口腔粘膜上皮癌前及癌变中PCNA和P53的表达

目的：检测口腔粘膜上皮癌前及癌变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达，探讨口腔癌变的机理。方法：采用免疫组化的方法检测８０例口腔粘膜病变组织中ＰＣＮＡ和ｐ５３的表达。结果：正常口腔粘膜基底层有少数ＰＣＮＡ阳性细胞，随着粘膜异常增生程度的加重到鳞癌，ＰＣＡＮ表达的阳性分级升高，ＰＣＮＡ的相对含量也升高。Ｐ５３的阳性表达仅见于重度异常增生及鳞癌组织中。结论：对ＰＣＮＡ和ｐ５３的研究有助于探讨口腔粘膜癌变多阶段发生过程的机理，并可为监测癌变提供生物学指标。

强化“三基”培训实现军队医院科学发展

"三基"培训是提高军队医院医疗基础质量的基石,医院从临床医师强化"三基"培训入手,采取多项措施,以科学发展保证医疗质量与安全,提升医院品牌的影响力。

综合性军队医院医疗质量管理基本原则

医疗质量是医院生存和发展的基础,随着国内医疗保障制度的全面改革和医疗市场份额竞争的进一步加剧,在这种新形势下,军队医院面临着前所未有的挑战。在我们看来,能否正确应对这一难题,关键在于必须掌握好军队医院医疗质量管理适用的一些基本原则。

口腔上皮癌变过程中肿瘤抑制基因p53基因产物的表达分析

为了探讨ｐ５３在口腔粘膜上皮癌变过程中的作用，本研究用免疫组织化学方法观察了ｐ５３在口腔颊粘膜上皮的正常（５例）、乳头状瘤（５例）、白斑（５例）、鳞癌（２７例）以及癌旁上皮（１４例）中的表达情况，结果显示，ｐ５３在鳞癌中的表达率为５５．６％；此外发现转移、复发及分化差的鳞癌表达率更高（６６．７％）。在同一病变中分化差的肿瘤细胞阳性率明显高于分化好的细胞。在白斑和癌旁上皮中ｐ５３也有表达（３６．８％）。结果显示，ｐ５３的表达与肿瘤细胞的分化及恶性程度密切相关，在口腔颊粘膜上皮的癌变早期及晚期均有ｐ５３的过表达，此外在癌前病变中的ｐ５３表达将有助于判断其癌变发展的可能。

bFGF及KGF的mRNA的表达与口腔粘膜上皮癌变的关系

采用原位杂交方法观察了角质细胞生长因子（ＫＧＦ）与成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在颊粘膜异常增生（ＤＹＳ）及鳞状细胞癌（ＳＣＣ）中的表达，并进行了分析。结果表明，在ＤＹＳ及ＳＣＣ间质中均检测到ＫＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ的表达，上皮细胞未见阳性表达，阳性反应部位位于血管内皮细胞、成纤维细胞，此外部分慢性炎细胞也见阳性反应。ＳＣＣ组的阳性表达率和程度均比ＤＹＳ增强。此结果提示：ｂＦＧＦ和ＫＧＦ不仅可以通过自分泌和旁分泌的方式促进间质中新生血管及间质的形成。

CD147和Ki-67在口腔黏膜白斑和鳞癌组织中的表达及意义

目的:观察CD147和ki-67在口腔正常黏膜、白斑和鳞癌组织中表达的变化,阐明CD147在口腔癌发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学法检测10例正常口腔黏膜、20例白斑伴上皮异常增生上皮和40例鳞癌组织中CD147及Ki-67的表达变化。结果:CD147在正常黏膜阴性表达,白斑和鳞癌组上皮均显著表达CD147;正常组Ki-67表达主要位于上皮棘层,鳞癌组织中Ki-67阳性细胞分布广泛,有大部分侵入固有层中。结论:口腔黏膜发生癌前病变时,即出现CD147表达阳性,随着Ki-67阳性细胞数的增多,癌变细胞增殖不断加强,两者共同作用促进鳞癌的发展。

