的存在，即可诊断为多发性骨髓瘤（MM）。

细胞色素酶CYP2C19代谢对沙利度胺体外抗骨髓瘤作用的影响

目的研究人肝微粒体代谢对沙利度胺体外抗骨髓瘤作用的影响，并探讨细胞色素酶CYP2C19在其中的作用。方法以沙利度胺或与人肝微粒体在体外孵育后分别处理多发性骨髓瘤（MM）细胞株U266、NCI—H929、RPMI8226、LP－1和Cz—1细胞，采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术测定细胞周期和细胞凋亡。结果沙利度胺对MM细胞活力无明显抑制作用，10、50和100μg/ml沙利度胺处理5株MM细胞后的细胞活力分别为96．2％-103．7％、96．3％～103．7％和97．9％-106．5％，与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。但与人肝微粒体孵育后，沙利度胺明显抑制MM细胞活力，且该作用呈剂量依赖性。10、50和100μg/ml沙利度胺与人肝微粒体共孵育后对5株MM细胞活力抑制率分别为12．2％～22．9％、25．9％～36．4％和34．9％～46．3％，与对照组比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）。100μg/ml沙利度胺与人肝微粒体孵育后，5株MM细胞凋亡的比例增加达18．5％～32．5％。在孵育体系中加入CYP2C19特异性抑制剂奥美拉唑后，沙利度胺与人肝微粒体孵育后对MM细胞活力的抑制作用减弱，5μmol／L和10μmol／L奥美拉唑对100μg/ml沙利度胺经肝微粒体孵育后抑制细胞活力的逆转率分别为7．5％～21．9％和19．1％～38．3％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论沙利度胺的体外抗骨髓瘤作用需要人肝脏代谢，细胞色素酶系中的CYP2C19参与了这一过程。

多发性骨髓瘤治疗的若干问题

人类认识多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）已经有150多年的历史了，但直到20世纪60年代才开始对其进行有效治疗，且多年来收效甚微，完全缓解（complete remission，CR）率不到5％，MM患者的中位生存期不到3年。近年来，随着对MM分子生物学研究的深入，抗骨髓瘤治疗新药不断涌现，MM的治疗取得了长足的进步。