MTT比色分析法快速测定肝癌细胞株对化疗药物敏感性的方法研究

选用了人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞株对ＭＴＴ比色分析法用于体外抗肝癌化疗药敏感试验中的几个变量进行了研究讨论。结果显示：ＭＴＴ甲服产物最大吸收波长为５７０ｎｍ；ＭＴＴ的用量以每孔２０μｌ（５ｍｇ／ｍｌ）为最宜；ＭＴＴ孵育６小时所得光吸收度（Ａ）值最高；甲产量与细胞密度有好的线性关系；四种化疗药（阿霉素，卡铂，５一氟尿嘧啶，丝裂霉素）的作用时间以７２～９６小时为最好，且药物对细胞株的抑制率随药物浓度的增加而增加。通过试验证明，ＭＴＴ法快速、简便、经济、灵敏，可作为肝癌体外药物敏感性的测试方法。

肝癌组织中神经节苷脂谱改变的机理研究

目的：检测肝癌组织中唾液酸酶的活性，探讨肝癌组织中神经节苷脂谱改变（ＧＤ３含量增加）的机理。方法：以蓖麻凝集素Ⅱ与乳糖基的特异结合为基础，用神经节苷脂ＧＭ３作为水解底物包被于９６孔板，在唾液酸酶的作用下，糖链末端的唾液酸被切除而暴露出乳糖残基，用生物素标记的蓖麻凝集素与后者结合，再用ＡＢＣ法测定结合量即可检测唾液酸酶活性。结果：肝癌组织中不管是可溶性的还是膜结合性的唾液酸酶，其活性都明显低于其癌旁组织。结论：肝癌组织中神经节苷脂ＧＤ３增加的原因不仅与ＧＤ３合成酶活性的增高有关，还与其水解酶唾液酸酶活性的降低相关。

超声介入^（32）P内照射治疗肝癌的临床研究

自１９９４年６月至今我们对５例临床诊断为原发性肝癌的患者进行了超声引导下经皮肝穿刺瘤内注射胶体磷（３２）（３２）Ｐ）内照射治疗（即超声介入（３２）Ｐ内照射治疗）。结果：①接受治疗后每例患者的肿瘤均有缩小；②（３２）Ｐ对患者骨髓无抑制作用，对肝肾功能无明显影响；③治疗后患者未发现明显并发症。

胆汁成分与胆红素钙结石形成关系的临床研究

肝内外胆管结石的发病率在国内达到4.1～51.6％,此病产生的各种并发症严重危害着病人的生命和健康。临床工作者多年来进行了卓有成效的研究,但对其病因和发病机理的认识尚未获得统一。我们对24例肝内外胆管结石病和7例非结石胆道疾患病人的胆石和胆汁中的几种主要成分行定量检测,并通过分析胆汁中有形成分变化与胆红素钙结石形成的关系,以期对胆红素钙结石的病因和机理作进一步探讨。材料和方法 1.对象随机选择临床诊断原发性肝内外胆管结石病人24例,男性11例,女性13例,最大年龄65岁,最小17岁,平均46.3岁。术中取出胆石目测按日本胃肠病学会拟定标准分类。非结石胆道疾患病人7例作为对照,男3例,女4例.平均年龄40.2岁。

肝癌行肝动脉阻断为主的综合治疗研究

作者用肝癌大白鼠作肝动脉阻断(含肝动脉结扎和肝动脉药物微球栓塞)治疗实验,结果证明肝动脉阻断能使肝癌坏死,使荷瘤动物生存期延长。其中喜树碱白蛋白微球进行化疗栓塞更优于单纯肝动脉结扎。本所自1974年1月至1990年12月对445例不能切除的肝癌病例采用肝动脉阻断为主的综合治疗措施,结果显示以肝动脉结扎加术中肝动脉栓塞加全埋入式肝动脉化疗灌注加术后放疗,以及二期切除的联合疗效最好,其1、3、5年生存率分别达到71.4％、42％、40％。

127例原发性肝癌免疫综合治疗临床研究

最近研究表明,白细胞介素2（IL-2）在体外能够诱导产生被淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）,在适当IL-2存在条件下,这些LAK细胞能对肿瘤细胞产生强大的杀伤作用。然而IL-2附加LAK细胞治疗方案毒副作用太大,不宜用于临床。

人甲胎蛋白单克隆抗体的研究和应用

60年代末,甲胎蛋白被确认为癌胚抗原。甲胎蛋白的多克隆抗体免疫检测在临床上已作为诊断原发性肝细胞癌和畸胎瘤的指标。80年代甲胎蛋白的单克隆抗体研制成功,对肝细胞分化、癌变过程的理论研究,纯化甲胎蛋白以及提供诊断试剂等,都具有重要意义。本文综述了近年来人甲胎蛋白的应用及研究进展。