涎腺癌肉瘤临床及病理分析

目的 :探讨涎腺癌肉瘤的临床病理学特点及其鉴别诊断。方法 :对 3例涎腺癌肉瘤患者的临床资料进行回顾性研究并复习相关文献 ,对全部病例的组织学标本重新进行镜下观察。结果 :涎腺癌肉瘤临床表现常为迅速增大的颜面部肿物并伴疼痛。光镜下组织学观察常可见肉瘤和癌两种成分并存 ,癌多为鳞状细胞癌和腺癌 ,肉瘤以骨或软骨肉瘤为主。结论 :涎腺癌肉瘤的临床特点与涎腺其他恶性肿瘤较难区别 。

口腔黏膜病教学中循证医学思维的培养

口腔黏膜病学是口腔医学中一门特殊的学科,因其与普通内科学关系密切,且病种繁多,故学习困难大;而在临床实习阶段,学生实践时间短,因此造成口腔医学毕业生在口腔黏膜疾病的诊治中实践能力普遍较低。循证医学是一种新式高效的终身学习和主动学习的医学教育模式,在当前口腔医学的教育结构下,更适用于口腔黏膜病学的教学。

口腔粘膜鳞癌的凝集素组织化学研究

细胞表面的枝状糖分子是膜糖蛋白和糖脂的组成部分。目前认为细胞间的联系、细胞的生长和肿瘤发生都和遍布于细胞表面的糖链的结构和功能有关。凝集素(lectin)是一类植物蛋白,具有与特定的糖链专一结合的特性。利用标记的凝集素可测定细胞膜上糖的分布,鉴别肿瘤细胞与相应正常细胞结构的差异,阐明细胞恶变过程中膜结构的改变。

人牙周膜干细胞的体外分离、纯化及初步鉴定

目的:体外分离纯化人牙周膜干细胞,研究其生物学特性及表型特点并进行初步鉴定。方法:采用胶原酶和D ispase酶联合消化法培养人牙周膜干细胞,有限稀释法分离纯化,将克隆形成的细胞通过透射电镜观察其超微结构、流式细胞仪细胞周期分析及免疫组织化学染色技术检测抗波形丝蛋白(V im en-tin)、STRO-1、骨粘素(ON)、骨涎蛋白(BSP)的表达。结果:获得纯化人牙周膜干细胞,在透射电镜下,这种细胞核质比例大,核大,细胞器少;流式细胞仪细胞周期分析大多数细胞处于G0/G1期,为慢周期性;该细胞抗波形丝蛋白、STRO-1表达阳性、骨粘连素、骨桥蛋白弱阳性表达。结论:提供了比较有效的分离纯化牙周膜干细胞的方法。该方法分离的人牙周膜干细胞具有干细胞的超微结构、细胞周期及表型特点。

CD147和MMP-2、VEGF在腺样囊性癌侵袭转移中的作用

目的:研究CD147和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)组织中的表达和意义。方法:采用免疫组化EnvisionTM法检测72例ACC组织中CD147和MMP-2、VEGF的表达情况,结合临床病理资料进行统计分析。结果:CD147和MMP-2、VEGF在ACC组织中高表达,阳性表达率分别为62.5%、65.3%、73.6%;三者的表达均与肿瘤病理分型和临床分期有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄无明显关联(P>0.05);神经侵袭组的CD147和MMP-2表达明显强于无神经侵袭组(P<0.05),VEGF在有无神经侵袭组间的表达无统计学差异(P>0.05);血管侵袭组和肿瘤发生转移组的CD147和MMP-2、VEGF的表达均明显强于对应组(P<0.05);CD147的表达与MMP-2和VEGF的表达具有显著相关性(P<0.001)。结论:CD147和MMP-2、VEGF的表达与ACC的侵袭转移密切相关,检测三者的表达有助于对ACC进行临床病理研究及转移潜势预测。

