复层牙周膜细胞膜片组织再生的实验性研究

目的:制备复层牙周膜干细胞膜片(MUCPs)与单层牙周膜干细胞膜片(MCPs),并评价其生物学活性和组织再生能力。方法:将构建的2种细胞膜片通过免疫组化和扫描电镜等方法观察其生物学活性。再将2种膜片分别与2种支架材料陶瓷牛骨(CBB)与预处理牙本质片(TDM)复合构建不同的生物性牙根,植入裸鼠皮下,观察组织再生情况。结果:体外结果显示MUCPs高表达Col-I、COL-III、Fibronectin、Laminin等细胞外基质的结构蛋白。体内结果显示在复层细胞膜片组可以观察到再生出更明显的类似于牙周复合组织的矿化沉积和牙周膜样纤维。结论:MUCPs具有更为良好的生物学活性和组织再生能力,将为临床牙周组织缺损的治疗提供一种新的治疗方法。

脂肪干细胞来源外泌体通过miR-21a-5p/PTEN途径促进牙周膜干细胞成骨分化

目的 研究脂肪干细胞(ADSCs)来源外泌体通过miR-21a-5p/第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)途径促进牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的效应。方法 培养ADSCs、分离外泌体并用磷酸盐缓冲液溶解备用。培养PDLSCs、进行成骨诱导分化并分组,外泌体组加入15μg/ml外泌体、对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,NC组加入等体积磷酸盐缓冲液并转染NC序列,NC+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染NC序列,miR-21-5p敲低+外泌体组加入15μg/ml外泌体并转染miR-21-5p抑制物;诱导后21 d时进行茜素红染色并检测A540水平,诱导后7 d时检测miR-21a-5p、PTEN、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(CoL-Ⅰ)的表达水平。培养PDLSCs并分为转染NC序列的NC组、转染miR-21a-5p模拟物的miR-21a-5p组,采用双荧光素酶报告基因验证miR-21a-5p靶向PTEN。结果 外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均高于对照组,PTEN的表达水平低于对照组(P<0.05);miR-21a-5p组PDLSCs中PTEN的表达水平及野生型双荧光素酶报告基因的荧光值均低于NC组(P<0.05);miR-21-5p敲低+外泌体组PDLSCs的A540水平及miR-21a-5p、ALP、OCN、CoL-Ⅰ的表达水平均低于NC+外泌体组,PTEN的表达水平高于NC+外泌体组(P<0.05)。结论 ADSCs来源外泌体通过调控miR-21a-5p/PTEN途径促进PDLSCs成骨分化。

负载CGRP及SP的明胶缓释微球用于修复家兔骨质疏松模型骨缺损的研究

目的:将负载不同浓度的降钙素基因相关肽(CGRP)及P物质(SP)的明胶缓释微球植入骨质疏松兔的股骨缺损中,观察其对骨缺损修复的影响。方法:通过去势方法建立兔骨质松模型,利用乳化交联的方法制备负载不同浓度的CGRP及SP的明胶缓释微球。将24只骨质疏松兔随机分组,于股骨髁部制备骨缺损并分别植入负载10-6 mol/L、10-8 mol/L和10-10 mol/L的SP以及CGRP的明胶微球,3个月后处死观察结果。结果:负载不同浓度的CGRP及SP均能有效地促进成骨,影像学结果示SP在10-6 mol/L时其骨体积分数最高,并且能有效提高骨小梁数量,降低骨小梁间的间距(P<0.05),CGRP在浓度为和10-8 mol/L时效果即达到上述效果;而组织学结果示SP和CGRP均在浓度为10-6 mol/L时其新生骨组织比例最高(P<0.05)。结论:负载不同浓度的CGRP及SP均能有效地促进骨质疏松兔骨缺损的成骨,在所研究的浓度中,高浓度的效果优于低浓度的效果。

维生素C增强衰老个体来源的骨髓间充质干细胞的增殖能力

目的观察维生素C(Vc)能否通过升高端粒酶活性促进衰老个体来源骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的增殖能力。方法以骨特异性早衰小鼠(SAMP6)为实验组,不发生早衰的R品系小鼠(SAMR1)为对照组,采用显微CT扫描技术验证SAMP6小鼠的骨衰老表型。分离培养两组小鼠的BMMSCs,其中SAMP6小鼠来源的BMMSCs分别应用不同浓度的Vc进行处理。采用MTT法检测BMMSCs的增殖能力,绘制生长曲线,使用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性,并用PCR和Western blot方法检测端粒酶逆转录酶(TERT)的表达水平。结果 SAMP6小鼠具有骨衰老表型,SAMP6小鼠来源的BMMSCs的增殖能力和端粒酶活性均低于SAMR1小鼠来源的BMMSCs,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入Vc后,在一定浓度范围内SAMP6小鼠来源的BMMSCs增殖能力随Vc浓度的升高而显著改善(P<0.05),同时其端粒酶活性和TERT表达水平有所提高(P<0.05),与增殖能力具有相关性。其中,Vc发挥促进作用的最适浓度为100μg/m L,在1000μg/m L时有抑制作用。结论维生素C能够增强衰老个体来源BMMSCs的增殖能力,且这种作用可能是通过升高端粒酶活性实现的。

齿科二硅酸锂玻璃陶瓷的滑动磨损行为

在人工唾液润滑条件下,利用销—盘磨损试验机研究了齿科二硅酸锂玻璃陶瓷的滑动磨损行为.结果表明:二硅酸锂玻璃陶瓷的磨损过程呈现显著的跑合磨损期,且跑合期的磨损率远大于稳定磨损期的磨损率;减小原始表面粗糙度可缩短跑合期,降低跑合期的磨损率.在二硅酸锂玻璃陶瓷的显微组织中,虽然二硅酸锂晶体相比玻璃基体具有更高的硬度,但在跑合磨损期却更容易发生剥落磨损,造成跑合期磨损表面粗糙度的显著变化,这种现象可能与二硅酸锂晶体具有较低的弹性断裂应变能力(H/E比值)有关.