炎症微环境对大鼠间充质干细胞增殖及Sirt6表达水平的影响

目的:分析沉默信息调控因子6(silent information regulator 6,Sirt6)在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达情况,以及炎症微环境对其表达水平的影响,为研究Sirt6在牙周炎症条件下骨形成中的作用提供理论依据。方法:根据实验分为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导组、对照组和LPS过表达Sirt6组。经10μg/mL LPS刺激6、12、24、48、72 h,建立细胞的炎症微环境;CCK-8法检测细胞的增殖水平;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;免疫荧光技术检测Sirt6的分布情况;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、蛋白质印迹法(western blot)检测Sirt6在大鼠BMSCs中信使RNA(mRNA)及蛋白的表达水平。结果:10μg/mL LPS刺激BMSCs后,成功建立炎症微环境;与对照组相比较,CCK-8法检测到炎症微环境中BMSCs的增殖速率由增高逐渐趋于下降,炎症因子抑制了BMSCs的增殖速率(P<0.05),而过表达Sirt6则升高BMSCs的增殖速率(P<0.05);ELISA结果显示,随着时间的推移,炎症微环境中的TNF-α、IL-1β、IL-6含量逐渐下降(P<0.05),表明BMSCs对炎性因子具有调控作用;炎症微环境中,免疫荧光染色显示Sirt6的表达未受到明显抑制;RT-PCR结果显示,LPS过表达Sirt6组中,Sirt6的mRNA表达水平显著升高,且在不同时间点内Sirt6的mRNA表达水平呈现显著性升高;Western blot结果显示,同一时间点LPS诱导组中Sirt6蛋白的表达均出现下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而且随着时间的推移,Sirt6的蛋白表达并没有出现显著性下降,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:炎症因子可以通过抑制Sirt6蛋白的表达影响BMSCs的增殖作用,BMSCs中Sirt6也具有调控炎症因子的作用。

抗衰老酶蛋白SIRT6与炎症反应在慢性疾病中研究进展

抗衰老酶蛋白SIRT6是沉默配型信息调节蛋白家族中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)依赖的一种组蛋白,具有抗衰老和调控炎症反应的作用。然而,SIRT6作为炎症反应关键调控蛋白,在调控全身系统慢性疾病及口腔颌骨相关炎症反应方面的具体机制尚不清楚。本文对SIRT6蛋白在慢性炎症反应发生的调控作用进行综述,为SIRT6蛋白是否能作为治疗口腔慢性疾病中炎症反应的靶向分子提供参考。

涎腺黏膜相关淋巴组织型淋巴瘤报告1例及文献系统分析

涎腺黏膜相关淋巴组织型淋巴瘤(salivary glands mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma,SGML),为无痛性、进展缓慢的恶性肿瘤,较少发生于头颈部。口腔颌面外科医生因认识不足,临床上易误诊。本文报告以1例典型多发性涎腺黏膜相关组织型淋巴瘤为案例,结合文献分析探讨涎腺黏膜相关淋巴组织型淋巴瘤的发病机制及诊疗方法。

模拟低氧对舌鳞癌SCC-15细胞系中SOX2和OCT4表达的影响

目的研究模拟低氧条件对舌鳞癌SCC-15细胞增殖、周期、凋亡的影响,及SOX2和OCT4蛋白、mRNA的表达变化。方法体外培养舌鳞癌SCC-15细胞,加入模拟低氧物去铁胺(desferrioxamine,DFO)模拟低氧环境,为模拟低氧组,同时设置不加DFO的常氧组为对照,采用CCK-8法检测SCC-15细胞的增殖率;流式细胞技术检测SCC-15细胞的周期和细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、SOX2及OCT4蛋白的表达;qPCR检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2及OCT4mRNA的表达。结果与常氧组相比,模拟低氧组SCC-15细胞的增殖受到抑制(P<0.05),G1期细胞所占比例上升、S+G2期细胞所占比例下降(P<0.05),细胞凋亡率未见明显变化(P>0.05);蛋白质印迹法结果显示,与常氧组比较,模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2、OCT4蛋白的表达均升高,且HIF-1α、OCT4蛋白的升高幅度大于SOX2蛋白,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);qPCR结果显示,两组SCC-15细胞中HIF-1αmRNA水平差异无统计学意义(P>0.05),而模拟低氧组SCC-15细胞中SOX2、OCT4mRNA的表达水平高于常氧组(P<0.05)。结论 DFO可以有效模拟低氧环境,促进SOX2和OCT4的蛋白和mRNA表达水平升高。