PFKFB3促进腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、迁移、侵袭和转移

目的研究腺样囊性癌中糖酵解限速酶6-磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)的表达水平,及其对腺样囊性癌细胞增殖、迁移、体内成瘤的影响。方法应用免疫组织化学技术和Western blotting检测29例腺样囊性癌和10例癌旁正常唾液腺组织中PFKFB3的表达水平。腺病毒载体沉默腺样囊性癌ACC-2细胞中PFKFB3,通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell小室实验、裸鼠移植瘤模型和裸鼠肺转移模型观察PFKFB3沉默对细胞生长、迁移、侵袭、体内成瘤和远处转移的影响。结果免疫组织化学染色结果显示,PFKFB3在腺样囊性癌组织中阳性率为93.1%(27/29),在正常唾液腺中阳性率为20.0%(2/10),差异有统计学意义(χ^2=20.84,P<0.001)。四甲基偶氮唑蓝(MTT)增殖实验结果显示,72 h时,PFKFB3沉默后的腺样囊性癌ACC-2(PFKFB3--ACC-2)细胞组吸光度为1.8±0.2,明显低于ACC-2细胞组吸光度4.7±0.8,差异具有统计学意义(t=3.582,P=0.001)。细胞划痕实验结果表明,刮除细胞24 h后,PFKFB3--ACC-2细胞组划痕区细胞数量为(99.8±13.2)个,低于ACC-2组[(263.0±97.4)个],差异具有统计学意义(t=2.868,P=0.029)。Transwell小室检测结果发现,24 h时穿过基质胶的PFKFB3--ACC-2细胞数量[(17.6±2.1)个]明显少于ACC-2细胞[(28.6±3.8)个],差异有统计学意义(t=4.452,P=0.004)。PFKFB3--ACC-2细胞组肿瘤体积为(623.5±134.1)mm^3,明显小于ACC-2细胞组肿瘤体积[(1 621.0±278.1)mm^3],差异有统计学意义(t=4.213,P=0.001)。ACC-2细胞组裸鼠肺部转移灶数目为(18.1±3.2)个,明显多于PFKFB3--ACC-2细胞组[(4.1±2.2)个,t=6.322,P=0.001]。结论腺样囊性癌组织中PFKFB3表达水平明显高于正常唾液腺组织,且高表达的PFKFB3在腺样囊性癌细胞增殖、迁移、侵袭和转移等生物学行为中起促进作用。