原发性胆汁性肝硬化HLA-A* 0201限制性PDC-E2特异性CTL功能分析

目的:探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)中HLA-A* 0201限制的PDC-E2159-167特异性CTL与PDC-E2165-174特异性CTL功能。方法:分析15例HLA-A*0201阳性(A2+)PBC患者抗原肽PDC-E2159-167、PDC-E2165-174诱导的CTL对以表达HLA-A* 0201分子的T2细胞作为靶细胞的细胞毒性作用,并利用四聚体技术结合细胞内因子染色研究PDC-E2159-167特异性CTL与PDC-E2165-174特异性CTL分泌细胞因子(IFN-γ、IL-4和TNF-α)情况。结果:15例A2+PBC患者中,12例PDC-E2159-167诱导的CTL和10例PDC-E2165-174诱导的CTL对负载相应抗原肽的靶细胞特异杀伤活性大于10%(E∶T=40∶1),而对照组则均小于10%;15例A2+PBC患者从PBMC诱导的PDC-E2159-167特异性CTL和PDC-E2165-174特异性CTL中分泌IFN-γ细胞比值分别为0.33%±0.24%(0%～0.86%)、0.27%±0.24%(0%～0.75%),未检测到分泌TNF-α或IL-4的PDC-E2159-167或PDC-E2165-174特异性CTL。结论:结果表明,大部分PBC患者中HLA-A* 0201限制性PDC-E2159-167特异性CTL和PDC-E2165-174特异性CTL具有特异杀伤活性,HLA-A* 0201限制性PDC-E2特异性CTL主要分泌IFN-γ并非IL-4、TNF-α。

T细胞与原发性胆汁性肝硬化

原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是一种原因不明的、以肝内小胆管特异性破坏、汇管区淋巴细胞浸润为特征的自身免疫性肝病。尽管PBC的病因和发病机制还不十分清楚,但越来越多的证据表明T细胞参与PBC发病,并对胆管和肝细胞破坏起主要作用。本文从T细胞的自身耐受崩溃、与胆管损伤关系以及自身抗原表位等方面综述了近年来相关的研究进展。

原发性胆汁性肝硬化PDC-E2特异性T细胞拮抗性模拟肽的筛选

目的筛选可拮抗原发性胆汁性肝硬化(PBC)中PDC-E2_(165-174)特异性CTL功能的模拟肽。方法以自身抗原表位PDC-E2_(165-174)(LLAEIETDKA)为原型肽,采用丙氨酸突变扫描法,通过亲和力分析及其对PDC-E2_(165-174)特异性CTL细胞毒性和分泌细胞因子等功能的抑制效应,从中筛选拮抗性模拟肽。结果8条模拟肽中,5号位突变的模拟肽(I5A)显示与HLA-A*0201分子高亲和力,5名PBC患者PDc-E2 特异性CTL对其负载的T2细胞的杀伤率均小于10％,并且I5A也未能诱导PBC患者PDC-E2特异性CTL 产生IFN-γ。在原型肽的存在下,I5A可抑制PDC-E2_(165-174)CTL细胞毒性和分泌IFN-γ,随着模拟肽浓度增加,抑制效应越强,在10 μmol／L浓度时可以明显抑制PDC-E2_(165-174)CTL的细胞毒活性和分泌IFN-γ的能力。结论模拟肽I5A(LLAEAETDKA)可能是PDC-E2_(165-174)特异性CTL的一个拮抗性多肽,其抑制效应并不是其能竞争结合靶细胞上的HLA-A*0201分子,而是对TCR的一种拮抗作用,为将来设计以TCR为基础的特异性免疫治疗提供实验依据。

原发性胆汁性肝硬化的动物模型

原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）是一种慢性炎症、器官特异性的自身免疫性肝病，以高滴度抗线粒体抗体（antimitochondrial antibodies，AMA）和肝内小胆管特异损伤为特征。位于线粒体内膜上参与能量代谢的丙酮酸脱氢酶复合体（pyruvate dehydrogenase complex，PDC）、侧链二氧酸脱氢酶复合体和2-氧戊二酸脱氢酶复合体是该病自身免疫反应识别的主要自身靶抗原。由于PBC起病隐匿、病程长，大部分就诊患者已发展到中晚期，因而，临床上研究该病的发病机制及治疗较困难。动物模型可为理解疾病的病因病理和试用新的药物提供平台。自20世纪80年代初以来，已建立了与PBC相关的动物模型6类。