免疫固定电泳在多发性骨髓瘤患者实验室诊断中的应用

目的对150例多发性骨髓瘤患者免疫球蛋白定量、血清蛋白电泳和免疫固定电泳结果进行分析，探讨免疫固定电泳在M蛋白血症诊断中的作用。方法免疫球蛋白定量利用免疫散射比浊法，测定免疫球蛋白IgG，IgA，IgM和kappa，lambda轻链的浓度；血清蛋白电泳和免疫固定电泳采用Helena公司的Spire3000全自动电泳仪及扫描仪进行。结果150例多发性骨髓瘤患者有138例血清蛋白电泳有M带，免疫固定电泳150例全部检出M带；分型结果显示以IgGλ型最多（58例，占38．7％）；12例经血清蛋白电泳未检出M带而免疫固定电泳检出M带的患者中，有10例为轻链病患者。结论免疫固定电泳特异度和敏感度较血清蛋白电泳高，对于多发性骨髓瘤的实验室诊断特别是轻链病的诊断具有重要价值。

IgD型多发性骨髓瘤患者实验室检查结果分析

目的 IgD型多发性骨髓瘤患者临床上较为少见,通过实验室检查,以求发现其特点,避免漏诊。方法分别收集20例本实验室检测到的IgD型I、gG型I、gA型I、gM型多发性骨髓瘤患者的实验室检查结果,分析IgD型与其它较为常见类型的多发性骨髓瘤患者实验室检查结果的异同。结果 IgD型多发性骨髓瘤患者的免疫球蛋白定量结果显示,IgGI、gA和IgM含量均减低者有18例占90%,其余两例3种免疫球蛋白含量处于正常下限。轻链定量发现,20例IgD型多发性骨髓瘤患者有19例为IgD型λ轻链型,占95%,而IgD型κ轻链型仅1例,且20例中有19例是轻链比值异常的。IgD型多发性骨髓瘤患者的血清蛋白电泳阳性率与其余类型无显著差异(P>0.05);免疫固定电泳显示IgD泳道有特异性的抗原抗体沉淀带。结论如实验室检查发现患者免疫球蛋白IgGI、gA和IgM含量均减低、轻链比值异常、血清蛋白电泳出现阳性条带,要高度怀疑其为IgD型多发性骨髓瘤,免疫固定电泳时务必加IgD泳道,以避免IgD型多发性骨髓瘤的漏诊。

肿瘤标志物CEA和CA19-9在消化系统恶性肿瘤中的诊断效率评价

目的以病理诊断为金标准,运用流行病学理论较全面分析与评价血清CEA和CA19-9对消化系统肿瘤的诊断效率和临床意义。方法应用电化学发光免疫分析法测定消化系统272例恶性肿瘤及167例良性疾病患者血清CEA和CA19-9水平,对其敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阳性似然比和优势比进行比较分析。结果单检CEA和CA19-9诊断消化系统恶性肿瘤的敏感性分别为34.2%和45.2%,联检49.3%;特异性80.8%和60.5%,联检59.3%;准确性由单检的51.9%(CEA)和51.0%(CA19-9)提高至53.1%(CEA和CA19-9);阳性预测值74.4%和65.1%;阳性似然比1.8和1.1;优势比2.19和1.26。结论消化系常见肿瘤中,CEA诊断胰腺癌的敏感性最高,胆囊胆管癌和结直肠癌次之;特异性和阳性似然比以胆囊胆管癌最高。CA19-9诊断胆囊胆管癌敏感性最高,胰腺癌次之;特异性、阳性预测值、阳性似然比均以胰腺癌最高,并且诊断胰腺癌的优势比大于10。除胃癌及食道癌外,CA19-9敏感性高于CEA,联合检测CEA和CA19-9可提高诊断敏感性和准确性,但就阳性预测值和阳性似然比而言,单检CEA和CA19-9对某些器官肿瘤的诊断意义更大。