CD44分子十六酰化干扰人T淋巴细胞CD3介导的信号传递的研究

证实细胞表面ＣＤ４４分子的十六酰化可能参与淋巴细胞的信号传递。方法：利用不同类型的ＣＤ４４单克隆抗体（Ｐ３Ｈ９、Ｂｕ５２、ＩＭ．７和ＧＫＷ．Ａ３），观察它们对ＣＤ２或ＣＤ３抗体刺激正常人外周血淋巴细胞增生的作用以及对ＣＤ４４分子十六酰化的影响。结果：所有这４种ＣＤ４４单克隆抗体与ＣＤ２单克隆抗体在刺激正常人外周血淋巴细胞和Ｙ．Ｊ．８Ｔ细胞增生方面有协同作用。ＧＫＷ．Ａ３和ＩＭ．７（而非Ｐ３Ｈ９或Ｂｕ５２）能够抑制ＣＤ３抗体刺激引起的细胞增生；同样，也只有ＧＫＷ．Ａ３和ＩＭ．７能够刺激细胞表面ＣＤ４４分子的十六酰化；而ＧＫＷ．Ａ３对ＣＤ３抗体刺激引起的细胞增生的抑制效应可被一种蛋白十六酰化的抑制剂变蓝菌素所逆转。结论：ＣＤ４４分子的十六酰化可干扰ＣＤ３抗体介导的信号传递。这些结果为细胞表面受体的十六酰化可能参与Ｔ细胞受体之间相互作用及信号传导作用的假说提供了实验依据。

原发性肝细胞癌的分子生物学研究进展

本文较为详细地从分子生物学角度介绍了HBV的分子结构、HBV感染和癌基因表达在原发性肝细胞癌(PHC)发生中的作用。特别着重讨论了HBV X基因产物-HB_xAg的作用。HB_xAg是一个具有广泛非特异反式激活作用的蛋白因子,可能在HBV感染和PHC发生之间起到中介物的作用。此外,还介绍了黄曲霉素和HBV感染之间的关系和PHC发生的两个模型假说。

免疫抑制剂雷抑素研究进展

雷抑素(Lef)是一种结构简单,新型强效的免疫抑制剂。其作用机理与已知免疫抑制药物完全不同,可能与降低T细胞对IL-2反应性,抑制酪氨酸激酶有关。本文介绍了雷抑素的结构、抗排斥作用及可能的作用机理。

肝硬变病程中血清甲胎蛋白含量变化与肝癌发生的关系

对106例肝硬变患者血清AFP含量进行18个月至7年时间的动态观察,分析AFP含量变化特点,探讨其变化类型与肝癌发生的关系。结果表明,血清AFP含量在较高浓度(>60μg/L)反复波动的肝硬变人群的肝癌发生率(46％)明显高于其他肝硬变人群(P<0.05)。7例后来发展为肝癌的肝硬变患者血清AFP含量开始一直在200μg/L以下,但发现肝癌前半年内,其含量每月以1.5～4倍速率上升。因此,当血清AFP含量在高浓度持续波动,或经一段时间缓慢地上升后随即迅速升高,应认真进行影像学检查,以便及早确诊肝癌。

肝癌切除术后甲胎蛋白异质体含量变化及其临床意义

作者同步观察了２６例肝癌患者在肿瘤切除术后初期血清ＡＦＰ和ＡＦＰ异质体含量变化，结果表明：１７例血清ＡＦＰ异质体随血清ＡＦＰ转阴而消失，６个月内无１例复发；３例ＡＦＰ虽未能转阴，但ＡＦＰ异质体含量明显下降，６个月内亦无１例复发；６例血清ＡＦＰ含量下降，ＡＦＰ异质体含量相对恒定，其中４例６个月内复发。我们初步认为，肝癌切除术后在观察ＡＦＰ含量变化的同时，比较ＡＦＰ异质体的变化，似能更真实地反映病情。

维生素A对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的：观察中等剂量维生素Ａ对四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导的实验性大鼠肝纤维化的影响。方法：在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的同时，给以１００ｍｇ／ｋｇ体重维生素Ａ皮下注射。检测在早（３周）、中（６周）、晚（１２周）期大鼠肝组织羟脯氨酸含量及血清中透明质酸及谷丙转氨酶水平，并观察肝脏的组织病理改变。结果：治疗组早期血清透明质酸及组织病理学的炎症程度均显著低于ＣＣｌ４对照组（Ｐ＜０．０５），中、晚期肝组织羟脯氨酸含量及晚期肝组织学纤维化程度虽低于ＣＣｌ４对照组，但相差不显著。结论：上述剂量维生素Ａ能减轻ＣＣｌ４所致大鼠的早期肝脏损害，它可能有益于减轻其后的肝纤维化。

