大鼠骨肉瘤模型的建立

为建立大鼠骨肉瘤动物模型的方法, 用30只6周龄SD大鼠随机分为3组,将大 鼠骨肉瘤细胞系UMR 106分别以105,106, 107个数量注入大鼠股外侧皮下。接种后,每 周观察肿瘤生长情况,测量肿瘤直径,绘制肿 瘤生长曲线,连续5周。第6周取肿瘤病理 材料,常规切片,HE染色,光镜下观察。结果 105个细胞及106个细胞组肿瘤生长情况不 佳;107个细胞组肿瘤发生率达到100%。说 明大鼠骨肉瘤细胞系UMR 106具有较强的 致瘤性,应用该细胞系建立的动物模型为骨 肉瘤综合治疗奠定了动物实验基础。

骨肉瘤肺转移大鼠模型的建立

目的:探讨大鼠骨肉瘤细胞系接种细胞的数量与肿瘤形成及肺转移发生的关系。方法:30只6周龄SD大鼠随机分为3组,大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106分别以1×105,1×106,1×107个数量注射入大鼠股外侧皮下。接种后,每周观察肿瘤生长情况,测量肿瘤直径,绘制肿瘤生长曲线,连续5周。第6周取肿瘤及双侧肺,病理取材,苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察。结果:1×105及1×106组肿瘤生长情况不佳,未出现肺转移;1×107组肿瘤发生率达到100%,肺转移率达70%。结论:大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106具有较强的致瘤性及较高的肺转移率,应用该细胞系建立的动物模型为骨肉瘤综合治疗奠定动物实验基础。

人成骨肉瘤细胞系转化生长因子β1成熟肽基因克隆及序列分析

目的 :分析人成骨肉瘤细胞系中转化生长因子 β1(TGF β1)成熟肽基因序列 ,探讨TGF β1基因突变存在的可能性及其病理机制。 方法 :提取人成骨肉瘤细胞系SOSP 96 0 7中的总RNA ,采用逆转录PCR(RT PCR)方法获得TGF β1成熟肽基因 ,经克隆后进行序列测定和分析。 结果 :发现人成骨肉瘤细胞系中存在TGF β1基因突变 ,并引起相应多肽的结构改变。 结论 :人成骨肉瘤细胞系SOSP 96 0 7中存在TGF β1基因突变 。

全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞抑制增殖和诱导分化的实验

目的:探讨应用全反式维甲酸处理细胞增殖和分化对人骨肉瘤细胞的影响。方法:实验于2004-08/2005-01在第四军医大学唐都医院解放军骨科中心骨肿瘤研究所完成。以1×10-6mol/L的全反式维甲酸处理人骨肉瘤OS-9901细胞为试验组,对照组细胞不加全反式维甲酸处理。观察维甲酸对骨肉瘤细胞诱导分化向良性细胞发展的作用。①计算细胞增殖抑制率,通过四唑盐检测。②用药后细胞形态的变化,以显微镜观察。③骨肿瘤较为特异性的碱性磷酸酶表达变化,应用碱性磷酸酶染色观察。④用药对骨形成蛋白2表达的影响,表达增高促进骨肿瘤细胞的增殖,应用免疫组织化学染色观察。⑤细胞的变化应用透射电镜观察。⑥计算成瘤率,并对试验组与对照组肿瘤体积大小进行比较,采用裸鼠移植瘤试验。结果:①全反式维甲酸处理第2天对人骨肉瘤OS-9901细胞生长的平均抑制率为25.2%,第4天达到51.7%,第6天为68.4%。②显微镜下可见处理后的细胞生长及形态有明显改变,增殖缓慢,生长差,数量减少,分裂像少见。③碱性磷酸酶和骨形成蛋白2的表达减少。④透射电镜下出现处理后细胞膜绒毛减少,胞核光滑无切迹,核浆比例下降等良性分化改变。⑤各组肿瘤的成瘤率均为100%,成瘤期对照组约为7d,实验组约为10d,用药组瘤细胞核浆比例较对照组减小,出现大量的凋亡细胞和大片的坏死区,显示有明显抑制增值和向良性转变倾向。结论:全反式维甲酸有抑制骨肿瘤细胞增殖,并诱导其向良性分化作用。