22例轻链型多发性骨髓瘤实验室检查特征及轻链多聚体的鉴定

目的分析22例轻链型多发性骨髓瘤的实验室检查特征,增强对轻链型多发性骨髓瘤的了解,并进一步鉴定轻链多聚体的形成情况。方法应用散射速率比浊法进行血尿轻链定量,应用血清蛋白电泳和免疫固定电泳进行M蛋白的鉴定,用SDS-PAGE电泳分析轻链多聚体的形成情况,并与IgG型多发性骨髓瘤进行比较。结果轻链型多发性骨髓瘤完整免疫球蛋白分子呈明显降低并低于IgG型多发性骨髓瘤,尿液中排出大量的免疫球蛋白游离轻链,β2-微球蛋白和肌酐值高于IgG型多发性骨髓瘤,尿液中可以鉴定出明显的多聚体。结论轻链型多发性骨髓瘤的肾损害更为严重,尿液中游离轻链的表现比血中M蛋白的表现更明显,且尿液中轻链多聚体的形成对轻链的定量结果有一定的影响。

甲状腺自身抗体与甲状腺相关性眼病的关系

目的:探讨甲状腺自身抗体与甲状腺相关性眼病(Thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)、甲状腺机能亢进症突眼(甲亢突眼)及甲状腺机能亢进(甲亢)的关系。方法:甲状腺相关性眼病35例,甲亢突眼37例,甲亢83例,正常对照90例,分别检测其甲状腺球蛋白抗体(TGA)、甲状腺微粒体抗体(TMA)、促甲状腺受体抗体(TRAb)。结果:四组的TGA阳性数(率)分别为3(8.6%)、6(16.2%)、16(19.3%)、6(6.7%),TMA阳性数(率)分别为6(17.2%)、7(18.9%)、32(38.6%)、12(13.3%),TGA、TMA双阳性数(率)分别为1(2.6%)、4(10.8%)、11(13.8%)、0(0.0%),TRAb阳性数(率)分别为22(62.9%)、31(83.8%)、70(84.3%)、6(6.7%)。结论:TGA、TMA与TAO的相关性不大,诊断意义很小,TRAb与TAO有较好的相关性,对其早期诊断、治疗和随访有很大价值。

强直性脊柱炎患者外周血中B淋巴细胞亚群、B细胞活化因子及其受体的表达研究

目的研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血中B淋巴细胞亚群、B细胞活化因子(BAFF)及其受体BR3的表达,为进一步探讨AS发病机制提供新的理论依据。方法采用流式细胞术测定24例AS患者及30名正常健康体检者外周血中CD19+总B细胞、CD19+CD20+CD27-初始B细胞、CD19+CD20+CD27+记忆性B细胞、CD19+CD38+抗体分泌细胞、BAFF及其受体BR3的表达百分率;采用免疫散射比浊法测定AS患者和正常体检者血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM浓度;并分析外周血白细胞BAFF的表达水平与B淋巴细胞亚群百分率、免疫球蛋白浓度之间的相关性。结果与正常对照组比较,AS患者的外周血中CD19+总B细胞和CD19+CD38+抗体分泌细胞的表达率、BAFF及其受体BR3的表达比例、血清IgG、IgA浓度均明显升高(P<0.05)。外周血白细胞中BAFF的表达水平分别与外周血白细胞CD19+总B细胞、CD19+CD38+抗体分泌细胞百分率及血清IgG、IgA浓度呈明显正相关(r=0.695,P=0.000;r=0.610,P=0.002;r=0.813,P=0.000;r=0.665,P=0.000)。结论 AS患者外周血中存在异常表达的总B细胞、抗体分泌细胞、BAFF及其受体BR3,提示在AS的发病过程中,B淋巴细胞的异常表达及活化可能发挥致病作用。

结直肠腺癌患者血清线粒体肌酸激酶检测的意义

目的通过对结直肠腺癌患者血清线粒体肌酸激酶(M tCK)的检测,探讨其在结直肠腺癌诊断中的临床意义。方法选择手术治疗的结直肠腺癌患者107例和同期非肿瘤患者53例为研究对象。用电泳法检测血清M tCK,同时用化学发光免疫测定检测癌胚抗原(CEA),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测糖抗原(CA)242。结果结直肠腺癌患者组中M tCK、CEA、CA242的阳性率分别为59.8%、55.1%和63.5%,非肿瘤对照组为3.7%、5.7%和3.7%。M tCK检测的敏感性和特异性分别为59.8%和96.2%,与CEA、CA242联合检测的敏感性和特异性分别为44.8%和100.0%。结论血清M tCK检测有助于结直肠腺癌的诊断,与CEA和CA242联合检测可显著提高对结直肠腺癌诊断的特异性。

