严重主动脉瓣感染性心内膜炎患者主动脉根部置换的方法与疗效

目的总结严重主动脉瓣感染性心内膜炎患者行主动脉根部置换术治疗的临床经验,探讨其手术适应证和手术方法,以期提高外科治疗效果。方法1995年9月～2008年6月间手术治疗11例严重主动脉瓣或人工瓣膜感染性心内膜炎患者,其中活动期6例,静止期5例;术前动脉血细菌培养阳性6例。术前心脏超声心动图提示均有不同程度的主动脉瓣反流或瓣周漏,左心室收缩期末内径(LVESD)6.0±0.7cm,其中≥5.5cm7例;左心室射血分数(LVEF)47.8%±11.2%,其中≤50%8例。手术均在彻底清创后应用人工带瓣管道(9例)或同种带瓣管道(2例)行主动脉根部置换术,同期行冠状动脉旁路移植术4例,二尖瓣环缩术3例,室间隔缺损修补术1例。结果术后心脏骤停死亡1例。发生Ⅲ°房室传导阻滞1例,后期植入永久性起搏器。术后随访10例,随访时间3个月～13.2年,术后32d因感染性心内膜炎复发死亡1例;其余患者均无感染复发和晚期死亡。结论当感染性心内膜炎合并主动脉根部或窦部瘤、感染累及主动脉窦壁或冠状动脉开口处、瓣环严重毁损或彻底清创后瓣环缺损广泛时,宜置换主动脉根部。手术的关键是彻底清创和防止根部出血。尽管手术较复杂,但局部清创彻底,有利于提高手术效果。

猪去细胞心脏瓣膜的免疫原性

背景:在去细胞猪瓣膜(Synergraft瓣膜)的临床应用时发现异种的细胞外基质引发了人体一个强烈的炎症反应。早期的炎症反应严重地削弱了瓣膜内壁的基质结构,导致了移植物的结构破坏及衰败。从Synergraft瓣膜的事件中认识到猪去细胞瓣膜仍然具有免疫原性,尤其是在儿童患者中这种免疫反应会更强烈。因此对于细胞外基质蛋白引起的免疫排斥反应仍需要进一步的研究。目的:通过生物信息学的方法找到人与猪细胞外基质蛋白的基因序列差异,并制备抗体验证基质的免疫原性。设计、时间及地点:以Ⅳ型胶原基质为观察对象进行人、猪细胞外基质基因差异性的对比研究。于2008-06/2009-05在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室完成。材料:新鲜猪瓣膜由上海五丰上食肉联厂提供,去细胞猪瓣膜、杂交瘤细胞和单克隆抗体由长海医院胸心外科实验室制备。方法:通过比较人、猪、鼠基因序列之间的相似区域和保守性位点,寻找有进化关系基因序列之间共同的保守区域、位点和序列差异,探索导致它们产生共同功能的基因序列以及基因序列间的差异片段。应用制备的抗猪Ⅳ型胶原单克隆抗体,采用免疫组化染色鉴定猪去细胞瓣膜上的猪瓣膜自身的细胞外基质存留情况。主要观察指标:Ⅳ型胶原基因序列差异分析结果、自制抗体有效性的免疫组化测试、自制抗体对猪去细胞瓣膜Ⅳ型胶原的检测结果。结果:通过基因比对的方法找到了人与猪Ⅳ型胶原的基因序列差异。通过杂交瘤技术成功制备检测细胞外基质的单克隆抗体;用免疫组化的方法检测到猪去细胞瓣膜上有猪的细胞外基质存留。结论:猪去细胞瓣膜支架上检测到有猪的细胞外基质存留,并且具有免疫原性。

人细胞外基质包被猪去细胞瓣膜支架构建的组织工程心脏瓣膜

背景:去细胞处理的猪主动脉瓣膜植入人体后发生了免疫排斥反应,分析引起免疫排斥反应的原因是由于猪瓣膜的细胞外基质与宿主发生接触引起了免疫激活。目的:试图将人自身的细胞外基质履盖去细胞猪瓣膜表面起到隔离猪瓣膜与宿主血液成分接触的作用。同时应用免疫组化的方法验证人细胞外基质覆盖瓣膜的效果。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-08/2009-04在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室完成。材料:新鲜猪心脏瓣膜取自上海五丰上食肉联厂,采用酶消化法将猪主动脉瓣叶行脱细胞处理。密度梯度离心法从健康志愿者骨髓中获取骨髓基质干细胞。方法:用人细胞外基质包被猪去细胞瓣膜支架来构建组织工程瓣膜,再应用前期制备的抗人细胞外基质单克隆抗体,采用免疫组织化学染色鉴定人细胞外基质在体外构建的组织工程瓣膜上的黏附情况。以未构建的去细胞猪瓣叶为对照组。主要观察指标:①组织工程瓣膜上种子细胞的黏附和生长情况。②免疫组织化学法检测人细胞外基质在瓣膜上覆盖的效果。结果:光镜下观察瓣膜表面均形成了细胞层。扫描电镜所见细胞排列欠规则,未完全覆盖去细胞瓣叶表面,可见裸露的瓣膜支架。免疫组织化学方法检测构建的瓣膜表面呈阳性反应证明有人的细胞外基质黏附,而对照组呈阴性证明了检测方法具有特异性。结论:体外构建的组织工程瓣膜上检测到有人的细胞外基质黏附。

