甲_1型流感病毒新分离株HA基因的序列分析

目的研究新分离的 H1 N1 亚型流感病毒株的 HA1基因序列。方法甲型流感病毒通过鸡胚增殖后提取 RNA、逆转录合成 c DNA,经 PCR扩增和产物纯化构建重组质粒 ,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定并进行基因特性分析。结果新分离到的 3株流感病毒株 (H1 N1 ) HA 1区基因长度为 981bp,编码 32 7个氨基酸 ;与 A/桂防 / 10 / 94和 A/ Bayern/ 0 7/ 95(H1 N1 )标准株比较其同源性分别为 92 .8%和 91.3% ,丢失了第 130位氨基酸和 30 4位糖基化位点 ;新分离的 3株甲型流感病毒株 (H1 N1 ) HA1区氨基酸同源性高达 98% ;A/桂防 / 10 / 94和 A/ Bayern/ 0 7/ 95 (H1 N1 )毒株 HN1氨基酸的同源性高达 96 %。结论新分离到的 3株 H1 N1 毒株 HA编码氨基酸不同于 A/ Bayern/ 0 7/ 95 (H1 N1 )和 A /桂防 / 10 / 94(H1 N1 )标准株 。

副流感病毒兰州株的分离与鉴定

目的副流感病毒兰州株的分离与鉴定。方法应用鸡胚和人胚肺成纤维突变细胞株分离病毒 ;应用血凝和血抑以及近年来多株流感国际和国家株 (H1N1亚型 6株、H3N2亚型 2株、B型 4株 )作抗原抗体交互试验 ;还用 4类主要呼吸道病毒单克隆抗体间接免疫荧光法与 2株兰州株的病毒抗原基质片作特异性交叉反应。结果 2株兰州株在鸡胚中培养血凝效价滴度高达 1:5 12 (+ + )。它们与流感病毒甲型 (H1N1和 H3N2 )以及乙型流感抗血清均无血抑反应。它们的血凝素抗原及血清与 12株甲和乙型流感病毒株无免疫血抑交互反应。但 2株流行株抗原片可和副流感病毒 2型单克隆抗体发生较强反应 ,在人胚肺细胞中培养有明显细胞融合病变。结论 2株流行株虽具有高滴度血凝效价 ,但不是流感病毒株 ,根据单克隆抗体荧光染色和流行株在人胚肺细胞中的病变 ,初步确认为副流感病毒