插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤

评价插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤保肢手术的临床应用．方法：应用插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤19o例．从手术技术、肿瘤学、关节功能、并发症等方面全面综合评价此方法的临床应用效果．结果：恶性骨肿瘤134例，术后平均随访47mo，因远隔脏器转移死亡者32例，另有3例虽有肺部转移，但经转移病灶切除后现仍无瘤存活；存活率为74．2％；IO2例存活者中肢体关节功能优者72例，良者14例．骨巨细胞瘤56例，术后平均随访49mo，l例死于肺转移；3例局部复发，经行瘤段截除大段异体骨移植后治愈；35例关节功能属优，21例为良．结论：插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗骨肿瘤技术是一种创新的、有效安全的、临床效果显著的、治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤的新手段，值得继续应用、改进和评价这一治疗体系．

骨盆环区域骨肿瘤的外科治疗

评价半骨盆截除术、内半骨盆切除体外灭活再植或单纯旷置术、插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活水治疗骨盆部骨肿瘤；部分切除术及前后联合入路局部刮除并辅助以局部单纯放疗或（和）置管持续灌注化疗术治疗舱骨肿瘤的效果．探讨骨盆环区域骨肿瘤的各种外科治疗方法的优缺点，以便更有效地治疗该部位肿瘤．方法：7a中外科治疗骨盆环区域各类良、恶性骨肿瘤146例，其中应用半骨盆截除术治疗晚期骨盆骨肿瘤44例；内半骨盆切除体外灭活再植或单纯旷置术治疗骨盆部骨肿瘤Ic例；插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活术治疗骨盆部骨肿瘤42例；部分切除术及前后联合入路局部刮除术后局部单纯放疗或（和）置管持续灌注化疗术治疗各类船骨肿瘤SO例．平均随访3a以上，从肿瘤学、肢体关节功能学、并发症等方面综合评价上述各种外科治疗方法的代、缺点．结果：44例半骨盆截除患者仅存活16例．仅有少数年轻患者术后可佩带假肢行走，但步态极差；内半骨盆截除后体外灭活再植或旷置水1o例患者中，复发1例；死亡2侧；感染3例；肢体关节功能优良率为4o％．应用插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗骨盆骨肿瘤42例；8例局部复发，其中5例死亡．其余34例中肢体关节功能25例为优。9例尚可．2例感染，1例坐骨神经热损伤．

涉及股骨颈的良性骨肿瘤的外科治疗

目的:总结和探讨涉及股骨颈的良性骨肿瘤的外科治疗方法和经验,特别是使用微波射频技术进行相关治疗的体会。方法:对2005年1月-2015年1月在我院明确诊断为涉及股骨颈的良性骨肿瘤且行外科手术的共计54例患者进行回顾性分析。从入路选择,修复重建,微波使用等多方面综合评价临床治疗效果。结果:在所有共计54例患者中,复发为3例。剩余51例患者按照Mankin标准进行功能学评价。其中达优者为47例,良为4例。在47例达优患者中,39例患者可行重体力活动,8例患者伴有轻度臀部步态。按照Eneeking标准评价,患者评分为26~30分(28.3±1.5)。在并发症方面,2例患者出现皮肤浅层感染。未出现皮肤血管损伤,内固定断裂等严重并发症。结论:股骨颈具有特有的解剖学及生物力学特点。在治疗这一区域的良性骨肿瘤时,应注意相应的手术入路,残腔的彻底处理,充分的植骨修复等问题。微波射频技术为这一领域的治疗提供了新方法和思路。

骨骼肌肉系统肿瘤的治疗原则和相关研究现状

与常见的癌症（如肺癌、胃癌、肝癌等）相比，肉瘤的发生率远为低下．一个骨科医生，如果不是工作在设有骨肿瘤专科的医院中，很难积累起足够的处理恶性骨肿瘤的经验．作者简要地讨论了治疗良恶性骨肿瘤的一些重要的原则，包括保肢手术方法、辅助疗法、活检及转诊缺席的建立等．

四肢软组织低度恶性肿瘤的保肢治疗

目的:探讨四肢软组织低度恶性肿瘤的临床特点及保肢治疗的可行性。方法:2008年-2014年我院共34例四肢软组织恶性肿瘤患者:滑膜肉瘤11例,横纹肌肉瘤7例,脂肪肉瘤6例,腱鞘巨细胞瘤3例,平滑肌肉瘤3例,恶性纤维组织细胞瘤2例,软骨肉瘤1例,恶性肉芽肿1例。其中18例行肿瘤扩大切除术,6例行根除性切除术,5例行微波灭活瘤体切除术,3例行瘤段切除、离体灭活再植术,2例行局部切除术。根据患者具体情况术中给予皮瓣修复术。根据肿瘤性质和全身情况在术后给予放疗或化疗治疗。结果:全部34例患者均获得随访,随访时间(23.5±14.6)个月,其中3例患者复发,2例患者死亡。患肢功能良好。结论:对于四肢的软组织低度恶性肿瘤,及时给予扩大切除,微波灭活等合适的保肢治疗,可以取得良好的临床治疗效果和肢体功能恢复。