原发性胆汁性肝硬化患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶特异性CD8+CTL表位预测及鉴定

目的鉴定原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者中自身抗原丙酮酸脱氢酶(PDC-E2)上的HLA-A觹0201限制性CD8+CTL表位,为临床探索特异性免疫治疗奠定基础。方法应用数据库SYFPEITHI预测PDC-E2上两段涵盖B细胞表位和CD4+T细胞表位的氨基酸序列(163～184aa和36～49aa)附近可能存在的HLA-A觹0201限制性T细胞表位,再通过T2细胞株、细胞增殖试验和细胞毒性检测分别分析各抗原肽与HLA-A觹0201的结合力、诱导患者外周血单个核细胞(PBMCs)增殖能力及抗原肽诱导的抗原特异性T细胞杀伤毒性,逐步鉴定HLA-A觹0201限制性CD8+CTL细胞表位。结果数据库初步预测到5个可能性较大的HLA-A觹0201限制性抗原肽,其中两个抗原肽(159～167aa和165～174aa)显示与T2细胞上HLA-A觹0201分子有较高的亲和力,这两个抗原肽能刺激大部分HLA-A觹0201阳性PBC患者PBMC增殖,并且由其诱导产生的CTL具有特异杀伤活性。结论位于PDC-E2内酯酰区上的KLSEGDLLA穴159～167aa)和LLAEIETDKA穴165～174aa雪是PBC患者体内HLA-A觹0201限制性的CD8+CTL表位。

细胞因子基因多态性与中国人原发性胆汁性肝硬化的相关性

目的探讨IL-1、IL-6、IL-10基因多态性与中国人原发性胆汁性肝硬化(PBC)发病的相关性。方法采用限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和序列特异性PCR(SSP)法,分析77例PBC患者及160例健康对照者外周血单核细胞基因组DNAIL-1(+3953)、IL-1受体拮抗剂(IL-1RN)、IL-6启动子(-174)、IL-10启动子(-592、-819、-1082)基因多态性,并进行对比分析。结果PBC组IL-1RN1熏1等位基因携带率明显高于对照组(90.9%vs79.4%熏P=0.026),IL-1RN1熏2等位基因携带率明显低于对照组(6.5%vs18.8%熏P=0.013),IL-1RN觹2等位基因携带率与对照组相比差异无显著性(P=0.06)。160例健康对照者IL-6-174等位基因全部为GG纯合子;PBC患者中有4例为GC杂合子,其余73例均为GG纯合子穴P=0.0036雪;C等位基因频率显著高于正常对照组(P=0.0038)。IL-1+3953及IL-10启动子-1082、-819和-592基因多态性与正常对照组差异无显著性。结论IL-1RN和IL-6-174基因多态性可能与中国人PBC的易感性相关,而IL-1(+3953)及IL-10启动子基因多态性与之不相关。

载脂蛋白C3与心血管疾病关系的研究进展

载脂蛋白（apolipoprotein,apo）C3除可引起脂质代谢异常,还直接参与致血管内皮细胞功能失调过程,几乎参与动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）形成的全过程,被视为一个独立的促炎和促粥样硬化因素。本文对apo C3与心血管疾病的关系作一综述。

血清淀粉样物质A研究进展

血清淀粉样物质A（serum amyloid A,SAA）是组织淀粉样蛋白A的前体物质,属于急性时相蛋白,在组织损伤和炎症反应时升高.近年来,随着对SAA的基因调控、蛋白结构及生物学功能研究的深入,发现SAA对包括急性心肌梗死、移植后急性排斥反应和病毒感染等疾病的早期诊断作用要优于C-反应蛋白（C-response protein,CRP）.SAA的临床应用研究受到学者们的广泛关注,成为新的研究热点.该文主要就SAA超家族的结构、功能以及SAA在临床疾病应用中的研究进展作一综述.

