胶质细胞源性神经营养因子体内转基因对皮质脊髓束再生的影响

目的 通过非病毒载体阳离子脂质体介导 ,探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因体内转染对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生的影响。方法 采用NystrOm法制备大鼠胸髓后路压迫损伤模型 ,压迫重量为 5 0 g ,时间为 5min ,造成大鼠胸段脊髓急性重度损伤。用微量注射器将阳离子脂质体DC Chol 6μl和重组质粒pEGFP GDNFcDNA 2 μg混合后注入大鼠损伤脊髓。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因后在局部的表达 ,通过辣根过氧化物酶 (HRP)顺行追踪技术和神经微丝 (NF)免疫组织化学活性的变化来评价GDNF基因体内转染对大鼠皮质脊髓束再生的影响。结果 GDNF基因体内转染 1周后显示在基因注射局部有转录和蛋白水平表达。脊髓损伤后 4周在损伤区可见较多的皮质脊髓束再生 ,损伤区NF阳性轴突数 ( 5 2 4.33± 80 .5 5 ) /低倍视野较对照组 ( 30 9.84± 5 6.65 ) /低倍视野明显增多( P <0 .0 1)。结论 阳离子脂质体介导GDNF体内转基因能促进近端皮质脊髓束再生和神经骨架蛋白的修复。