期刊文献+
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人可溶性CD83基因的克隆、原核表达和纯化
1
作者 李坤 王小霞 +3 位作者 徐皓 余春艳 张衍国 张惠中 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第21期1931-1934,共4页
目的:构建人可溶性CD83基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:利用反转录PCR方法从正常人外周血单个核细胞中获得可溶性CD83基因,克隆到表达载体pET-32a载体,构成重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达6×His融... 目的:构建人可溶性CD83基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:利用反转录PCR方法从正常人外周血单个核细胞中获得可溶性CD83基因,克隆到表达载体pET-32a载体,构成重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达6×His融合蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot检测和鉴定.表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化.结果:经酶切鉴定及测序证实可溶性CD83蛋白基因的原核表达载体构建正确.经SDS-PAGE及Western blot显示在Mr约32000处出现融合表达条带.融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的45%.重组蛋白经Ni-NTA亲和层析进行纯化后,得到了高纯度的融合蛋白.结论:成功克隆人外周血单个核细胞来源的可溶性CD83基因片段,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度融合蛋白. 展开更多
关键词 可溶性CD83基因 树突状细胞 原核表达 纯化
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部