细胞外基质蛋白1在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义

目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein1,ECM1)在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学和免疫细胞化学EnVision法检测乳腺癌手术切除标本中乳腺组织(正常组织和癌组织)和恶性程度不同的乳腺癌细胞株(MCF-7、Sk-Br-3和MDA-435)中ECM1的表达,并比较正常乳腺组织和乳腺癌组织、淋巴结转移和未转移乳腺癌之间的ECM1表达差异。Western blotting检测确定ECM1亚型蛋白。结果:ECM1的表达在正常乳腺组织中阳性率为8.7%(2/23),在乳腺癌组织中阳性率为60.4%(29/48);其中乳腺癌淋巴结未转移者为38.5%(10/26),淋巴结转移者为86.4%(19/22)。统计分析表明,ECM1的表达在乳腺癌组织中高于正常组织(P<0.01),在转移性乳腺癌中高于非转移性乳腺癌(P<0.01)。恶性程度低的乳腺癌细胞株MCF-7、Sk-Br-3中不表达ECM1,而恶性程度较高的MDA-435细胞株中高表达ECM1。乳腺癌细胞中高表达的ECM1蛋白主要是相对分子质量为68000的ECM1a亚型。结论:ECM1(主要为ECM1a亚型)在乳腺癌组织和恶性程度高的乳腺癌细胞中过表达,并且与乳腺癌的淋巴结转移相关。

KLIANNTRV是结核抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL表位

目的鉴定结核杆菌抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL优势表位。方法采用数据库SYFPEITHI初步预测结核抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL表位;经流式细胞术分析抗原肽与HLA-A*0201的亲和力;经时间荧光分辨法检测患者外周血单个核细胞(PBMCs)对抗原肽的增殖反应;最后通过细胞毒实验逐步鉴定Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL预测的表位。结果实验证明,预测的位于Ag85A氨基酸序列(242-250aa)的肽表位与HLA-A*0201具有较高的亲和力。结论筛选出的KLIANNTRV(242-250aa)是结核杆菌抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL优势表位。

TNF家族新成员BLyS和其受体TACI

众所周知,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)家族参与各种免疫和炎症反应的调控.1994年Smith等人发现TNF家族所有成员,除α-淋巴毒素外,都是II型膜蛋白.它们的生物学作用方式主要是通过细胞间接触,由膜结合形式的配体与其相应的受体结合;或者通过加工和排出可溶性配体,配体再和其受体结合的.另外,该家族的其他成员诸如CD27L,C D30L,OX40L,FasL和4-IBBL都有胞浆调控区,它们与受体结合后能进行信号传递[1 -5]

“人体-环境”新系统医学模式探讨

运用系统论观点分析“生物-心理-社会”医学模式的优越性和局限性,提出以人为主体,将人作为一完整系统,人与环境合为大系统,以整体论的健康观为理念的“人体-环境”新系统医学模式,旨在更好地推动中西医结合和预防医学的发展,加速学科间的相互渗透,唤起健康和环保意识,以及更加重视政治和法律政策对现代医学的作用。

结核分枝杆菌抗原Ag85A(Rv3840c)限制性CD8^+ CTL表位的预测及鉴定

目的预测及鉴定新的HLA-A*0201结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85A中的CD8+CTL优势表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测可能存在的HLA-A*0201的限制性CD8+CTL表位,并经流式细胞术分析抗原肽与HLA-A*0201的亲和力、经时间荧光分辨法检测结核(TB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)对抗原肽的增殖反应,再通过细胞毒实验研究抗原肽诱导的T细胞毒杀伤活性,逐步鉴定Ag85A的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果位于Ag85A氨基酸序列(48-56)的肽表位与HLA-A*0201分子具有较高的亲和力,并能刺激HLA-A*0201阳性结核患者PBMC增殖,诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽6(GLPVEYLQV,48-56aa)是Mtb抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CD8+CTL的优势表位,这为今后进一步研究结核杆菌,作为设计结核疫苗的候选表位奠定了一些基础。

结核杆菌抗原Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位的预测及鉴定

目的鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Rv0173中的HLA-A*0201限制性CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测结核杆菌Rv0173中可能存在的HLA-A*0201限制性CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位。结果位于Rv0173氨基酸序列肽3(21-30aa)和抗原肽7(161-170aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体PBMCs增殖,并诱导产生特异性杀伤活性。结论肽3(RLSQSADQYL)(21-30aa)和肽7(LLRGGGLVNL)(161-170aa)是抗原Rv0173上HLA-A*0201限制性CTL的优势表位,可作为结核疫苗设计的候选表位。