树突状细胞肿瘤疫苗的研究进展

树突状细胞 (DC)是目前发现功能最强的专职抗原呈递细胞 (APC) ,DC疫苗的开发研制尚处于早期阶段 ,但已获得的大量有价值的实验数据可以表明 ,DC在启动抗肿瘤免疫的抗原呈递中发挥出强大的功能。DC体外培养的方法渐趋成熟 ,提高DC生物学功效的手段多彩纷呈 ,日益增多的临床研究工作推动着该领域的迅速发展。作者就DC肿瘤疫苗制备方法及其在临床试验中的应用作一综述 ,并提出该免疫治疗中尚存在的一些问题。

肱骨近端锁定接骨板治疗肱骨近端粉碎性骨折

目的探讨应用肱骨近端锁定接骨板（locking proximal humerus plate，LPHP）内固定治疗肱骨近端粉碎性骨折的可行性和疗效。方法对2004年9月至2007年9月收治并获得随访的18例肱骨近端骨折进行回顾性分析，其中男7例，女11例，年龄25～79岁，平均52．8岁。所有骨折均按Neer分型：二部分骨折4例，三部分骨折6例，四部分骨折8例，其中骨质疏松7例。手术经三角肌、胸大肌间隙入路，采用肱骨近端锁定接骨板对骨折进行固定，对其中6例存在严重骨缺损患者进行自体骨植骨。结果随访8—24个月，平均12．5个月，骨折均愈合。采用Neer肩关节功能评分标准评定：优6例，良7例，中3例，差2例，优良率为72．2％。合并内翻畸形1例，肱骨头缺血性坏死2例（术后1年行人工肱骨头置换术），肩关节创伤性关节炎2例，骨折延迟愈合1例。结论肱骨近端锁定接骨板内固定是一种有效的适宜于肱骨近端粉碎性骨折的治疗方法，既能实现对骨折断端的稳固固定作用，又避免了对骨块附着软组织和骨膜的过多剥离，可有效地遏制肱骨头的缺血性坏死。

不同转移潜能骨肉瘤细胞株的筛选与建立

目的获得不同转移潜能的骨肉瘤细胞株。方法从我室建立的人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中通过有限稀释法获得不同的单细胞克隆,经过侵袭试验初筛后获得5株转移潜能不同的细胞株,再通过裸鼠体内连续传代法筛选出具有不同转移能力的细胞系。结果获得两株转移潜能不同的骨肉瘤细胞株。结论这两株细胞株它们来源于同一亲本,他们之间的差异集中在转移表型上,为今后利用分子生物学的方法筛选出转移相关基因,从而为成骨肉瘤的转移机制及临床研究奠定基础。

闭合复位空心拉力螺钉内固定治疗距骨颈骨折

目的评价采用闭合复位辅助空心拉力螺钉内固定治疗距骨颈骨折的可行性和疗效。方法对2002年9月至2005年9月收治并获得随访的19例距骨颈骨折进行回顾性分析。所有骨折均按Hawkins分型:Ⅰ型6例,Ⅱ型10例,Ⅲ型3例,全部采用闭合复位辅助空心拉力螺钉内固定方法治疗,术后复查随访,条件允许时去除石膏外固定,进行功能锻炼。结果随访1～3年,平均19.6个月,采用Hawkins评分:优5例(Ⅰ型2例、Ⅱ型3例),良7例(Ⅰ型4例、Ⅱ型3例),中3例(Ⅱ型2例、Ⅲ型1例),差4例(Ⅱ型2例、Ⅲ型2例),优良率为63.2%。合并内翻畸形2例,距骨缺血性坏死3例,踝及距下关节创伤性关节炎4例,骨折延迟愈合1例,4例术后1年行关节融合术。结论闭合复位辅助空心拉力螺钉内固定是一种有效的适宜于距骨颈骨折的治疗方法。既能实现骨折复位和稳固固定的作用,又避免了切开复位和内固定对骨折周围血供的进一步破坏,可降低距骨的缺血性坏死的发生。

转化生长因子β1基因突变对细胞生物学行为改变的可能意义(英文)