细胞移植治疗椎间盘退行性变研究进展

目前认为椎间盘退行性变是引起腰背痛的主要原因,也是骨科治疗的难点。临床上常采用椎管减压、腰椎融合或单纯髓核摘除手术治疗,可纠正脊柱不稳,改善临床症状,但无法使退变的椎间盘恢复正常的生理功能。应用细胞疗法治疗椎间盘退行性变,近年已成为生物学治疗领域的热点。多项研究显示,将自体椎间盘细胞或间充质干细胞作为种子细胞植入退变的椎间盘中,可有效地补充细胞数量,增加细胞外基质含量,从而延缓椎间盘退变进程,甚至修复受损的椎间盘。

miR-194慢病毒表达质粒的构建及对人骨肉瘤细胞系U2-OS转移的相关研究

目的:通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体,研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法:以miR-194前体及成熟体序列为模板,设计引物,进行PCR扩增,酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒,检测滴度,最终对人骨肉瘤细胞系U2-OS进行感染。获取稳定感染细胞后,进行Transwell、划痕等实验。结果:1)慢病毒表达质粒构建成功,沉默表达及过表达重组慢病毒的滴度分别为4×108TU/mL及1.5×108TU/mL;2)稳定过表达miR-194的人骨肉瘤细胞系U2-OS的转移能力较其他组有明显降低(P<0.01)。结论:成功构建了miR-194慢病毒表达载体,miR-194的表达水平对U2-OS细胞的转移能力具有显著影响,miR-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点。

骶骨肿瘤的综合治疗

目的 介绍骶骨肿瘤的外科手术治疗,重点阐述高位骶骨肿瘤的治疗手段。方法 自1992年1月～2000年3月共治疗骶骨肿瘤64例,骨巨细胞瘤、脊索瘤、神经源性肿瘤及转移癌为主要的诊断。对于低于S2的病变可安全地施行骰骨部分切除术;而对高于S2甚至高达腰椎的骶骨病变则采取前后联合入路、直视下刮除及局部置管持续化疗的方法,滴注时间可持续1周。研究证明高浓度的铂类药物对马尾神经无可见的不良影响。结果4例良性肿瘤者单纯行摘除术均治愈。9例部分切除者中仅1例复发;51例高位骰骨肿瘤的局部控制率为76.5％,无严重而无法控制的并发症。结论 前后联合入路、直视下刮除加局部高浓度化疗是高位骶骨肿瘤的有效治疗手段,多数患者可避兔创伤很大的全骶骨切除术。

microRNA-192抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响

目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-192抑制物(hsa-miR-192inhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-192的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞周期G_0/G_1细胞比例显著增加,G_2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。实验组凋亡率(13.6±2.1)%与阴性对照组凋亡率(7.1±0.5)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-192抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-192的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用,可能成为骨肉瘤生物治疗的新靶点。

CCND1基因3'-UTR区miR-15a-5p和miR-16-5p结合位点的荧光素酶报告载体构建及分析

目的:构建miR-15a-5p和miR-16-5p的荧光素酶报告载体,利用此载体分析并验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因3'-UTR区域的确切结合位点,探讨miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的相互作用关系。方法:通过Pubmed和miRBase数据库分别寻找到CCND1基因3'-UTR区域碱基序列和miR-15a-5p、miR-16-5p的碱基序列。找出理论结合位点后,构建荧光素酶报告载体,并用荧光素酶报告基因方法验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因之间的作用关系。结果:通过基因测序表明,本实验成功构建了CCND1a/Ma和CCND1b/Mb荧光素酶报告基因表达载体。将上述载体应用于荧光素酶报告基因实验,结果发现CCND1 b组的荧光素酶表达强度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的3'-UTR区域存在结合位点,其具体结合位置在CCND1b区。这在理论上意味着miR-15a-5p和miR-16-5p可以抑制CCND1基因的表达。