微波消融治疗心房颤动在心脏直视手术中的应用

对 3例风湿性心脏病二尖瓣病变合并持续性心房纤颤 (房颤 )病史 14个月至 4年的患者 ,在行二尖瓣置换加三尖瓣成形手术的同时行非体外循环下心外膜微波线性切割 2例、心内膜微波线性切割 1例。结果全组均无栓塞等并发症 ,无术后死亡。术后房颤心律转为窦性心律 2例 ,仍为房颤的 1例。认为 ,在心脏直视手术时做微波线性切割操作方便、时间短 ,可将房颤心律转为窦性心律 ;但心外膜切割时要注意维持血压平稳 ,预防心律失常发生 。

本期专题：人工心脏瓣膜材料一生物瓣

实验采用人的细胞外基质采包被去细胞猪瓣膜支架，避开了经典组织工程学中的种子细胞与瓣膜支架黏附不牢固的难题，尝试构建一种应用细胞外基质包被去细胞瓣膜支架的新型组织工程瓣膜。在构建效果的检测方面采用自制的用于检测人细胞外基质的特异抗体作为一抗使细胞外基质的检测更有针对性。

外套管支撑防止移植静脉再狭窄的研究进展

冠脉旁路移植术后移植静脉再狭窄是导致手术失败的主要原因。在移植静脉外加外套管防止静脉过度扩张,可减轻移植静脉内膜增生,达到防止再狭窄的目的。本文对不同材料、不同口径外套管对移植静脉内膜增生的抑制作用及外套管防止移植静脉再狭窄的机制作一综述,旨在进一步理解移植静脉狭窄的机制,以实施更有效的防治方法。

应用p75^NTR分选食管肿瘤干细胞并鉴定其生物学特性

目的:应用p75NTR进行人食管肿瘤干细胞的分选,并对其生物学特性进行鉴定。方法:对人食管癌标本癌细胞及食管癌细胞株TE-1、Eca109进行培养,应用流式细胞仪检测p75NTR在人食管癌细胞(esophageal cancer cells,ECCs)中的表达,应用磁珠分选(MACS)法进行p75NTR阳性细胞与阴性细胞的分选,观察p75NTR阳性细胞的增殖、分化及软琼脂克隆形成能力,并进行裸鼠接种以观察其致瘤能力;应用化疗药物作用于ECCs后检测其中p75NTR阳性细胞与阴性细胞存活率,以评价p75NTR阳性细胞对化疗药物的耐受性。结果:8个食管肿瘤细胞系(株)中,除SHEC-1、SHEC-5未检测到p75NTR阳性细胞外,其余6个细胞系(株)SHEC-4、SHEC-6、SHEC-7、SHEC-8、Eca109、TE-1中均检测到p75NTR阳性细胞,阳性细胞比例分别为2.71%、0.32%、3.35%、1.13%、2.15%、0.45%。与阴性及未分选细胞相比,MACS分选后的p75NTR阳性细胞具有较强的增殖能力,具有分化产生其他表型细胞的能力,在软琼脂中具有较强的克隆形成能力(P<0.01);行裸鼠接种时,p75NTR阳性细胞表现出较强的致瘤性,其中SHEC-7细胞只需2×103个即可致瘤,其致瘤能力是未分选细胞的50倍。化疗药物分别作用于p75NTR阳性细胞与阴性细胞48h后,p75NTR阳性细胞的存活比例明显高于阴性细胞(P<0.05)。结论:人食管肿瘤细胞中p75NTR阳性细胞具有自我更新、分化、增殖能力,对化疗药物具有较强的耐受性,并具有较强的致瘤能力,具有肿瘤干细胞的特性。

食管肿瘤干细胞的分选及鉴定的实验研究

目的进行人食管肿瘤干细胞（CSCs）的分选及鉴定。方法通过获取人食管癌标本进行肿瘤细胞的培养，应用流式细胞仪检测p75NTR在人食管肿瘤细胞（ECCs）中的表达，应用磁珠分选法（MACS）进行p75NTR阳性细胞与阴性细胞的分选，研究p75NTR阳性细胞的增殖、分化、软琼脂集落形成能力，并进行裸鼠接种以观察其致瘤能力。结果在8个食管肿瘤细胞系（株）中，除SHEC-1、SHEC-5未检测到p75NTR阳性细胞外，其余6个细胞系（株）中检测到p75NTR阳性细胞为0．32％-3．35％。MACS分选后的p75NTR阳性细胞的增殖能力明显强于阴性细胞[群体倍增时间分别为（17±3）h、（37±7）h，P〈0．01]；p75NTR阳性细胞具有分化产生其他表型细胞的能力；p75NTR阳性细胞在软琼脂中的集落形成能力（45．9％±8．9％）显著高于阴性细胞（3．7％±2．1％），P〈0．01；行裸鼠接种时，p75NTR阳性细胞表现出较强的致瘤性，SHEC-7细胞只需2×10^3个即可致瘤，其致瘤能力是未分选细胞的50倍。结论人ECCs中p75NTR阳性细胞具有自我更新、分化、增殖能力，并具有较强的致瘤能力，p75NTR阳性细胞具有CSCs的特性。