脱细胞真皮组织工程鼓膜在豚鼠鼓膜修补术中的应用

目的观察脱细胞真皮组织工程鼓膜在鼓膜修补术动物实验中的效果。方法建立豚鼠慢性鼓膜穿孔模型30只,同时构建复合成纤维细胞的脱细胞真皮组织工程鼓膜。将每只豚鼠左耳作为手术耳,施行内植法植入组织工程鼓膜,右耳作为空白对照。每周观察鼓膜愈合情况、听阈变化,同时观察组织学结构改变。结果鼓膜修补手术30耳中,2耳因感染而未愈合,愈合率为93.3%;对照耳仅4耳愈合,愈合率为(13.3%);愈合鼓膜外观与正常鼓膜相似,听性脑干反应测试示术耳听力恢复正常。苏木精-伊红染色结果表明采用组织工程鼓膜修复的的鼓膜有着正常鼓膜的三层结构,即鳞状上皮层、中间纤维层及粘膜层,而空白对照耳自行修复的鼓膜中缺少纤维层结构。结论组织工程鼓膜可以作为良好的鼓膜移植材料。

冻干骨松质与转染有血管内皮细胞生长因子的骨髓基质干细胞体内成骨实验

目的:探讨冻干骨松质与转染有血管内皮细胞生长因子(VEGF)的骨髓基质干细胞(BMSC)能否在体内更有效地成骨。方法:采用新西兰大白兔BMSC体外培养扩增,然后用脂质体的方法将VEGF转染入该BMSC,再使其附着于同种异体冻干骨松质,并植入自体肌袋。8周后取标本进行苏木精-伊红染色、三色法染色观察。结果:8周时可见到转染有VEGF的BMSC复合冻干骨松质组在标本的表面有软骨和骨质形成,BMSC复合冻干骨松质组在标本的表面有成骨细胞、破骨细胞出现,并有类骨质形成,而单纯植入冻干骨松质组仅有大量纤维包裹。结论:转染有VEGF的BMSC复合冻干骨松质具有较好成骨活性,优于单纯BMSC复合冻干骨松质。

肿瘤抑制基因p53在涎腺肿瘤中的表达及分析

用免疫组化方法观察了肿瘤抑制基因ｐ５３在良性及恶性涎腺肿瘤中的表达。结果显示，ｐ５３在３２％（８／２５）的多形性腺瘤及８３％（１０／１２）的恶性涎腺肿瘤（包括粘液表皮样癌、腺泡细胞癌、腺样囊性癌及多形性腺瘤恶变）中有过表达。结果揭示了ｐ５３在涎腺肿瘤中的表达率较高，尤其是恶性肿瘤中。表明涎腺肿瘤的发生可能与ｐ５３基因的异常有密切的关系。

981208冲剂抑制二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌细胞增殖活性

目的 :探讨中药 9812 0 8冲剂对二乙基亚硝胺 (DEN )诱癌过程中肝细胞增殖活性的影响。方法 :建立 DEN诱肝癌大鼠模型 ,采用免疫组化染色方法及计算机图像分析技术检测了 9812 0 8冲剂对诱癌过程中肝细胞阳性表达细胞增殖核抗原(PCNA)、H - ras蛋白及诱癌后期溴化脱氧尿嘧啶 (Brd- U )细胞标记指数的影响。 结果 :DEN诱肝癌过程中 ,PCNA、H - ras阳性表达呈逐渐增加趋势 ,两者表达显著正相关。 9812 0 8冲剂可明显抑制诱癌过程中两蛋白的阳性表达 ,显著降低诱癌后期Brd- U细胞标记指数。 结论 :中药 9812 0 8冲剂可抑制大鼠肝癌形成过程中肝细胞增殖活性 。

慢性鼓膜穿孔动物模型的构建

目的 建立慢性鼓膜穿孔的动物模型。方法 将 10只豚鼠于麻醉后在显微镜下以虹膜切开刀将豚鼠鼓膜双侧紧张部前方部分切除 ,以耳显微刮匙刮除鼓膜穿孔边缘鼓室侧黏膜上皮 ,于穿孔四角放射性切开 1mm后将创缘内翻。术后每日于麻醉后在显微镜下观察鼓膜愈合情况。 8周后于光镜下观察穿孔鼓膜结构。结果 10只豚鼠共 2 0耳鼓膜中 16耳鼓膜经 2个月未能愈合 (80 % )。所有穿孔均占紧张部面积约 4 0 %左右。 3耳鼓膜感染。1耳鼓膜经 10次手术后仍自行愈合。结论 通过鼓膜部分切除加边缘内翻的方法可以成功地建立慢性鼓膜穿孔的动物模型。