原发性肝细胞癌患者外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞、抗体依赖细胞毒效应改变及其临床意义

作者应用单克隆抗体荧光标记流式细胞仪分析系统、微量脱氢酶释放法对121例原发性肝细胞癌(HCC)病人外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、抗体依赖细胞毒(ADCC)活性、淋巴细胞转化率和花环形成率进行了测定,HCC病人T细胞亚群有明显变化,Th细胞减少和Ts细胞增加NK、ADCC活性和淋转率有程度不同降低。宿主免疫功能变化同病期、肿瘤扩散转移密切相关。Th/Ts比值变化能够敏感反映病人免疫功能状态,是临床观测免疫功能变化的敏感指标。

原发性肝癌与乙型、丙型肝炎病毒感染的关系

用酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）对我院外科手术及病理检查证实的１５７例原发性肝癌（ＰＨＣ）进行乙型肝炎病毒血清感染标志（ＨＢＶＭ）及抗－ＨＣＶ检测，发现我国１３０例患者ＨＢＶＭ的阳性率为８８．５％，抗－ＨＣＶ阳性率１０．８％，２７例华裔印尼（印尼）患者的ＨＢＶＭ及抗－ＨＣＶ阳性率分别为５９．３％及４８．１％，提示我国ＰＨＣ与ＨＢＶ感染关系密切，ＨＣＶ感染不是最主要原因。

分泌抗人原发性肝癌单克隆抗体杂交瘤的制备及专一性分析

目的：研制抗人原发性肝癌（ＰＨＣ）特异性单抗（ＭｃＡｂ），为肝癌的导向诊断与治疗奠定基础。方法：用人ＰＨＣ细胞系ＨｅｐＧ２免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与同源骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经间接免疫荧光染色加流式细胞仪筛选及专一性鉴定，单抗经ＰｒｏｔｅｉｎＡ法纯化，用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度测定。结果：筛选出３株能分泌抗人ＰＨＣ细胞膜单抗的杂交瘤，这些杂交瘤经３次亚克隆后仍能稳定地分泌单克隆抗体。专一性分析显示３株杂交瘤分泌的单抗均可特异性地识别人ＰＨＣ细胞。纯化的单抗属小鼠ＩｇＧｌ亚类。结论：ＭｃＡｂ与肝癌细胞具有较高的亲和力，具有潜在的导向显像和导向治疗的应用价值。

α-L-岩藻糖甙酶与原发性肝癌

α-L-岩藻糖甙酶,全称α-L-岩藻糖甙岩藻糖水解酶(EC3.1.1.51,α-L-fucosidase;α-L-fucosidefucohydrolase,简称AFU),是一种广泛存在于人和动物体内的酸性水解酶,在糖蛋白和糖脂的代谢中有重要作用。现已发现某些疾病(如岩藻糖甙沉积病和卵巢癌等)患者的血清和组织中AFU活性水平明显低于正常;而另一些疾病[如原发性肝癌(Primary Hepatic Carcinoma,简称PHC)、胃癌、结肠癌。

应用双重原位杂交技术定位检测肝细胞癌中乙型、丙型肝炎病毒

探索乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是否可同时感染同一宿主细胞。方法：联合应用地高辛标记探针和生物素标记探针的双标记方法，成功建立起非放射性双重原位杂交技术，并应用这一技术检测了１０例肝细胞性肝癌及癌周组织细胞内乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的感染情况。结果：发现ＨＢＶ、ＨＣＶ可同时感染同一宿主细胞这一独特的生物学现象。结论：认为ＨＢＶ、ＨＣＶ双重病毒感染可能并不遵循＂病毒干扰＂原则，这为了解此两种病毒在肝细胞癌发生中可能存在着的协同作用提供了新的线索。

药物输注装置作肝癌局部化疗的并发症

本文总结６６例肝癌使用药物输注装置作肝动脉或门静脉灌注化疗过程中发生的毒副反应和并发症。毒副反应包括白细胞减少占４８．５％，血小板减少占３７．９％，恶心、呕吐、纳差占４３．９％。并发症有２９例，发生率４３．９％，内有急性胃十二指肠粘膜病变１０例（１５．２％）、导管堵塞５例（７．５％）、药液外漏４例（６．１％）、药囊周围积血、积液４例、药囊感染３例（４．５％）和导管移位、急性胰腺炎、肝动脉闭塞各１例。作者讨论了药物输注装置常见并发症及其发生原因，并提出预防措施。