siRNA干扰LEF-1的表达对骨肉瘤细胞株F5M2侵袭和迁移的影响

目的:检测LEF-1在骨肉瘤细胞株F4和F5M2中的表达;探讨siRNA干扰前后对骨肉瘤细胞中LEF-1的表达及对细胞侵袭和迁移的影响。方法:采用Western-blot及qRT-PCR检测具有不同转移能力的骨肉瘤细胞株(F4,F5M2)中LEF-1的表达水平;利用RNAi干扰技术将LEF-1 siRNA转染到F5M2细胞中,使用Western-blot检测转染LEF-1 siRNA后细胞中LEF-1蛋白的表达变化;Tanswell实验检测干扰LEF-1的表达对F5M2细胞侵袭和迁移的影响。结果:LEF-1在骨肉瘤细胞株F4,F5M2中差异表达,其中在F5M2细胞中的表达较高。在转染LEF-1 siRNA的F5M2细胞中,LEF-1蛋白表达水平显著降低。Tan-swell实验结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组F5M2细胞的侵袭和迁移能力显著降低。结论:LEF-1 siRNA可以下调骨肉瘤细胞中LEF-1的表达,抑制骨肉瘤细胞的侵袭和转移。LEF-1有可能成为骨肉瘤诊治的新靶点。

异体脱钙骨基质骨粒复合骨水泥的临床应用及其配合

随着骨肿瘤保肢技术的不断提高,处理肿瘤术后骨缺损以防病理性骨折的发生已越来越受到重视.为使骨缺损修复材料既具有较好的生物力学性能及组织相容性,又具备骨诱导和骨引导能力,我院骨肿瘤研究所经过大量的实验研究,将异体脱钙骨基质骨粒(decalcified bone matrix,DBM)和骨水泥(bone cement,BC)复合制成生物性骨缺损修复材料,用于骨缺损修复重建.经过临床应用发现,病理性骨折及并发症极少发生,而且异体脱钙骨基质骨粒复合骨水泥材料具有结构合理及良好的赋行性和组织相容性,制备简单,成本较低等优点,可为修复部位提供较为坚固的生物力学支持,是进行骨缺损修复的可行途径[1,2].

敲低趋化因子受体7(CCR7)抑制MG63骨肉瘤细胞的增殖和侵袭并诱导其凋亡

目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖,TranswellTM侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 MG63细胞转染CCR7-siRNA后,细胞CCR7表达明显下调;同时细胞增殖明显减弱,侵袭和迁移能力明显下降,且细胞凋亡率升高。结论下调MG63骨肉瘤细胞的CCR7,可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移,并能诱导细胞凋亡。

骨盆肿瘤的手术治疗

目的 回顾性总结骨盆肿瘤的外科治疗经验,重点介绍“原位分离+高温灭活”的保肢技术。方法 自1992年1月～2000年3月共治疗骨盆肿瘤133例,其中外半骨盆截除术50例,内半骨盆切除后体外灭活再植或旷置术10例,高温灭活保肢术73例。高温灭活保肢组中IB期肿瘤21例,ⅡB期24例,ⅢB期2例,界限性或高度侵袭性肿瘤19例,另有Ewing肉瘤2例,转移癌5例。结果 外半骨盆截除组多为晚期病变而无法单独切除者,截止至2000年3月最后随访时,除7例失访外,存活1～8年者22例,死亡21例。内半骨盆切除组存活7例,但并发症高,功能差。高温灭活保肢组中IB期或骨巨细胞瘤共40例均得到局部控制,ⅡB期控制率70.8％（17/24）,2例Ewing肉瘤得到局部和全身控制,ⅢB期或转移癌7例中2例无瘤存活两年以上。与目前常用的其它类型的保肢手术相比,髋关节功能优良率明显提高。结论 除晚期肿瘤病例不得已施行半骨盆截除术外,对适宜的病例应用“原位分离+高温灭活”技术是治疗骨盆肿瘤的一种新的有效手段,值得继续使用及改进。

siRNA干扰FoxM1基因表达对人骨肉瘤MG63细胞增殖与凋亡影响研究

目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染FoxM1特异性siRNA(FoxM1-siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。实时-聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法检测转染前后FoxM1基因在mRNA及蛋白表达水平的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中存在FoxM1基因的表达。实验组MG63细胞转染siRNA后,FoxM1的mRNA表达为0.39±0.09,低于阴性对照组的0.91±0.07,t=7.92,P<0.001;也低于空白对照组的0.96±0.08,t=8.68,P<0.001。实验组FoxM1蛋白表达为0.31±0.06,显著低于阴性对照组的0.81±0.10,t=7.20,P<0.001;也低于空白对照组的0.89±0.09,t=8.35,P<0.001。实验组MG63细胞增殖率为0.36±0.03,显著低于阴性对照组的0.61±0.02,t=12.86,P<0.001;也低于空白对照组的0.65±0.02,t=14.92,P<0.001。实验组MG63细胞凋亡率为(13.69±1.15)%,显著高于阴性对照组的(2.38±0.90)%,t=14.16,P<0.001;也高于空白对照组的(2.87±0.86)%,t=13.54,P<0.001。结论人骨肉瘤细胞株中存在FoxM1蛋白的表达;特异性siRNA可下调骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因的表达,对细胞的增殖具有负性调控作用,并能诱导细胞凋亡。