肠绦虫病误诊误治分析

目的探讨分析肠绦虫病误诊的原因,以提高诊治率。方法分析误诊误治病例资料。将可疑绦虫节片白色扁状物进行改进,3 000r/min离心5min,取沉淀物涂片,光学显微镜下查找虫卵;并采用中药联合驱虫。结果人们缺乏肠寄生虫的知识,将肠绦虫节片误诊为肠黏膜;从白色扁状物查见数量不等的完全和不完全性绦虫卵;应用中药联合驱虫取得满意的效果。结论改进的检查方法简便快速、准确可靠,适用于各级医疗单位肠绦虫病的确诊及良好的驱虫效果。重视扁阔状白色肠绦虫节片与不规则的肠黏膜鉴别以及熟悉治疗方法,以减少误诊率。

三种组织工程鼓膜的构建

目的构建3种不同材料的组织工程鼓膜,并对其进行生物学特性检测。方法体重30kg健康雄性小白猪1只,制备脱细胞硬脑膜及脱细胞真皮,并从牛皮中提取液态胶原,将第3代豚鼠鼓膜成纤维细胞1×106个/mL,各0.2mL种于3种材料表面进行培养,倒置相差显微镜下观察成纤维细胞的生长状态。培养1周后,将3种材料分别进行扫描电镜及HE染色观察,测定材料厚度及其张力。结果成纤维细胞在3种材料表面生长良好,呈束状平行排列,其中以胶原与脱细胞真皮表面成纤维细胞生长情况较佳。HE染色及扫描电镜下可见成纤维细胞呈单层于3种材料表面连续生长。胶原膜、脱细胞真皮及脱细胞硬脑膜的平均厚度分别为9.4、10.0及10.4μm。张力强度测定,复合成纤维细胞的胶原组织工程鼓膜张力(1.417±0.030)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力为(24.500±2.040)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞硬脑膜张力为(53.300±2.600)N/mm2;复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力与正常豚鼠鼓膜张力26.700N/mm2最接近。结论脱细胞猪真皮为支架复合成纤维细胞构建的组织工程鼓膜,其张力与厚度均与正常豚鼠鼓膜相接近,是构建组织工程鼓膜的理想材料。

生殖细胞凋亡过程中外源性一氧化氮的参与及其效应

目的:观察大鼠睾丸生殖细胞凋亡与体外一氧化氮供体硝普钠干预的影响。方法:实验于2005-03/12在解放军第四军医大学西京医院检验科和秦都口腔医院病理科进行。取20×109L-1大鼠生殖细胞悬液0.5mL,分别加入0,100,200和300nmol/L浓度的硝普钠于37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱中分别孵育1,5,10,15和20h后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位末端标记法检测细胞凋亡情况,透射电镜观察生殖细胞超微结构,琼脂糖凝胶电泳检测生殖细胞凋亡特征性DNA片段。结果:①0,100,200和300nmol/L硝普钠作用生殖细胞15h,生殖细胞凋亡率分别为(1.48±0.35)%,(5.06±1.50)%,(9.25±1.28)%,(19.68±2.03)%,作用20h分别为(1.50±0.36)%,(9.51±1.26)%,(22.68±2.06)%,(46.37±2.08)%,呈剂量时间依赖性,加硝普钠的生殖细胞凋亡率明显高于未加硝普钠的生殖细胞(P<0.01)。②透射电镜观察硝普钠处理15～20h后的生殖细胞核染色质凝集,附着于核边缘呈新月形,核固缩、碎裂形成凋亡小体。③琼脂糖凝胶电泳显示生殖细胞DNA片段呈现凋亡特征性的梯形区带。结论:一氧化氮供体硝普钠可诱导生殖细胞的凋亡。