背景:通过测序进行序列分析是发现基因突变的直接手段,转化生长因子β1(TGF-β1)作为细胞最主要的生长调控因子,参与多项生理和病理过程。该基因的突变对于所在细胞的生物学行为改变可能具有重要意义。目的:分析人成骨肉瘤细胞系中TGF-β1成熟肽基因序列,探讨TGF-β1基因突变存在的可能性及其机制,为肿瘤及骨软骨损伤的基因治疗提供新思路。设计:非随机非对照实验研究。地点和对象:实验在第四军医大学唐都医院解放军骨科中心骨肿瘤研究所完成,对象为人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607(本室建立)。干预:提取人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中的总RNA,参照Genebank数据库中的已知序列设计合成引物,采用RT-PCR法扩增TGF-β1成熟肽基因,克隆入质粒pcDNA3.0进行序列测定和分析。主要观察指标:将多次测序所得的TGF-β1成熟肽基因序列与Genebank数据库中的已知序列进行比较,分析恒定差异。结果:发现人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中TGF-β1基因存在两处点突变,其中第1788位突变引起相应多肽的结构改变。结论:人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中存在TGF-β1基因突变,其可能在病理机制中起重要作用,具有强功能活性突变子的获得对于骨软骨损伤的修复有重要意义。

人存活素基因编码区的克隆和序列分析

目的 :克隆人存活素 (survivin)基因编码区cDNA并进行序列分析。 方法 :以人骨肉瘤细胞系MG6 3的mR NA为模板 ,采用RT PCR方法得到人存活素的编码区cDNA ,克隆至载体pUC19中 ,酶切鉴定后进行序列分析。结果 :获得人存活素编码区基因和重组质粒pUC19 SURVIVIN ,DNA序列分析证实所获得的存活素基因编码区cDNA序列和文献报道一致。 结论 :采用基因克隆的方法获得人存活素基因 ,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。

断指再植手术的护理配合

目的探讨断指再植手术的最佳手术配合方式。方法对22例断指患者(共37指)的心理护理,物品器械准备,手术中器械护士、巡回护士配合,出现血管危象处理的护理配合等进行回顾。结果所有患者获得3个月的随访,其中1例患者(1指)再植成功后因指动脉栓塞无法吻合而截指,1例患者(2指)因受伤时间稍长,软组织污染严重,术后出现感染,血管破裂而截指外,其他患者再植断指全部成活。结论术前、术中对患者的主动、精心护理,可以降低发生血管危象的机率;严格执行无菌操作技术,提高术中配合的熟练程度,尽量缩短手术时间,可以减少术中及术后污染和感染的发生,提高断指成活率。

骨肉瘤动物模型的应用现状

骨肉瘤是人类最常见的原发性恶性骨肿瘤,多发于青少年,其恶性程度很高,常常危及生命。利用动物模型对该病进行研究,是进一步探索其病因和治疗方法的重要手段之一。自发肿瘤模型,诱发肿瘤模型和移植肿瘤模型是目前通常被采用的骨肉瘤动物模型建立方法。本文对骨肉瘤动物模型的分类,建立方法及其应用方法进行综述。

外固定架治疗高能量胫骨开放骨折的康复护理

目的探讨外固定架治疗高能量胫骨开放骨折的术后康复护理方法。方法2004年6月-2006年6月共计52例胫骨开放粉碎性骨折的患者,平均年龄42.6岁,其中左小腿33例,右小腿19例;男31例,女21例。全部采用单臂外固定架治疗。对52例患者术后做好心理护理、制定护理措施、加强病情观察和功能锻炼。结果所有患者获得12-18个月的随访（平均14.7个月）,其中2例保肢成功后因严重开放伤术后感染最终截肢,2例出现外固定架针道后期感染,5例发生骨不连,其他患者骨折全部愈合,骨折愈合时间为10-32周,平均18.5周。结论外固定架是一种有效的、适宜于高能量胫骨骨折的治疗方法,配合有效护理,可提高手术成功率,促进患者康复。

六亚甲基双乙酰胺与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS-9901细胞的抑制作用

目的 :研究六亚甲基双乙酰胺 (HMBA)与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS 990 1细胞的抑制作用。 方法 :用MTT法检测HMBA、紫杉醇单用或二者合用对体外培养的人骨肉瘤OS 990 1细胞增殖变化的影响。 结果 :在单用紫杉醇处理组中 ,不同药物浓度均未使增殖细胞抑制达到生长半数。在先用 1.0 μg/ml紫杉醇处理 6h后再加用 1mmol/LHMBA组中 ,抑制率由 18%增至 5 9%。 0 .1μg/ml紫杉醇先处理 2 4h组中 ,抑制率由 2 3 %增至 67%。HMBA明显增强了紫杉醇的抗癌作用。 结论 :HMBA与紫杉醇联合应用对骨肉瘤保肢术后的治疗可能有一定的价值。