大鼠脊髓横断性损伤后细胞周期蛋白D3的表达变化

目的探讨细胞周期蛋白 D3(Cyclin D3)在横断性脊髓损伤(tSCI)后的表达变化以及定位情况。方法将48只成年 SD 大鼠随机分为8组:正常对照组,T9横断伤2、8 h、1、3、5、7和14 d 组,每组6只。采用 Western blot 测定损伤后各时间段 Cyclin D3蛋白水平在脊髓中的表达变化。采用免疫组织化学方法检测 Cyclin D3在正常以及损伤后脊髓中的分布和定位。结果 West-ern blot 显示,Cyclin D3蛋白水平在 tSCI 后头、尾段均呈现先升高后下降的趋势,尾段明显:CyclinD3的表达于损伤后8 h 开始逐渐升高,3d 达到高峰,一直持续到第5天,之后逐渐下降。免疫组织化学表明 Cyclin D3在正常脊髓中均匀分布,损伤后3 d,Cyclin D3在脊髓白质和灰质中表达明显增强;免疫荧光双标记表明 Cyclin D3与神经元的标记物 neuronal nucleus(NeuN)、少突胶质细胞标记物 cyclic nucleotide 3′phosphohydrolase(CNPase)有明显共定位,与星形胶质细胞标记物 glial fibril-lary acidic protein(GFAP)和小胶质细胞标记物 OX-42也存在部分共定位。结论脊髓损伤后 Cyc-lin D3蛋白水平呈现明显的时相变化,并且与神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞存在共定位,提示 Cyclin D3参与了脊髓损伤后的病理生理过程。