不同种类细胞株对UVB紫外线的耐受性初探

目的:探索几种细胞株对UVB紫外线的耐受性。方法:0、20和50 mJ/cm紫外线照射后,利用MTT、荧光素酶报告基因检测和克隆形成率实验,检测人表皮细胞HaCaT、人黑色素细胞A875、人肺腺癌细胞A549和H322、人肝癌细胞HepG2的存活及2增殖能力。结果:MTT实验结果表明HaCaT、A875、A549、H322和HepG2细胞在受到20和50 mJ/cm紫外线照射后第1天,细胞活力均显著降低(P<0.05),到照射后第3天,细胞活力仍显著低于未照射组(<0.05)。克隆形成率实验结果表明,HaCaT、A875和2HepG2细胞在照射后,细胞增殖能力受到显著抑制。荧光素酶活性检测实验结果表明,A549细胞在受到20和50 mJ/cm紫外线照射后第5和第10天,细胞活力显著低于未照射组(P<0.05)。结论:UVB紫外线对表皮细胞、肺腺癌细胞和肝癌细胞的存活和增殖能力均产生影响,其中正常表皮细胞HaCaT细胞对UVB紫外线的耐受性大于肿瘤来源的A875、A549、H322和HepG2细胞。

PIAS3过表达对肺腺癌细胞A549增殖的影响及意义

目的:探索活化型信号转导子和转录激活子3蛋白抑制剂(PIAS3)对肺腺癌A549细胞增殖的影响及相关意义,为进一步研究利用辐射应答基因启动子驱动的PIAS3腺相关病毒载体联合放射治疗肺腺癌提供基础。方法:利用MTT比色试验和克隆形成率实验检测转染p CMV-Sport6-PIAS3后对肺腺癌细胞A549存活和增殖的影响;利用免疫荧光染色实验检测共转染p CMVSport6-PIAS3、PRC-CMV、PRC-STAT3及PRC-STAT3-CT后对p-STAT3入核的影响。结果:PIAS3过表达导致A549细胞生长显著抑制,克隆形成能力显著降低;免疫荧光染色实验结果表明,转染p CMV-Sport6-PIAS3后,STAT3入核被显著抑制,通过共转染表达STAT3和STAT3-CT后,STAT3入核仍显著受到抑制。结论:PIAS3过表达可抑制STAT3的入核,继而阻断其功能,从而降低肺腺癌细胞A549的生长和增殖能力。

γ射线诱导人肺腺癌H322细胞STAT3激活的实验研究

目的 探索辐射诱导人肺腺癌细胞STAT3活化的剂量和时间效应及其上游信号通路.方法 60Co γ射线照射p53突变型肺腺癌细胞H322,0～ 10 Gy照射后0～24 h提取蛋白,利用Western blot方法和免疫荧光染色实验,检测H322细胞中磷酸化STAT3表达和入核情况,以及其上游信号分子p-EGFR水平.结果 Western blot方法和免疫荧光染色实验均表明2～10 Gy照射后（1.9 ～6.6倍）0～24 h（1.2 ～9.5倍）均可诱导肺腺癌细胞H322中p-STAT3表达增高;同时发现H322细胞中出现p-EGFR表达的增加,其为对照组的4.3 ～19.2倍.结论 60Co γ射线照射后引起肺腺癌H322细胞中p-STAT3表达增高,STAT3的激活可能由EGFR/STAT3信号通路所介导.

电离辐射对人肺腺癌A549细胞中STAT3靶基因表达的影响

目的探讨1射线照射对人肺腺癌A549细胞中促血管生成基因VEGF以及抗凋亡基因bcl-2和存活素（survivin）表达的影响及其与转录因子STAT3的关系。方法利用RT．PCR和Westernblot检测2和4Gy1射线照射后24hA549细胞中VEGF、Bel-2和Survivin表达水平以及STAT3抑制后VEGF和Survivin的表达变化。结果2和4Gy1射线照射后，VEGF和Survivin的表达均显著升高，而Bel-2的表达不受1射线照射的影响。利用抑制剂AG490阻断Y射线照射诱导的STAT3激活后，辐射诱导的VEGF和Survivin的表达升高被抑制。结论y射线照射可通过激活STAT3上调A549细胞中Survivin和VEGF的表达，Survivin蛋白的上调在一定程度上抑制了辐射诱导的肿瘤细胞凋亡，而VEGF的表达升高则有助于肿瘤血管生成。

低剂量X射线对人树突状细胞体外迁移能力的影响及其机制

目的研究低剂量x射线对人树突状细胞（DC）体外迁移能力影响并探讨其机制。方法分离人外周血单个核细胞（PBMC），以人GM-CSF和IL-4共同诱导分化为DC，于培养的第5天加入TNF—a促进成熟，在培养的第6天用x射线照射DC，受照剂量分别是0、0．05、0．1、0．2、0．5Gy，照射后48h收获DC；采用RT-PCR法及Westernblot法分别检测CCR7mRNA及蛋白表达水平；Transwell迁移实验法检测DC的体外迁移能力。结果与0Gy相比，0．2和0．5Gy照射后，CCR7mRNA的相对表达量显著高于其他剂量（t=14．72、4．72，P〈0．05）；0．2Gy照射后，CCR7蛋白表达量高于其他剂量（t=4．46，P〈0．05），DC迁移能力显著高于其他剂量（t=2．95，P〈0．05）；以抗CCR7单克隆抗体封闭CCR7蛋白活性，在接受同等剂量照射时，DC细胞迁移能力显著降低（t=4．63—8．96，P〈0．05）。结论受到0．2GyX射线照射的DC，体外迁移能力显著增强，其机制可能与受照后DC表达CCR7mRNA及蛋白水平升高有关。