影响骨肉瘤治疗预后效果的临床因素的研究进展

骨肉瘤是最常见的骨的原发性恶性肿瘤,常常好发于15-19岁。目前治疗上已经有了很大的进步,其最有效的治疗方案包括新辅助加上局部控制。但不幸的是,其治疗效果仍然非常低。因此在选择不同的治疗方式前需要对患者的预后进行严谨和科学的预测和判断,从而选择最佳的治疗方案。传统意义上影响骨肉瘤治疗预后效果的因素主要包括以下几点:年龄,性别,肿瘤大小,位置,分期和耐药性等。但是这些因素有着太多的测量和衡量方法,在不同的研究中进行统一标准下的比较是很难的。通常来讲,利用转移,耐药性等因素来进行预后的判断尽管能达到较高的准确性,但已经往往处于疾病的后期,对疾病治疗本身的意义不大。因此,需要去寻找新的,能够在早期对于预后进行判断,能够于早期进行准确的诊断从而进行早期治疗的方法。本文从位置,大小,年龄,分期,肿瘤的复发或转移,病理性骨折,手术和化学治疗等方面对骨肉瘤的预后及影响因素进行综述。

细胞支架研究进展

目前细胞培养通常采用二维平面培养技术,但由于在培养板和培养瓶二维细胞培养并不能完全模拟体内细胞的三维生长环境,因此所得的试验数据与在体情况有偏差。然而细胞支架材料却能为细胞提供一个良好的三维生长环境,更利于细胞粘附、生长和增殖。目前可用于细胞支架材料的来源有天然和人工两大类,现将细胞支架研究进展综述如下。

人工腰椎间盘置换研究应用进展

椎间盘病变是脊柱外科的常见疾病,是成年人疼痛和致残的常见原因,常常给人带来沉重的肉体和经济负担。经过长时间的发展与脊柱外科手术的进步,常规手术治疗在临床上虽然取得了一定的疗效,但是没有保留脊柱的生理运动功能,对临近阶段的椎间盘的退变起到促进作用,并且腰椎运动节段的融合加快了邻近节段椎间盘和小关节的退变。腰椎独特的解剖学特点和生物力学的研究及不同材质和特点的人工椎间盘材料的发展使人工椎间盘手术成为可能。与常规手术方式相比,人工椎间盘假体设计与人生理的解剖结构更加吻合。术后可以保持瞬时和长期的稳定性,从而对邻近的椎间盘的退变起到抑制作用。取得了较好的疗效。人工椎间盘置换术作为治疗腰椎间盘除腰椎融合之外的另一合理选择,目的是使退变导致的疼痛可以稳定长期缓解,并重建椎间隙高度以保护神经,从而避免晚期关节突关节及邻近节段的病变,恢复脊柱的运动学和载荷特性。目前人工腰椎间盘有了长远的发展,适应症不断扩大,但仍有较多限制。期待在将来能够找出更加符合人体生物力学特点的材料和设计,使之成为一种更为有效的治疗腰椎疾病的治疗方式。现就人工椎间盘的类型、疗效、适应证、禁忌证以及术后并发症等方面予以综述。

不同场强下IRE的肿瘤消融作用及对抗肿瘤免疫的影响

目的:探讨不同电场强度的不可逆电穿孔(IRE)对于肿瘤的消融效果以及其所引起的肿瘤免疫反应。方法:将B16黑色素瘤细胞接种于C57小鼠,制作黑色素瘤小鼠模型,应用不可逆电穿孔仪对肿瘤进行消融,通过测量肿瘤生长大小研究不同场强下的消融效果。通过CD4、CD8a免疫组化染色初步了解不同场强激发的免疫反应的强弱,从而选择最佳消融参数。结果:随着电场强度增加,肿瘤消融效果逐渐趋于理想,然而平板电极夹之间过高电场引发的热效应则不利于后续抗肿瘤免疫反应的激活。选择合适的电场,通过增加电击组数可以达到良好的治疗效果。结论:IRE对肿瘤的消融优势在于它能够很好的激活机体的抗肿瘤免疫反应,因此,选择合适的电场增加电击组数可以起到很好的抗肿瘤作用,具有很好的应用前景。