小胶质细胞在脊髓损伤病理生理中作用的研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种临床常见的严重创伤,一直以来因其高致残率而被视为医学界的一大难题。SCI后的病理生理过程错综复杂,至今仍未十分明确。纵观整个SCI后的病理过程,小胶质细胞在其中起到了重要的作用。一方面,小胶质细胞在SCI后被迅速激活,并释放大量的炎症因子,如肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白介素1β(interleukin,IL-1β)、IL-6等,从而导致炎症级联瀑布反应,加重SCI的损伤程度。

低氧预处理骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究

目的:研究低氧预处理骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对大鼠急性脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)治疗效果的影响并探讨其可能的机制。方法:转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)基因的SD大鼠10只,体重55.6±4.2(50～60)g,通过改良全骨髓贴壁法从大鼠骨髓中分离培养大鼠BMSCs并进行并进行细胞纯度和分化能力鉴定。应用0、10、50、100、200和300μM的二氯化钴(CoCl2)低氧预处理BMSCs后,通过CCK-8法检测低氧对细胞增殖的影响,细胞血清剥夺培养0、6、12和24h后,流式细胞法检测血清剥夺对细胞凋亡的影响,Transwell法检测低氧对BM-MSCs培养6、12、24h后细胞迁移的影响,流式细胞法检测低氧对细胞凋亡的影响,PCR法检测相关分子通路,找出合适的低氧处理条件。体内实验,使用Allen法垂直打击建立SCI模型,实验分为A组(假手术组)、B组(对照组)、C组(BMSCs组)和D组(H-BMSCs组)(n=20)。A组的大鼠进行外科手术,但不锤击脊髓,B、C和D组均进行锤击脊髓行SCI造模和蛛网膜下腔注射注射生理盐水和低氧预处理前后的BMSCs。通过术前,术后1、3、7、10、14、21、28天BBB评分研究大鼠的神经功能恢复,术后72h免疫荧光染色法确定移植细胞的存活情况和小胶质细胞激活情况,术后72h和28d HE染色评估脊髓组织病理损伤情况。结果:CCK-8结果表明CoCl2浓度越高对BMSCs增值能力抑制越大,100μM CoCl2培养24h可以明显降低BMSCs增殖(P<0.05),提高BMSCs的凋亡(P<0.05),但能够显著增强预处理后BMSCs 6和12h后的细胞迁移的数量(P<0.05),显著降低细胞血清剥夺培养24h后细胞凋亡率(P<0.05)。动物实验,与B组相比,C组的治疗可显著提高14d、21d和28d的BBB评分(P<0.05)。D组的BBB评分在21d和28d时明显高于C组(P<0.05)。HE染色结果显示,BMSC移植可以显著减少脊髓损伤部位细胞死亡,出血和炎性细胞浸润,而与C组相比,D组中的脊髓病理学损伤更轻微。细胞移植72h后,在C组和D组中均可见绿色荧光细胞,且绿色荧光的细胞数量D组(254.0±35.5)中明显高于C组(143.2±22.3,P<0.05)。SCI 72h后Iba-1免疫荧光染色显示,与B组(759.0±114.3)相比,BMSC(544.8±37.1)和D组(422.4±56.0)小胶质细胞数明显减少(P<0.05),且D组抑制小胶质细胞激活的能力更强(P<0.05)。结论:低氧预处理BMSCs通过提高移植细胞的存活率,增强抑制小胶质细胞的激活能力,提高了SCI后大鼠神经功能的恢复,机制为低氧预处理能够增强细胞的抗损伤和迁移能力,是一种提高BMSCs移植治疗SCI疗效的有效手段。

经皮内窥镜下颈椎间盘切除术治疗颈椎病的临床应用进展

经皮内窥镜下颈椎间盘切除术(percutaneous endoscopic cervical discectomy,PECD)为目前颈椎病微创治疗的主要手段。PECD术式的入路主要有前路和后路,且后路应用更为广泛。该技术对颈椎的稳定性破坏小,避免了融合术相关并发症,减轻了术后轴性症状并且无内植物,同时具有切口小、术中出血少、术后恢复快等优点。然而,这项技术仍在发展中,并且有一个陡峭的学习曲线。现查阅并复习文献,对PECD治疗颈椎病的入路方式选择、适应症及优缺点等方面进行综述。